充血性心力衰竭患者血清sICAM－1及白細(xì)胞膜黏附分子水平檢測

朱 濤，許軍秀，徐 明

鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院檢驗科 鄭州450052

#通訊作者，男，1968年10月生，本科，副主任技師，研究方向:免疫微生物，E－mail:taotao010608@sina.com

充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是大多數(shù)心血管疾病的最終歸宿，其發(fā)展過程是一種與細(xì)胞免疫有關(guān)的慢性炎癥過程。國內(nèi)學(xué)者研究［1－2］證實，持續(xù)的神經(jīng)內(nèi)分泌激活、細(xì)胞因子活化、細(xì)胞內(nèi)信息傳導(dǎo)通路的改變等變化可導(dǎo)致心肌細(xì)胞壞死和心室重塑，從而引發(fā)心室功能的進(jìn)行性惡化，直至終末期CHF 的發(fā)生。白細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移至血管壁間隙是組織損傷和炎癥反應(yīng)的必要步驟，白細(xì)胞與血管內(nèi)皮的黏附則是此過程的起始步驟，而黏附分子則介導(dǎo)全過程。研究［3］表明黏附分子參與了CHF 的疾病進(jìn)程。作者分析了CHF 患者血清中可溶性細(xì)胞間黏附分子－1(soluble intercellular adhesion molecule－1，sICAM－1)及白細(xì)胞膜黏附分子(CD11a 和CD18)水平，進(jìn)一步探討CHF 發(fā)生的可能機(jī)制。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院2010年12月至2011年8月收治的CHF 患者80例，男50例，女30例，年齡49～75 歲，診斷符合紐約心臟病學(xué)會(NYHA)心功能分級標(biāo)準(zhǔn)［2］，均為Ⅱ～Ⅳ級，超聲心動圖示左室舒張末期內(nèi)徑＞55 mm 且左室射血分?jǐn)?shù)＜55%，其中Ⅱ級20例，Ⅲ級28例，Ⅳ級32例。基礎(chǔ)心臟病類型:風(fēng)濕性心臟病15例，冠心病25例，高血壓心臟病10例，擴(kuò)張型心肌病30例。對照50例，男30例，女20例，年齡40～72 歲，均為該院健康體檢者，經(jīng)臨床、心電圖、X 線胸片、常規(guī)生化等檢查無器質(zhì)性疾病及心功能障礙，近10 d 內(nèi)未服抗凝藥、抗高血壓藥、抗心衰藥、抗炎藥及免疫抑制劑等。觀察對象均排除感染、全身免疫性疾病、惡性腫瘤及嚴(yán)重肝腎疾病。

1.2 血清sICAM-1 的檢測 晨起空腹抽取研究對象靜脈血2 mL，3 000 r/min 離心10 min，取血清0.5 mL 左右，－20℃保存。用ELISA 法進(jìn)行sICAM－1檢測，檢測試劑盒購自晶美生物工程有限公司，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.3 血清CD11a、CD18 的檢測 晨起空腹抽取研究對象靜脈血2 mL，肝素抗凝，采用FACSCalibur 流式細(xì)胞儀檢測CD11a 和CD18。取抗凝血50 μL，加入FITC 標(biāo)記的CD11a 及CD18 單克隆抗體(Becton Dickson 公司)20 μL，充分混勻，嚴(yán)格按照試劑盒要求檢測CD11a 和CD18 陽性細(xì)胞百分率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0 進(jìn)行分析。2組間血清sICAM－1 水平、CD11a 及CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較采用兩獨(dú)立樣本t 檢驗;不同心功能分級及不同基礎(chǔ)心臟病類型CHF 患者上述指標(biāo)的比較采用單因素方差分析及LSD-t 檢驗;檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 CHF組與對照組血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較 CHF 患者血清sICAM－1 水平、CD11a 及CD18 陽性細(xì)胞百分率高于對照組，見表1。

2.2 不同基礎(chǔ)心臟病類型CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較見表2。不同基礎(chǔ)心臟病類型CHF 患者血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 CHF 及對照組血清sICAM-1水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較

2.3 不同心功能分級CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較 見表3。

表2 不同基礎(chǔ)心臟病類型CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較

表3 不同心功能分級CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率的比較

3 討論

sICAM－1 屬于內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的免疫球蛋白超家族成員，是白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附的關(guān)鍵因子，參與機(jī)體的免疫和炎癥反應(yīng)［4－5］。目前發(fā)現(xiàn)ICAM－1的配體主要有淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原－1(LAF－1，又稱CD11a/CD18)、巨噬細(xì)胞抗原1(Mac－1，又稱CD11b/CD18)和β2 整合素［6］。通常心肌細(xì)胞只表達(dá)極少量的sICAM－1，但在某些病理因素刺激下，如心臟手術(shù)、心肌缺血再灌注［7］、心臟移植排斥反應(yīng)及白細(xì)胞介素1(IL－1)、腫瘤壞死因子－α(TNF－α)和脂多糖(LPS)等炎癥因子刺激后，心肌細(xì)胞膜sICAM－1 的表達(dá)可成倍增加，sICAM－1 脫落后以可溶性形式存在于血液中，因此外周血sICAM－1 水平可反映心肌細(xì)胞表面sICAM－1 表達(dá)的程度，是反映炎癥程度的標(biāo)志。

CD11a/CD18 屬整合素超家族的細(xì)胞表面糖蛋白，只在白細(xì)胞上表達(dá)，CD11a/CD18 作為sICAM－1 的受體與之結(jié)合，在介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、越血管遷移和向病變組織中浸潤這一過程中起始動作用。sICAM－1 廣泛分布于內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞［8］，在炎性細(xì)胞因子的作用下，其表達(dá)可迅速上調(diào)，對淋巴細(xì)胞有趨化作用，從而促進(jìn)炎癥的發(fā)生。研究［9］發(fā)現(xiàn)，急性心肌炎、擴(kuò)張型心肌病、慢性缺血性心肌病等導(dǎo)致的CHF 患者血清sICAM－1 等細(xì)胞因子水平增高，可導(dǎo)致心肌炎癥反應(yīng)，引起心肌損傷和壞死，在CHF 的病理生理和發(fā)病機(jī)制中起重要作用。CHF 時細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的正常調(diào)節(jié)發(fā)生失控，表現(xiàn)為促炎性細(xì)胞因子大量增加，而抗炎性細(xì)胞因子相對降低，使CHF 患者已經(jīng)存在的血流動力學(xué)紊亂進(jìn)一步惡化［10］。羅興林等［11］發(fā)現(xiàn)心衰患者存在細(xì)胞免疫功能異常，并可激活補(bǔ)體系統(tǒng)，造成免疫損傷，加重心功能的減退。

該研究發(fā)現(xiàn)，CHF 患者血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率明顯高于健康對照組，且隨著CHF 患者心功能分級的增加，上述指標(biāo)亦相應(yīng)升高，提示CHF 患者存在心肌炎癥反應(yīng)增強(qiáng)的趨勢。作者還發(fā)現(xiàn)，不同基礎(chǔ)心臟病類型CHF 患者間血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 陽性細(xì)胞百分率差異并無統(tǒng)計學(xué)意義，說明不論何種原因?qū)е碌腃HF，以sICAM－1 介導(dǎo)的心臟炎癥反應(yīng)都可能是誘發(fā)或加重CHF 的原因之一。因此，黏附分子有望成為預(yù)測CHF 嚴(yán)重程度及預(yù)后估計的一項重要指標(biāo)。通過抗黏附治療，影響炎癥反應(yīng)的啟動，減少白細(xì)胞在心肌組織中的浸潤，從而逆轉(zhuǎn)和改善心肌功能，有可能成為治療CHF新的有效的治療方法。

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