枳殼總黃酮降血脂作用的實(shí)驗(yàn)研究*

李順文 吳琦 趙詩云 王小青

(1 江西省南昌縣人民醫(yī)院 南昌330200；2 江西省中醫(yī)藥研究院 南昌330046）

枳殼為蕓香科柑橘屬酸橙及其栽培變種干燥未成熟果實(shí)，味苦、辛，性微寒，功能理氣寬中，行滯消脹，用于胸脅氣滯、脹滿疼痛、食積不化、痰飲內(nèi)停等。枳殼中主要含有黃酮、揮發(fā)油和少量生物堿三大類成分，黃酮是枳殼的一類主要化學(xué)成分，現(xiàn)代藥理研究表明枳殼黃酮具有廣泛的藥理作用，因此研究開發(fā)枳殼黃酮類成分具有重大意義。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥品 枳殼藥材購于黃慶仁棧華氏大藥房，經(jīng)鑒定符合中國藥典2005 版規(guī)定。枳殼總黃酮：枳殼粉碎，用10 倍飽和氫氧化鈣浸提3 次，并將3 次提取液合并，濾過后，將濾液通過預(yù)處理好的大孔吸附樹脂D101，吸附完畢后，先用水洗至無色后，再用10 倍70%乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，得枳殼總黃酮洗脫液。洗脫液真空干燥即得枳殼總黃酮提取物。經(jīng)測定枳殼總黃酮提取物以對照柚皮苷計(jì)總黃酮含量為85%。

1.2 動物 SD 雄性大鼠(200～260 g)，由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物部提供。

1.3 試劑 膽固醇分析純，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司，批號：110706；膽酸鈉分析純，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司，批號：110620；丙硫氧嘧啶片，上海朝暉藥業(yè)有限公司，批號：120205；總膽固醇試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司，批號：120630；高密度膽固醇試劑盒，生北控生物科技股份有限公司，批號：120241；低密度膽固醇試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司，批號：120231；福臨門非轉(zhuǎn)基因花生油，中糧北海糧油工業(yè)有限公司，生產(chǎn)日期：2012-02-14。

1.4 儀器 全自動生化分析儀，ACE，美國。

2 實(shí)驗(yàn)方法

高脂乳劑的配方：1 L 花生油中含有100 g 膽固醇、30 g 丙基硫氧嘧啶和100 g 膽酸，每100 g 體重給I mL，飼養(yǎng)28 d，給予Cocktail 同時(shí)，給予試驗(yàn)藥物[1]。將40 只雄性SD 大鼠，隨機(jī)分成四組，每組10只。分為正常對照組［每日灌服蒸餾水(26 mL/kg）］、模型對照組［每日灌胃高脂乳劑和蒸餾水（26 mL/kg）］、低劑量給藥組［每日灌胃高脂乳劑和枳殼總黃酮低劑量(100 mg／kg)］及高劑量給藥組［每日灌胃高脂乳劑和枳殼總黃酮高劑量（300 mg/kg)］。連續(xù)28 d，于第28天股動脈取血，取血前將大鼠禁食12 h，3 500 r/min 離心l0 min，測定血清中的TC、TG、HDL 和LDL 的含量。測定結(jié)果用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

模型對照組大鼠血清TC、TG、LDL 明顯高于正常對照組，同時(shí)HDL 顯著低于正常對照組（均P ＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；低劑量給藥組TC、TG、LDL、HDL 較模型對照組無顯著變化（均P ＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；與模型對照組比較，高劑量給藥組血清TC、TG、LDL 降低，HDL 升高（均P ＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。見表1。說明枳殼總黃酮具有降低血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及升高高密度脂蛋白的作用。

表1 各組大鼠血清中TC、LDL、HDL 、TG 的比較 (±S) mmol/L

表1 各組大鼠血清中TC、LDL、HDL 、TG 的比較 (±S) mmol/L

注：與正常對照組比較，△P ＜0.05；與模型對照組比較，?P ＜0.05。

組別正常對照組模型對照組低劑量組高劑量組n 10 10 10 10劑量26 mL/kg 26 mL/kg 100 mg/kg 300 mg/kg TC 1.45±0.13 1.86±0.27△1.80±0.21 1.62±0.23*LDL 0.68±0.07 0.87±0.14△0.82±0.13 0.72±0.11*TG 0.60±0.14 0.94±0.28△0.87±0.25 0.68±0.27*HDL 0.98±0.11 0.64±0.10△0.78±0.15 0.85±0.12*

4 討論

在高脂飼料中加入少量膽酸鈉可促進(jìn)外源性膽固醇的吸收；由于甲狀腺素有一定的降血脂作用，所以加入丙硫氧嘧啶可抑制甲狀腺的分泌從而形成穩(wěn)定的高脂模型[2]；鑒于雌激素具有一定的降血脂功能，會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的影響，因此，本實(shí)驗(yàn)所選用的動物均為雄性。

美國國家膽固醇教育計(jì)劃專家組研究表明，血清中TC 或LDL 升高是冠心病和缺血性腦卒中的主要危險(xiǎn)因素。低密度脂蛋白是將肝臟合成的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到全身組織的主要形式，膽固醇含量最高，而高密度脂蛋白可把動脈壁上的膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟中進(jìn)行代謝后排出體外，減少膽固醇在動脈壁上的沉積，所以低密度脂蛋白的升高以及高密度脂蛋白的降低就意味著血中膽固醇總量的增高。基于此思路，本實(shí)驗(yàn)通過測定HDL 和LDL 的水平來探討枳殼總黃酮降血脂作用機(jī)制。結(jié)果表明，枳殼總黃酮有明顯降低LDL 及升高HDL 的作用。

藥物降血脂的一個(gè)主要途徑是藥物及其代謝物與膽固醇或其轉(zhuǎn)化物膽酸結(jié)合，從而抑制其在腸內(nèi)的吸收，促進(jìn)降解和排泄[3]。文獻(xiàn)研究表明，枳殼具有促進(jìn)胃排空及促小腸運(yùn)功的功能[4]，因此枳殼總黃酮降血脂的作用機(jī)制可能是通過降低LDL，升高HDL，從而促進(jìn)膽固醇在腸道的排泄。

[1] H.G.沃格爾，W.H.沃格爾.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南一新藥發(fā)現(xiàn)和藥理學(xué)評價(jià)[M].北京：科學(xué)出版社，2001.778

[2]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1991.398-399

[3]李明.中藥降血脂作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].實(shí)用心腦肺血管病雜志，2013，21（1）：4-5

[4]官福蘭，王如俊，王建華.枳殼及辛弗林對小鼠胃排空和小腸推進(jìn)功能的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002，11（11）：1 001－1 003