蓖麻毒素粗提物殺線蟲的生物活性分析

摘要：對蓖麻毒素粗提物進行室內殺蟲效果研究。實驗結果表明，在室內條件下，經過純化的蓖麻毒素具有一定的殺線蟲作用。不同濃度的蓖麻毒素粗提物對黃瓜根結線蟲的殺蟲率間存在明顯差異，當試驗濃度為50倍和100倍液時殺蟲效果為85%和80%。

關鍵詞：蓖麻毒素；粗提物；殺線蟲活性；黃瓜根結線蟲

中圖分類號： S889+.2 文獻標識碼： A 文章編號： 1674-0432（2013）-16-23-1

尋找有效提取蓖麻餅中毒素并制成殺蟲劑，使脫毒蓖麻餅做優良飼料的方法將會極大地提高蓖麻資源的綜合利用程度，產生更大的經濟、社會和生態效應。

本研究目的在于蓖麻毒素對根結線蟲具備的殺蟲活性物質和作用機理做定性研究。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

蓖麻毒素粗體取物的來源：蓖麻餅。

供試線蟲：在大棚采集的黃瓜根結線蟲。

1.2 主要儀器和藥品

電子天平、大三角瓶、100目雙層篩布、植物標本樣品粉粹機、培養皿、量筒、燒杯、剪刀、挑針、放大鏡、電子顯微鏡等

1.3 實驗方法

蓖麻毒素粗提物殺線蟲的方法。

蓖麻毒素粗提物的制備：將蓖麻餅在植物標本粉粹機中粉碎，定量稱取粉碎的蓖麻餅粕，然后放入試劑瓶中，按照1∶50，1∶100，1∶150，1∶200的比例，分別加入自來水，浸泡1～3小時，過濾后得到約50倍、100倍、150倍、200倍的不同濃度的各種蓖麻毒素粗提物的溶液備用。

線蟲的分離方法：貝曼漏斗法：取土樣用2層紗布包好放入漏斗，加水漫過、浸透，靜置10～12小時，用空燒杯接漏斗流出來的水，放至體視顯微鏡下觀察。然后用挑針挑出特征明顯的根結線蟲，用無菌水沖洗、滅菌。然后接種于PDF培養基培養的灰葡萄菌絲上，置于25℃培養箱中培養，10天后分離出線蟲，備用。

處理方法：浸泡法處理黃瓜根結線蟲。

分別取4ml貝曼漏斗法得到的線蟲濾液，各分別加入4ml的50倍、100倍、150倍、200倍蓖麻餅粕水濾液。觀察蟲體狀態，并于24h、48h、72h后分別觀察蟲體狀態，分別檢查死蟲數、活蟲數，計算死亡率及校正死亡率。

死亡判別方法：在各濃度的蓖麻餅粕處理液中，蟲體由活躍的彎曲狀態變為伸直的沉淀狀態。

死亡率計算方法：

死亡率（%）=（死亡蟲體數/供試總蟲數）×100

校正死亡率（%）=[（處理區蟲口死亡率-對照區蟲口死亡率）×100]/（100-對照區蟲口死亡率）

處理1、2、3、4分別是50倍、100倍、150倍、200倍的蓖麻毒素粗提物濾液對黃瓜根結線蟲進行浸泡處理。每處理重復三次，取平均值，清水對照。

注：a-d代表5%水平差異顯著性；A-D代表1%水平差異顯著性

Note：a-d are significance of difference in the p=0.05；

A-D are significance of difference in the p=0.01

2 結果與分析

由表1可見，蓖麻毒素粗提物不同濃度間殺線蟲效果存在差異。各處理表現了較好的殺蟲效果，濃度越大，殺蟲效果越好，50倍液和100倍液對黃瓜根結線蟲的殺蟲活性較好，施藥48h后黃瓜根結線蟲校正死亡率分別為76.5%和70.6%。72h后黃瓜根結線蟲校正死亡率分別為81.3%和75%。這種作用效果正好符合生物殺蟲劑對害蟲作用的一般規律。在蓖麻毒素粗提物濾液對黃瓜根結線蟲進行浸泡的各處理中，根結線蟲在1～2min內即由活躍狀態變得活動減慢，表現為擊倒性比較強，而且持效性較好，這種藥效好但毒性低的生物農藥適合于蔬菜作物上使用。

由表2可見72h后，處理1和處理2間無極顯著差異，處理1和處理3及處理4間呈極顯著差異。

3 小結討論

在該實驗過程中，隨著蓖麻毒素粗提物濃度的增大，對線蟲的殺蟲效果越來越好；該實驗雖然粗提物未經純化，有效成分含量過低、劑型未通過改良優化，50倍液處理的殺蟲效果高達85%，仍具有理論研究意義和實際應用價值。

參考文獻

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