瑞芬太尼在妊娠大鼠應用后對新生小鼠運動感覺及學習功能影響的研究

高 勇 郭志強

山西省汾陽醫院麻醉科，山西 汾陽 032200

瑞芬太尼作為新型止痛藥，是一種特異性的μ受體激動劑，脂溶性高，與μ受體結合力強，與κ、δ受體結合力弱，具有良好的血流動力學穩定性，目前已經在產科麻醉中有較多應用［1]。但瑞芬太尼對子代的影響則鮮有報道，因此筆者在受孕大鼠應用瑞芬太尼后對新生小鼠運動感覺學習功能進行實驗，以期對臨床應用瑞芬太尼提供一定的幫助。

1 材料與方法

1.1 妊娠SD大鼠30只，由山西醫科大學汾陽學院實驗中心提供，體重200～250g，屏障環境下飼養，30只妊娠SD大鼠隨機分為對照組 (A組)、孕中期使用組孕 (10～13天)(B組)、孕晚期使用組 (C組)，每組各10只，分娩后每組取子鼠20只。瑞芬太尼注射液 (批號：1101232，湖北宜昌人福藥業有限公司)。Y型迷宮 (MG-3型，江蘇張家港生物醫學儀器廠)。

1.2 實驗方法 A組觀察妊娠至分娩。B組在妊娠中期(妊10～13天)經尾靜脈注射瑞芬太尼1μg/kg· min，共4分鐘。清醒后觀察至分娩。C組于妊娠晚期 (妊19～21天)經尾靜脈注射舒芬太尼1μg/kg/min，共4分鐘。清醒后觀察至分娩。分娩后各組動物于常溫下和母鼠同籠飼養，自由進食飲水。各組大鼠在21日齡斷母乳飼養。隨機留取每只母鼠的兩只子鼠 (每組20只子鼠)繼續屏障環境下飼養。

1.2.1 感覺運動功能測試 當新生大鼠長到6周齡時，采用握力實驗和轉桿實驗對各組新生大鼠的肌力和運動協調能力進行測試。

1.2.1.1 握力試驗 (Grip Traction test) 將大鼠放置在一根懸空的 (高度50 cm)水平不銹鋼條 (直徑為0.15 cm)上，大鼠將會用四只爪子抓緊鋼條，記錄大鼠由放置到掉下來的時間 (s)。最長記錄時間為300 S，每只動物非連續測試5次，1次/d，取其平均值作為該大鼠的最后成績。

1.2.1.2 轉桿試驗 (Rota Rod test) 將大鼠放置在水平高度為50cm，直徑為6 cm的轉桿上，轉桿以勻速轉動 (15 r/min)，記錄大鼠由放置到掉下來的時間 (s)。最長記錄時間為300 S，每只動物非連續測試5次，1次/d。

1.2.3 大鼠學習記憶功能測試 當大鼠長到8周齡時對大鼠進行學習記憶功能測試。測試在安靜的暗室中進行，測試時間選擇下午2點至5點。進行學習測試時先將大鼠放入迷宮中適應5 min，然后才開始正式實驗。刺激電壓以讓動物剛好跑動的強度為該動物行為訓練過程中的固定強度，延時5 S，按Ⅰ-Ⅱ-Ⅲ-Ⅰ臂輪流作為安全區。大鼠受電擊后逃到安全區后，燈光繼續作用15 S，熄燈后結束一次測試，大鼠所在支臂就作為下一次測試的起點，休息40 S后再予以第2次測試，依次重復，以連續10次中有9次或以上正確反應 (正確反應率≥90%)定為學會標準，測試至達連續9/lO標準為止。觀察總反應時間 (Total Reac—tion Time，TRT)以及達標所需的學習次數。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0軟件分析，建立SPSS數據庫，統計分析，進行t檢驗，P＜0.05，則認為有統計學差異。P＞0.05，無統計學差異。

2 結果

2.1.1 握力試驗結果顯示，三組之間兩兩比較無統計學差異。見表1。

表1 各組大鼠的抓握時間 (±SD)

表1 各組大鼠的抓握時間 (±SD)

A、B組比較P＞0.05，B、C組比較 P＞0.05，A、C組比較 P＞0.05

組別 例數 (子鼠) 抓握時間 (min)A組 (對照組)20 224.17 ±26.54 20 217.85 ±31.22 B 組 (孕中期使用組) 20 186.33±27.81 C組 (孕晚期使用組)

2.1.2 轉桿試驗結果顯示，三組之間兩兩比較無統計學差異。見表2。

表2 各組大鼠在轉桿的停留時間 (±SD)

表2 各組大鼠在轉桿的停留時間 (±SD)

組別 例數 (子鼠) 停留時間 (min)A組 (對照組)20 179.17 ±15.79 B 組 (孕中期使用組) 20 152.21±18.63 C組 (孕晚期使用組)20 161.23 ±19.22

2.1.3 大鼠學習記憶功能測試的迷宮測試，三組之間兩兩比較無統計學差異。見表3。

表3 各組大鼠的學習次數和TRT(±SD)

表3 各組大鼠的學習次數和TRT(±SD)

A、B組比較 P＞0.05，B、C組比較 P＞0.05，A、C組比較P＞0.05

組別 例數 (子鼠) 學習次數 TRT(min)A組 (對照組)20 25.25 ±5.20 31.46 ±8.12 B 組 (孕中期使用組) 20 28.75 ±7.10 35.27 ±7.95 C組 (孕晚期使用組)20 26.40 ±6.25 30.48 ±6.21

3 討論

在分娩鎮痛、剖宮產麻醉、胎兒宮內手術以及其他妊娠期內的非產科手術中，麻醉的實行和各種麻醉鎮痛類藥物的合理使用是手術順利安全進行必不可少的重要前提。理想的麻醉藥物既要有良好的麻醉鎮痛作用，又要對母兒無明顯影響，尤其是對子代的遠期高級神經系統功能無明顯影響。阿片類藥物廣泛應用于分娩鎮痛、剖宮產麻醉。在硬膜外分娩鎮痛中加入阿片類藥物可以減少局麻藥的應用，改善鎮痛效果，延長鎮痛時間，應用于剖宮產和妊娠期非產科手術麻醉中能減少應激使血流動力學更加平穩，增加母兒的安全性［2]。近年來，不少學者對瑞芬太尼進行了進一步研究，Missant等［3]將瑞芬太尼0.1μg/kg/min 應用于腰硬聯合麻醉下行胎兒鏡手術，發現母體的呼吸頻率雖然減少，但血氧飽和度正常，胎兒狀態良好。但在其他研究中，對子代的運動感覺和學習方面的研究較少。本實驗中，在大鼠母體妊娠中期和妊娠晚期使用瑞芬太尼后，子代的抓握時間，轉杠停留時間三組之間無統計學差異;大鼠學習記憶試驗中，學習次數以及總反應時間 (Total Reac—tion Time，TRT)三組之間無統計學差異。本實驗表明在大鼠孕中期和孕晚期使用瑞芬太尼后，對于子代神經系統的高級功能，如運動感覺學習記憶方面均無明顯影響。Evron等［4]也曾報道瑞芬太尼可以通過胎盤，但能被胎兒血和組織中的非特異性酯酶快速代謝和重新分布，清除迅速，因此對胎兒影響較小。綜合相關報道表明瑞芬太尼在產科麻醉和鎮痛會有廣泛的使用前景。不過我們也發現，三組實驗中雖然數據無統計學差異，但是抓握時間，轉杠停留時間，學習次數以及總反應時間中，孕中期使用組較孕晚期組均略有差距，但未達到統計學差異。我們在以后的研究中準備進一步擴大樣本量和增加試驗方法來獲得更多的驗證，為更安全有效地使用瑞芬太尼提供更多的證據。

［1]張潔，周仁龍，王珊娟.瑞芬太尼在產科麻醉中的應用［J].上海醫學，2011，34(8)：638-639.

［2]Dresner MR，Freeman JM.Anesthesia for caesarean section［J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol.2001，15(1)：127-143.

［3]Missant C，Van Schoubroeck D，Deperest J，et al.Remifentanil for foetal immobilization and maternal sedation during endoscopic treatment of twin-to-twin transfusion syndrome：a preliminary dose-finding study［J].Acta Anaesthesiol Bleg.2004，55(3)：239.

［4]Evron S，Glezerman M，Sadan O，et al.Remifentanil：a novel systemic analgesic for labor pain ［J].Anesth Analg.2005，100(1)：233-238.