局部應用地塞米松和維生素C對拔牙創骨愈合的影響研究

[摘要] 目的 探討局部應用地塞米松和維生素C對拔牙創骨愈合的影響。 方法 拔除40只Wistar大鼠的雙側上頜第一前磨牙，左側填入浸泡地塞米松和維生素C的明膠海綿（觀察側），右側僅填入明膠海綿（對照側），分析處理后不同時間點的牙槽骨骨密度、牙槽嵴高度吸收值、牙周組織中堿性磷酸酶（ALP）活性和血管內皮生長因子（VEGF）的表達水平。 結果 ①觀察側術后4周、6周和12周的牙槽骨骨密度均高于對照側（P均< 0.05）；②術后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值均低于對照側（P < 0.05或P < 0.01）；③術后4周、6周和12周的牙周組織ALP活性和VEGF表達水平均高于對照側（P均< 0.05）。 結論 局部應用地塞米松和維生素C可加速拔牙創的骨愈合，減少骨吸收，可能是通過上調Ⅰ型膠原和VEGF的表達來實現的。

[關鍵詞] 局部應用；地塞米松；維生素C；拔牙創骨愈合

[中圖分類號] R782.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2013）24-0007-03

牙拔除是口腔科的常規手術操作，但局部牙槽嵴會發生萎縮和吸收，導致牙槽骨骨量不足，影響牙列修復和種植，主要原因為缺乏牙齒的支持和功能性刺激[1，2]。預防拔牙后牙槽嵴吸收是解決以上問題的關鍵。盡管目前已研究出多種方法，但因效果不穩定、操作步驟復雜、材料制備繁瑣及費用高等原因，限制了廣泛使用[3]。地塞米松是一種糖皮質激素，在成骨細胞增殖和分化中起著重要作用[4]，有報道指出其可促進骨髓間充質干細胞轉化為成骨細胞[5]。維生素C具有促進骨細胞增殖和骨膠原合成的作用[6]，同時可促進體外培養的骨髓間充質干細胞的增殖[7]。以上均表明地塞米松和維生素C均是成骨誘導劑，因此推測對預防牙槽嵴吸收有作用。因此，本研究給予雙側上頜第一前磨牙拔除大鼠局部地塞米松和維生素C治療，收到了較好效果，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

拔除40只雄性Wistar大鼠的雙側上頜第一前磨牙，Wistar大鼠購于北京維通利華公司，體重250～280 g，本研究采用同體對照，左側拔牙創內填入浸泡地塞米松和維生素C的明膠海綿（觀察側），右側僅填入明膠海綿（對照側）。明膠海綿并剪成固定大小（0.3 cm×0.3 cm×0.7 cm），地塞米松和維生素的濃度為10-8 mol/L和50 mg/L，在地塞米松和維生素混合液中浸泡2 h，取出后凍干。兩側均保持填入明膠海綿12周。

1.2 牙拔除動物模型的制備

采用根鉗拔除法制備牙拔除模型[8]，具體步驟如下：給予30 mg/kg 3%戊巴比妥鈉腹腔注射，常規消毒，采用根鉗直接拔除雙側上頜第一前磨牙。術后肌注青霉素預防感染，80萬U/次，每天2次，連續3 d。術后止血后，立即于拔牙創內填入明膠海綿。給予為期3 d的半流質飲食。

1.3 評價指標

分析術后2周、4周、6周和12周的牙槽骨骨密度、牙槽嵴高度吸收值、牙周組織中堿性磷酸酶（ALP）活性和血管內皮生長因子（VEGF）的表達水平。

1.4 評價方法及標準

收集雙側牙槽，并拍攝X線片，分析X線片灰度值來評價牙槽骨骨密度；同時采用游標卡尺測量拔牙處最低點距牙槽嵴頂連線的距離，連續3次，取平均值作為牙槽嵴高度吸收值。收集拔牙創處的牙周組織，加入裂解液，冰上研磨充分后，離心處理（3 000 r/min×10 min），保留上清，分別采用ALP酶聯免疫試劑盒和免疫印跡法檢測ALP活性和VEGF的蛋白水平。

1.5 統計學處理

采用SPSS 13.0軟件包分析數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，多組比較采用單因素方差分析，組間比較采用成組t檢驗，P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療后不同時間點的牙槽骨骨密度

對照側和觀察側治療后不同時間點的牙槽骨骨密度水平有差異（P < 0.05）；除術后2周外，觀察側的牙槽骨骨密度均高于對照側，且除治療12周（P < 0.01）外，其余均存在差異（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組治療后不同時間點的牙槽嵴高度吸收值

兩組治療后不同時間點的牙槽嵴高度吸收值有差異（P < 0.05）；除術后2周和4周外，觀察側的術后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值均低于對照側（P < 0.05或P < 0.01）。見表2。

2.3 兩組治療后不同時間點的牙周組織ALP活性

對照側和觀察側治療后不同時間點的牙周組織ALP活性有顯著差異（P < 0.01）；除術后2周外，觀察側牙周組織ALP活性均高于對照側，其中術后12周（P < 0.01），其余均存在差異（P < 0.05）。見表3。

2.4 兩組治療后不同時間點的牙周組織VEGF表達水平

兩組治療后不同時間點的牙周組織VEGF表達水平有顯著差異（P < 0.05）；除術后2周外，觀察側牙周組織VEGF表達水平均高于對照側（P < 0.05），其中術后12周有極顯著差異（P < 0.01）。見表4、圖1。

3 討論

牙拔除后牙槽嵴局部會發生吸收，導致骨量較少，影響義齒修復，因此需加強拔牙創的愈合。拔牙創愈合是拔牙后骨組織的再修復過程，在新骨形成中意義重大。作為一個動態過程[9]，拔牙創愈合過程中涉及骨改建中的多種因子水平和酶活性的改變，其中ALP是早期成骨細胞分化的標志，且ALP活性與成骨細胞分化有關，常規用于評價骨活性[10]。而在拔牙創愈合過程中，新生血管生成可增加愈合部位的營養供應，VEGF可促進血管再生，加速骨改建過程中的血管化，是評價血管生成情況的關鍵指標[11]。

臨床上常用的促進拔牙創愈合的方法：①局部給予堿性成纖維細胞生長因子促進早期愈合，對減少牙槽嵴吸收效果顯著，但由于該商品價格較高，推廣難度較大[12]；②于拔牙創內填塞羥基磷灰石，但該法有一定的感染率，不能對位縫合拔牙創，同時羥基磷灰石不易吸收，易殘留，影響種植效果[13]；③注射磷酸鈣陶瓷懸浮物填充拔牙創，有利于后期種植牙，但仍有殘留[14]。促進拔牙創愈合的理想方法：①生物相容性好，異物感小且無過敏反應；②不影響自然愈合；③不易殘留，具有良好的吸收性；④減少牙槽嵴的吸收，保持其高度和寬度；⑤成本低、操作簡單等[15]。

多項研究指出，地塞米松和維生素C具有成骨誘導作用，推測可促進拔牙創內愈合，并抑制骨吸收[4-7]。因此，本研究分析地塞米松和維生素C對牙槽骨骨密度水平和牙槽嵴高度吸收值的影響來評價骨愈合和牙槽骨吸收情況，并探討對ALP活性和VEGF水平的影響。同時本研究采用同體對照，避免了異體對照的差異。本研究發現觀察側術后4周、6周和12周的牙槽骨骨密度水平均高于對照側，表明局部應用地塞米松和維生素C可促進拔牙創愈合，而術后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值低于對照側，提示局部應用可較好預防牙槽骨吸收，以上均表明在拔牙創局部應用地塞米松和維生素C的效果較好。

進一步分析發現，術后4周、6周和12周的牙周組織ALP活性和VEGF表達水平均高于對照側，提示局部應用地塞米松和維生素C可提高ALP活性并提高VEGF，可能是促進拔牙創內骨愈合的基礎。

綜上所述，局部應用地塞米松和維生素C可加速拔牙創的骨愈合，減少骨吸收，可能是通過上調Ⅰ型膠原和VEGF的表達來實現的。

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（收稿日期：2013-05-06）