左乙拉西坦對癲癇患兒的神經(jīng)保護(hù)作用

[摘要] 目的 觀察左乙拉西坦（LEV）對癲癇患兒血清神經(jīng)元特異性烯醇酶（NSE）的影響，探討LEV對癲癇患兒的神經(jīng)保護(hù)作用。 方法 參與本次實(shí)驗(yàn)研究的有40例癲癇患兒和10例健康兒童。采用放免法測健康兒童及癲癇患兒發(fā)作72 h之內(nèi)血清NSE的濃度，以此為標(biāo)準(zhǔn)對LEV治療的癲癇患兒予8周評估。將40例癲癇患兒隨機(jī)分成LEV組和VPA（丙戊酸鈉）組，分別監(jiān)測兩組癲癇患兒在治療前（0周）與治療后2周、8周血清NSE濃度變化。結(jié)果 干預(yù)前LEV與VPA兩組的NSE指標(biāo)水平無顯著差異（P = 0.398），明顯高于正常兒童組（P < 0.01）；治療2周后，LEV組、VPA組的NSE指標(biāo)均有所下降，與正常兒童間的血NSE指標(biāo)差異均顯著（P < 0.01）；治療8周后，NSE值在三組間有顯著性差異，LEV組與正常兒童間的差異不顯著（P = 0.669），VPA組與LEV組及正常兒童組的差異顯著（P < 0.01），均高于二者的平均值。結(jié)論 左乙拉西坦會降低癲癇患兒血清NSE的水平，可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。

[關(guān)鍵詞] 癲癇；左乙拉西坦；丙戊酸鈉；神經(jīng)元特異性烯醇酶

[中圖分類號] R742.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）25-0031-02

Neuroprotection effect of LEV in children with epilepsy

QIU Anli1 REN Zhimin2 FANG Shaohong2 CHEN Guiying1 HAO Yanqiu2

1.Department of Pediatrics， Harbin Children’s Hospital， Harbin 150010， China； 2.Department of Pediatrics， the Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University， Harbin 150086， China

[Abstract] Objective To investigate effects of levetiracetam （LEV） on serum neuron-specific enolase （NSE） for understanding its neuronal protection in children with epilepsy. Methods Forty children with epilepsy and ten healthy children participated this study. The children with epilepsy were randomized into two groups： one was treated under LEV （n=20） and the other was under VPA （n=20） for eight weeks. The NSE level in the serum was assessed in the healthy children once. The NSE level of children with epilepsy was assessed within 72 hours after seizure before the treatment as well as at 2 and 8 weeks after the treatment. Results Before the treatment， the serum NSE level was comparable between children treated with VPA and children treated with LEV （P = 0.398）， but was higher than that in healthy children （P < 0.01）. After the two-week-treatment， the NSE level was reduced in children treated with VPA （P < 0.01） and children treated with LEV（P < 0.01） but was still significantly greater than that of normal children （P < 0.01）. After the eight-week treatment， the NSE level was comparable between children under the LEV treatment and normal children （P = 0.669）， while the higher NSE level was observed in children under the VPA treatment in comparison with normal children （or children with the LEV treatment） （P < 0.01）. Conclusion LEV decreases the serum NSE level in children with epilepsy and thus may have potential protection of neuronal damage.

[Key words] Epilepsy； LEV； VPA； Neuron-specific enolase

癲癇（epilepsy）是小兒常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，是慢性腦損傷疾患，頻繁發(fā)作會導(dǎo)致腦的不同區(qū)域神經(jīng)元死亡及損傷，常導(dǎo)致患兒智力低下，不能生活自理，嚴(yán)重影響患兒的生活質(zhì)量。左乙拉西坦（LEV）是一種新型抗癲癇藥物，具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)及作用機(jī)制，良好的藥代動(dòng)力學(xué)特性[1]：高效的生物利用度，線性動(dòng)力學(xué)，較低的血漿蛋白結(jié)合力等，LEV已廣泛應(yīng)用于部分性癲癇發(fā)作。

近年來國內(nèi)外除了研究LEV抗癲癇作用外，更關(guān)注其神經(jīng)保護(hù)作用，Haichen Wang等[2]在閉合性腦損傷（CHI）及蛛網(wǎng)膜下腔出血（SAH）鼠模型、Gibbs等[3]在電誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)（SE）模型中均已經(jīng)證明了LEV具有神經(jīng)保護(hù)作用。而蔣莉等[4]研究報(bào)道血清神經(jīng)元特異性烯醇酶（NSE）是臨床檢測腦損傷的有效指標(biāo)。本文我們對2012年2～9月哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院兒內(nèi)科門診及兒童醫(yī)院神經(jīng)科門診癲癇患兒的臨床資料進(jìn)行研究，旨在探討LEV引起癲癇患兒血清NSE濃度變化及其意義，分析其神經(jīng)保護(hù)作用，從而指導(dǎo)臨床合理用藥。

1 對象與方法

1.1研究對象

1.1.1診斷與分類標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)國際抗癲癇聯(lián)盟1981年癲癇發(fā)作的國際分類及1989年癲癇及癲癇綜合征的國際分類[5]、臨床表現(xiàn)和EEG檢查均符合癲癇的診斷，并將發(fā)作類型分為全身性發(fā)作和部分性發(fā)作。

1.1.2研究納入標(biāo)準(zhǔn) ①新診斷癲癇患兒是2012年2～9月哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院兒內(nèi)科門診及兒童醫(yī)院神經(jīng)科門診就診的患兒，就診前半年內(nèi)起病，無熱驚厥發(fā)作頻繁或癲癇持續(xù)狀態(tài)，呈全身性發(fā)作，臨床表現(xiàn)和EEG檢查均符合癲癇診斷；②對照組為年齡、性別相仿的同期門診健康體檢兒童，入選兒童及其監(jiān)護(hù)人了解本實(shí)驗(yàn)的研究目的和方法，愿意參與本研究；③確診癲癇前未服抗癲癇藥物（AEDS）；④僅LEV、VPA單藥治療且治療后無發(fā)作；⑤頭CT或MRI檢查無明顯異常；⑥丙戊酸鈉組檢測血藥濃度。

1.1.3 病例排除標(biāo)準(zhǔn) ①初診患兒癲癇發(fā)作類型是部分性發(fā)作；②VPA、LEV治療過程中發(fā)作未控制，改用、合用其他AEDs等添加治療者；③腦發(fā)育遲滯或既往有腦部疾病史；④未按照約定時(shí)間定期復(fù)診。

1.2 研究方法

1.2.1分組與設(shè)計(jì) 依據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)將入組病例40例隨機(jī)分成兩組，LEV組20例，男12 例，女 8例，年齡12月～11歲，平均（6.00±3.02）歲。VPA組20例，男10例，女10例，年齡9月～11歲，平均（5.00±3.12）歲。LEV組20例癲癇患兒采用優(yōu)時(shí)比公司的開普蘭片，規(guī)格250 mg，每日（10～30） mg/kg，口服。VPA組20例，給予丙戊酸鈉口服，每日（20～30） mg/kg，口服。正常組10例，男5例，女5例，年齡4～8歲，平均（5.1±1.8）歲。

1.2.2檢驗(yàn)方法 采集LEV組、VPA組癲癇患兒治療前，治療后2周、8周全血及10例健康兒童的全血，離心后留1.5 mL的血清分別貼上標(biāo)簽，置-70℃冰箱凍存待測。采用ELESA分析法測定NSE含量（試劑盒為ADL公司產(chǎn)品），嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。固定時(shí)間因素（0周、2周、8周）LEV組與正常組或VPA組的比較，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)上做單因素方差分析或兩樣本t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

LEV組對癲癇患兒治療后血清NSE濃度的變化見表1。健康兒童組各隨訪時(shí)間點(diǎn)的血清NSE指標(biāo)無顯著差異。從各時(shí)間點(diǎn)看，干預(yù)前LEV與VPA兩組的血清NSE指標(biāo)水平無顯著差異（P = 0.398），但明顯高于正常兒童組（P <0.01）；治療2周后，LEV組、VPA組的血清NSE指標(biāo)均有所下降，與正常兒童間的NSE指標(biāo)差異均顯著，但VPA組高于LEV組，LEV組高于正常兒童組；治療8周后，VPA組與LEV組及正常兒童組的差異顯著（P < 0.01），均高于二者的平均值，而LEV組與正常兒童間的血清NSE濃度差異不顯著（P =0.669）。干預(yù)前后各組之間存在交互效應(yīng)（F=86.816，P<0.01）。

3 討論

癲癇是小兒神經(jīng)系統(tǒng)常見病，是以神經(jīng)元異常放電所致的暫時(shí)性中樞神經(jīng)功能失常為特征的綜合征。癲癇發(fā)作時(shí)，腦組織存在缺血缺氧，由于神經(jīng)元對缺血缺氧最為敏感， 因此即使短暫的供血供氧障礙也會造成神經(jīng)元的損傷。神經(jīng)元特異性烯醇酶（NSE）分布于神經(jīng)細(xì)胞及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，是一種糖酵解酶，與神經(jīng)細(xì)胞分化成熟有關(guān)，并參與神經(jīng)細(xì)胞的能量代謝過程。神經(jīng)細(xì)胞受損后，NSE隨細(xì)胞崩解而釋放入腦脊液中，腦膠質(zhì)細(xì)胞和其他神經(jīng)組織中不含有這種酶，成為神經(jīng)細(xì)胞損傷的重要標(biāo)志。因而可以利用這種酶在癲癇發(fā)作前后的變化來了解神經(jīng)元損傷情況[6]。Lasxmikants等[7]動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)單次癲癇發(fā)作或是癲癇持續(xù)狀態(tài)（SE）均可造成腦損傷導(dǎo)致腦功能異常。近年來無論是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或臨床研究證實(shí)，驚厥發(fā)作后血清NSE的變化與神經(jīng)元死亡的發(fā)生發(fā)展規(guī)律一致，認(rèn)為血清NSE 可能作為臨床檢測腦損傷的有效指標(biāo)[4]。

VPA 除抗癲外還具有神經(jīng)保護(hù)和抗凋亡作用。Chen等[8]在大鼠中腦星型膠質(zhì)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)VPA 具有誘導(dǎo)神經(jīng)營養(yǎng)及神經(jīng)保護(hù)作用。本研究中，VPA治療前后血清NSE逐漸降低，也證實(shí)了其神經(jīng)保護(hù)作用。LEV是一種新型抗癲癇藥物，其抗癲癇機(jī)制不明，多數(shù)研究認(rèn)為，LEV與腦內(nèi)突觸囊泡蛋白SV2A結(jié)合，調(diào)節(jié)突出囊泡循環(huán)與神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突出間隙控制癲癇發(fā)作[9]。近年來對LEV神經(jīng)保護(hù)作用的研究較少，多為體外研究。Sendrowski K等[1]通過體外光鏡下神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)測試和乳酸脫氫酶釋放活動(dòng)，證明LEV能夠阻止低氧誘導(dǎo)下海馬神經(jīng)細(xì)胞死亡，高劑量LEV組神經(jīng)細(xì)胞存活率高于對照組二倍。Haichen Wang等[2]在閉合性腦損傷（CHI）及蛛網(wǎng)膜下腔出血（SAH）鼠模型中通過測量大腦中動(dòng)脈的直徑證明LEV能夠改善損傷的腦細(xì)胞功能，減少CHI及SAH鼠模型中的血管痙攣及神經(jīng)元損傷的組織學(xué)改變。Klitgaard等[10]發(fā)現(xiàn)在毛果云香堿誘導(dǎo)的癲癇發(fā)作模型中LEV可以減少海馬細(xì)胞死亡，增加海馬細(xì)胞興奮性。Gibbs等[3]在電誘導(dǎo)SE模型中發(fā)現(xiàn)，LEV能有效防御SE后線粒體機(jī)能障礙和氧化應(yīng)激，揭示了其神經(jīng)保護(hù)活動(dòng)優(yōu)于其抗癲癇特性。在本研究中，LEV組、VPA組癲癇患兒抽搐發(fā)作72 h內(nèi)血清NSE濃度均顯著升高，與正常組有明顯差異，LEV組、VPA組治療2周時(shí)血NSE濃度下降（LEV組較VPA組下降明顯），但與正常組仍有差異，治療8周時(shí)LEV組血清NSE濃度接近正常，與正常組無差異，而VPA組血清NSE濃度下降，但與正常組有差異。本研究可以看到在0～8周治療期間，接受LEV組治療患者血清NES濃度比接受VPA組治療患者血清NES濃度有明顯減少，同時(shí)，LEV組治療患者血清NES濃度變化的速度比VPA組治療患者血清NES濃度變化的速度快，綜上所述，LEV影響了癲癇患兒發(fā)作后血清NSE濃度的變化，減輕癲癇患兒的腦神經(jīng)元損傷，可能對癲癇患兒具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用，對臨床用藥及改善患兒生活質(zhì)量有很大的意義。LEV與VPA在治療過程中均有效的控制了癲癇發(fā)作，其中有4例患兒出現(xiàn)了嗜睡，1例易怒，未發(fā)現(xiàn)對記憶力，注意力等認(rèn)知功能的影響。由于配合本實(shí)驗(yàn)患兒例數(shù)有限，LEV對癲癇患兒血清NSE的影響及其所揭示的神經(jīng)元保護(hù)作用還待進(jìn)一步研究，以便臨床應(yīng)用。

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（收稿日期：2013-05-21）