小兒急性闌尾炎細菌移位與闌尾組織NOS、血清NO及IL—10的關系

[摘要] 目的 探討小兒急性闌尾炎發生細菌移位情況，分析其與闌尾組織中的NOS、血清中NO及IL-10的關系。方法 選擇在我院進行治療的急性闌尾炎患兒24例為闌尾炎組，分別于術前和術后7 d采集靜脈血，術中吸取腹腔液體。選擇腸旋轉不良且無闌尾炎的患兒15例為腸旋轉不良組，選擇20例健康兒童為正常對照組，采集血標本。檢測全血細菌DNA，收集的腹腔液體和切取的淋巴結進行細菌培養，測定闌尾組織NOS的表達情況，檢測血清中NO和IL-10的水平。 結果 NO與NOS呈負相關，與IL-10成正相關。 結論 小兒化膿性闌尾炎可出現腸道細菌移位與NO有密切關系。

[關鍵詞] 小兒急性闌尾炎；細菌移位；一氧化氮合成酶；一氧化氮

[中圖分類號] R726.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）12-0039-02

小兒急性闌尾炎是小兒腹部外科常見的急腹癥，發病率雖然低于成年人，但因癥狀不典型，常常病情較重、病情發展快，容易出現穿孔，導致腹膜炎，嚴重者可出現全身炎癥反應綜合征和多器官功能障礙而危及生命[1]。腸道細菌移位（ bacterial translocation）是指腸道細菌及其產物從腸腔移位至腸系膜或其他腸外器官的過程[2]。NO作為一種神經遞質，高濃度可導致細胞線粒體損傷，促進細胞凋亡，腸黏膜破壞。本文主要是探討小兒急性闌尾炎是否存在細菌移位，NOS、NO是否參與了細菌移位過長，IL-10對促炎和抗炎的作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年6月～2012年6月在我院住院治療的24例急性闌尾炎患兒為闌尾炎組，其中男18例，女6例，年齡3～12歲，平均（8.1±3.4）歲。其中單純性闌尾炎8例，化膿性闌尾炎16例，所有患兒均明確診斷，排除合并敗血癥的患兒。選擇同期在我院手術治療的腸旋轉不良患兒15例為腸旋轉不良組，無闌尾炎病史，術后病理診斷闌尾正常。其中男11例，女4例，年齡2～9歲，平均（7.5±3.3）歲。選擇健康體檢兒童20例為正常對照組，其中男15例，女5例，年齡4～12歲，平均（7.0±3.0）歲。三組入選對象的性別比、平均年齡比較差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

闌尾炎組入院后完善檢查，明確診斷，給予抗感染等治療，完善術前準備，行闌尾切除術。術后7 d拆線。腸旋轉不良組未合并感染，擇行期常規手術，并常規切除闌尾。

1.3 標本采集

急性闌尾炎患兒在入院時、術后7 d各采集靜脈血3 mL，腸旋轉不良組在入院時采集靜脈血3 mL。急性闌尾炎患兒剖腹后收集腹腔液體5 mL，行細菌培養及藥敏反應；在回腸末端的靠近闌尾的地方取一只淋巴結進行細菌培養。闌尾炎組和腸旋轉不良組切下的闌尾福爾馬林固定，石蠟包埋，行免疫組織化學檢測NOS。對照組采集靜脈血3 mL，分別進行細菌DNA檢測和血清NO和IL-10檢測。

1.4 檢測方法

全血細菌DNA檢測 采用PCR檢測，采用凝膠圖像分析系統分析產物：PCR Marker分子量：100、200、300、400、500、600、700、800、900、1 000 bp。收集的腹腔液體和腸系膜淋巴結進行細菌培養。接種于血瓊脂培養基，35℃恒溫下培養24～48 h，觀察菌落情況，分離細菌，行藥敏實驗。石蠟包埋的闌尾組織采用免疫組化法檢測NOS，檢測平均灰度值。采用雙抗體夾心酶標免疫分析法進行檢測，酶標儀在450 nm波長下測定OD值，計算NO濃度。采用Elisa法行定量檢測，試劑盒由上海雅吉生物科技有限公司提供。所有操作均按照說明書進行。

1.5 統計學方法

2 結果

3 討論

現在認為腸道細菌移位為原存在于腸腔的細菌和/或內毒素通過腸道黏膜進入腸系膜淋巴結及門靜脈，進而入體循環，到肝、脾等重要臟器，嚴重者出現全身炎癥反應綜合征和多臟器功能衰竭[3]。細菌移位的發生機制還不十分清楚，一般認為與腸道黏膜的損害、細菌過度繁殖、機體免疫力下降有關[4]。

當機體處于各種創傷、休克、大出血等情況時，腸黏膜上皮細胞缺血缺氧壞死，黏膜屏障功能下降，易導致細菌移位[5]，感染誘發NO的生成。NO能夠破壞腸上皮，增加腸黏膜的通透性。IL-10能夠抑制單核細胞或者巨噬細胞，組織細菌移位到腸系膜淋巴結。

本文研究結果顯示，化膿性闌尾炎患兒全血中細菌DNA檢測，16 SrRNA陽性率68.75%，BG陽性率達56.25%，化膿性闌尾炎的淋巴結及腹腔液體中有8例細菌培養陽性，以大腸桿菌為主。而單純性闌尾炎和腸旋轉不良組全血腫細菌DNA檢測陰性，淋巴結和腹腔液體細菌培養陰性。說明化膿性闌尾炎組更易出現細菌移位。急性闌尾炎組術前血清NO水平顯著升高。細菌及其產生的內毒素能夠促使iNOS的生成，進而促進NO的生成，而高濃度的NO可損傷上皮細胞的線粒體，促進細胞凋亡，腸道黏膜損傷，破壞黏膜屏障，為細菌移位提供條件。化膿性闌尾炎血清NO水平顯著高于單純性闌尾炎和正常組，一方面說明化膿性闌尾炎患兒病情重，NO生成多；另一方面NO也促使了細菌移位。IL-10作為機體免疫系統重要的炎性因子，在機體處于嚴重的炎癥反應狀態下時，IL-10大量產生，因此，本研究中闌尾炎患兒血清IL-10水平顯著高于正常對照組，而化膿性闌尾炎患兒又顯著高于單純性闌尾炎患兒。IL-10水平隨著病情加重而升高的情況說明機體有保持免疫平衡的能力。

綜上所述，小兒化膿性闌尾炎可出現腸道細菌移位，主要以大腸桿菌為主，因此容易發生全身炎癥反應綜合征。細菌移位與NO有密切關系，IL-10作為一種抗炎因子，是機體維持免疫平衡的重要反應。臨床上對小兒急性闌尾炎要盡早診斷、及時治療。檢測血清IL-10和NO水平變化對判斷是否存在細菌移位具有一定的臨床意義。

[參考文獻]

[1] 周云星. 小兒急性闌尾炎100例診治體會[J]. 中外醫療，2012，31（8）：59.

[2] 王彤，田巍. 腸道細菌移位研究進展[J]. 醫學研究雜志，2011，40（9）：15-17.

[3] 李仲，楊牟，李魯濱，等. 腸道缺血再灌注損傷后腸道細菌移位研究進展[J]. 中國臨床醫生，2011，39（5）：33-35.

[4] 崔嬈，王建峰. 細菌移位在小兒外科領域的研究現狀[J]. 臨床小兒外科雜志，2010，9（1）：50-52.

[5] 楊潔，聶青和. 肝衰竭與腸道屏障功能障礙[J]. 實用肝臟病雜志，2010，13（1）： 66-69.

（收稿日期：2013-01-22）