微管相關基因蛋白表達與Ⅱ期非小細胞肺癌患者化療敏感性的關系

[摘要] 目的 探討Ⅱ期非小細胞肺癌（NSCLC）中微管解聚蛋白Stathmin和Ⅲ型β微管蛋白（β-tubulin-Ⅲ）表達水平與諾維本+順鉑（NP）方案化療敏感性及患者預后的關系，為個體化治療方案的制定提供依據。 方法 免疫組化法檢測已手術Ⅱ期NSCLC患者腫瘤組織中Stathmin和β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平，所有患者行NP方案化療，并隨訪患者的無瘤生存時間（DFS）和總體生存時間（OS），統計學分析Stathmin和β-tubulin-Ⅲ的蛋白表達水平與患者DFS和OS的關系。 結果 患者腫瘤組織中Stathmin、β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平與患者的DFS及OS均無顯著相關（P > 0.05）。 結論 Ⅱ期NSCLC患者腫瘤組織中Stathmin和β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平不能作為預測患者預后及NP方案化療敏感性的指標。

[關鍵詞] 肺腫瘤；化療；Stathmin；β-tubulin-Ⅲ

[中圖分類號] R735.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）12-0059-03

2011年肺癌NCCN指南中指出：對于行R0切除的Ⅱ期非小細胞肺癌（NSCLC），術后需行輔助化療（一類證據），但不同患者對化療的反應及預后差別很大。這可能與個體的生物學差異有關，因此建立循證醫學基礎上，以藥物基因組學研究為依托的個體化治療已成為未來NSCLC臨床研究的重要方向。目前研究表明，微管基因是許多抗腫瘤藥物的作用位點，其中Stathmin、β-tubulin-Ⅲ表達增高與紫杉醇類藥物的敏感性降低相關。那么它們的表達水平與長春堿類藥物療效的關系怎么樣呢？國內外的研究結果很不一致，甚至自相矛盾[1]。

因此，本文篩選出73例接受手術且術后病理明確為Ⅱ期NSCLC患者，術后均給予長春瑞濱聯合順鉑輔助化療，并檢測腫瘤組織中Stathmin、β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平，隨訪患者無瘤生存時間（DFS）和總體生存時間（OS），統計學分析蛋白表達水平與患者DFS和OS的關系，探討Stathmin及β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平與化療藥物療效的相關性，希望能為個體化治療方案的制定提供依據。

1 資料與方法

1.1 標本及資料收集

所有標本均從本院標本庫中篩選（所有入標本庫患者均簽定知情同意書，醫院倫理委員會討論通過）。術后病理按照2006年國際抗癌聯盟（UICC）TNM分期標準進行分期，共篩選2007年9月～2010年6月經根治性手術切除的Ⅱ期NSCLC患者73例。患者的臨床特征：男58例、女15例；年齡≤60歲55例、>60歲18例；腫瘤大小≤3 cm2 2例、>3 cm 51例；無淋巴結轉移28例、有淋巴結轉移45例；高-中分化53例、低分化20例；腺癌33例、鱗癌36例、其他病理類型4例。

1.2 輔助化療

患者術后轉至化療科室進行長春瑞濱聯合順鉑化療，順鉑75 mg/m2分3天給予，長春瑞濱25 mg/m2第1、8天，以上方案每3周重復。其中1例患者因骨轉移只進行2周期化療，4例患者第1周期在本院進行，余3個周期化療當地進行，其余患者均在本院完成4個周期的化療。

1.3 隨訪資料（DFS和3年生存率）的收集

均通過電話隨訪，由指定醫生完成，每3個月1次。共隨訪70例，失訪3例，隨訪率為95.89%。

1.5 結果判斷

1.6 統計學分析

采用SPSS17.0軟件進行統計學分析。采用COX模型進行單因素分析，Kaplan-Meier法繪制生存曲線，并經Log-rank檢驗。

3討論

近年來腫瘤的個體化治療越來越受到從事腫瘤臨床和基礎研究的學者的重視。NSCLC患者的治療更是需要這一原則。真正意義的個體化治療是對每一個肺癌患者“量體裁衣”，根據腫瘤生物學特征和藥物基因組學改變進行針對性的治療。2006年《新英格蘭醫學雜志》發表了肺癌個體化化療里程碑式的文章。在該研究中，只有腫瘤ERCC1蛋白低表達者可從輔助化療中獲益[2]。

Stathmin是一種微管不穩定蛋白，在細胞周期的不同階段通過磷酸化和去磷酸化作用對細胞微管系統動力平衡的調節發揮十分重要的作用。通過對幾種肺癌細胞的研究表明，微管的聚合狀態能夠影響其與化療藥物的結合。增加微管的聚合狀態能夠增加紫杉醇與微管的結合，減少長春堿與微管的結合，從而影響肺癌患者對化療藥物的反應[3]。蒲驍麟等[4]報道：在晚期NSCLC中，免疫組織化學方法測得的Stathmin表達水平與長春瑞濱+順鉑/卡鉑（NP）方案的化療療效負相關。但我們的研究結果表明，Ⅱ期NSCLC術后標本中Stathmin的蛋白表達與患者預后無關，不能作為患者預后的獨立預測因素。其高表達患者與低表達患者相比，DFS和OS均無明顯差異。

那么β-tubulin-Ⅲ的表達水平與長春堿類藥物療效的關系怎么樣呢？國內外用免疫組化方法檢測得到的結果很不一致，甚至相互矛盾。Seve等[5]研究了術后接受NP方案輔助化療的ⅠB～Ⅱ期NSCLC或者， 發現腫瘤組織中β-tubulin-Ⅲ蛋白高表達者，其無復發生存期和總生存期均優于低表達者。Reiman T探討了JBR.10等4個臨床試驗中1149例已切除NSCLC的患者與β-tubulin-Ⅲ蛋白表達之間的關系，發現β-tubulin-Ⅲ蛋白表達水平可以作為預測患者預后的指標，但并不能作為預測化療療效的指標[6]。我們的研究結果表明，Ⅱ期NSCLC術后標本中β-tubulin-Ⅲ的蛋白表達與患者預后無關，其高表達患者與低表達患者相比，DFS和OS均無明顯差異。

[參考文獻]

[1] Seve P，Dumontet C. Class Ⅲ beta tubulin expression in non-small cell lung cancer[J]. Rev Mal Respir，2010，27（4）：383-386.

[2] Olaussen KA，DunantA，FouretP，et al. DNA repair by ER-CC1 in non-small-cell lung cancer and cisplatin-based adjuvant chemotherapy[J]. N Engl J Med，2006，355（10）：983-991.

[3] Singer S，Malz M，Herpel E，et al. Coordinated expression of stathmin family members by far upstream sequence element-binding protein-1 increases motility in non-small cell lung cancer[J]. Cancer Res，2009， 69（6）：2234-2243.

[4] 蒲驍麟，王峻，許林，等. β-tubulin-Ⅲ和Stathmin與晚期NSCLC化療敏感性的關系[J]. 中國肺癌雜志，2009，12（1）：49-53.

[5] Seve P，Lai R，Reiman T，et al. Class Ⅲ beta-tubulin expression and benefit from adjuvant cisplatin/vinorelbine chemotherapy in operable non-small-cell lung cancer：analysis of NCIC JBR.10[J]. Clin Cancer Res，2007，13（3）：994-999.

[6] Reiman T，Lai R，Veillard AS，et al. Cross-validation study of class Ⅲ beta-tubulin as a predictive marker for benefit from adjuvant chemotherapy in resected non-small-cell lung cancer： analysis of four randomized trials[J]. Ann Oncol，2012，23（1）：86-93.

[7] Alli E，Bash Babula J，Yang JM，et al. Effect of stathmin on the sensitivity to antimicrotubule drugs in human breast cancer[J]. Cancer Res，2002，62（23）：6864-6869.

[8] Stengel C，Newman SP，Leese MP，et al. Class Ⅲ beta-tubulin expression and in vitro resistance to microtubule targeting agents[J]. Br J Cancer，2010，102（2）：316-324.

（收稿日期：2013-01-18）