奶牛結核病的PPD檢測技術

奶牛結核病是由結核分枝桿菌引起的一種人畜共患慢性消耗性傳染病，以病牛消瘦、咳嗽、體虛乏力、精神委頓等為特征，患病奶牛痰液、糞尿、乳汁和生殖道分泌物中都可帶菌，通過呼吸道與消化道傳染傳播。奶牛結核病不但影響畜牧業的持續穩定發展，而且影響著人類的身體健康和社會公共安全，世界動物衛生組織（OIE）將其列為B類動物疫病，我國政府將其列為二類動物疫病。

結核菌素試驗（PPD）是奶牛結核病的傳統檢測方法，其檢出率和準確性都比較高，在結核病的診斷和防制過程中發揮著重要作用，很多國家利用該方法消滅和控制了牛結核病，該方法也是世界動物衛生組織推薦的診斷牛結核病的惟一方法。在實踐中，為了防止因誤診而造成的不必要的經濟損失，減少工作的重復性，筆者根據多年經驗將奶牛結核病的PPD檢測技術介紹如下，與廣大同仁一起探討。

一、檢測前的準備工作

1. 制作檢測表格

登記表能使檢測工作簡單明了，奶牛結核病的檢測表格內容包括養殖場名稱、責任人、奶牛品種、存欄量、日齡、耳標號、檢測時間、初始皮厚、72小時或96小時后皮厚、檢測人、結核菌素生產廠家、批號等。

2. 擬定檢測計劃

摸清所需檢測奶牛數量，準備好足量的牛提純結核菌素、滅菌生理鹽水、一次性注射器、口罩、防護服、手套、相應的人力，讓檢測工作有序進行。

3. 培訓技術員

為了減少工作的盲目性，保證檢測有條不紊地進行，必須對技術員進行培訓，內容包括自身安全防護、剃毛、注射方法、游標卡尺的使用、結果觀察等，并對技術員合理分工。

二、操作方法

1. 奶牛保定

奶牛與外界生人接觸較少，有的脾氣比較暴躁，最好由該場飼養員協助牽拉保定，不用保定欄，以縮短檢測時間，脾氣太暴躁者可借助專用保定欄或圈舍以及鼻鉗保定。

2. 頸部剃毛

術部直徑約10厘米，無明顯病變。很多獸醫工作人員習慣用剪刀剪毛，這種方式不僅速度慢，而且不能干凈剪去毛腳。如果改用剃須刀，其優勢是刮毛干凈，測量皮厚準確，注射結核菌素時非常方便快捷。將剃須刀固定夾伸出部分去掉打磨平整，這樣所刮去的毛就不會夾在里面，刮毛途中也不用停頓，一直刮好所需面積，從而大大提高了工作效率。

3. 皮厚測量

測量奶牛頸部皮厚，應由專人專管，在注射牛提純結核菌素72小時后，由原來的人復測，這有利于檢測結果的準確性，消除了不同人測量而導致的誤差，切忌游標卡尺忽緊忽松、隨便更換測量人。測量皮厚時，用左手大拇指、食指輕微捏緊術部中央皮皺，右手用游標卡尺量皮皺厚度，做好記錄，讀數一般保留小數點后一位即可（如4.7毫米）。

4. 劑量確定

無論大、小牛只，一律皮下注射牛提純結核菌素0.1毫升（含2000國際單位），不能任意加減注射量，PPD試驗是一種局部藥理反應，成年牛和犢牛均可承受該劑量，而且只有在該劑量下才能起到應有的檢測效果。另外，也不能稀釋成低濃度，然后加大劑量注射，這樣雖然保證了每頭牛的注射液里含有2000國際單位牛提取結核菌素，但大劑量注射容易引起藥液吸收不良，造成非藥理性的水腫，結果誤判。

5. 藥劑注射

檢測人員接近奶牛后，先用手慢慢撫摸奶牛敏感部位，消除牛緊張應激心理，人員跟進，將右膀緊靠奶牛的左側前腿根部，在左側注射，右肘部搭在奶牛背弓后凹部，右腳朝前，左腳在右腳左后部站定，這樣有利于人隨牛動而動，不被牛踩傷或踢傷。注射前，檢測人員用左手取75%酒精對術部消毒，右手手背前伸，身體前傾，右手食指與中指夾緊注射器前部，手掌、大拇指控制好注射器后部，腕韌帶用力，指尖緊貼術部表面滑行，針頭的切口面朝上，針尖輕挑起術部中央表皮，針頭與術部呈45°扎進、注射，此時皮內出現黃豆大小的水泡，即表示已注入皮內。整個動作要求連貫，一氣呵成。如果沒扎好，可于術部前15厘米處補針。

三、觀察方法

皮內注射72小時后，觀察皮厚并記錄，有必要在注射96小時、120小時后繼續觀察記錄，以防個別牛出現較晚的遲發型變態反應。

四、結果判定

皮厚差≥4毫米，注射部位有腫脹、熱痛等炎性反應為陽性；皮厚差2.1～3.9毫米為疑似陽性；皮厚差≤2毫米為陰性。凡判定為疑似陽性的奶牛，檢測60天后進行復檢，其結果仍為疑似陽性時，60天后再復檢，如仍為疑似陽性，則判定為陽性。

五、廢棄物的處理

進奶牛場檢測結核病前，獸醫工作人員都要消毒，所用檢測工具全部消毒或更新，操作完成后產生的垃圾，包括注射器、針頭、醫用酒精、棉球、口罩、手套、未用完的PPD稀釋液等，收集起來裝入塑料袋扎緊，最后統一做無害化處理。