對龍海市豬場豬瘟抗體水平的監(jiān)測調(diào)查和免疫效果分析

【摘 要】通過對9個豬場不同階段豬群的豬瘟抗體監(jiān)測，筆者對豬場的豬瘟免疫效果、豬群的整體免疫保護(hù)水平和抗感染能力進(jìn)行了分析和評估，以為當(dāng)?shù)匾?guī)模豬場的豬瘟防控提供技術(shù)支持。

【關(guān)鍵詞】養(yǎng)豬；豬瘟；抗體水平；免疫效果

豬瘟（Classical swine fever，CSF）是一種高度接觸性傳染病，是養(yǎng)豬業(yè)所面臨的最嚴(yán)重的主要傳染病之一，主要通過直接接觸或接觸被污染的媒介物而發(fā)病，消化道、鼻腔黏膜和破裂的皮膚均是其感染途徑。近年來，隨著養(yǎng)豬規(guī)模化程度的提高，養(yǎng)殖戶對豬瘟防疫重要性的認(rèn)識也逐步提高。然而，由于豬瘟病毒的持續(xù)性感染、仔豬免疫耐受和妊娠母豬帶毒等問題，以及豬場飼養(yǎng)數(shù)量多且各種年齡豬都有的現(xiàn)狀，采取綜合防疫措施預(yù)防豬瘟的發(fā)生仍具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

豬瘟正向間接血凝反應(yīng)（IHA）診斷試劑；微量移液器；V型96孔血凝板。

1.2 被檢血清樣品的收集

從龍海市9個豬場收集的被檢血清樣品共987頭份，其中包括育肥豬350頭、保育仔豬273頭、哺乳仔豬257頭和母豬107頭。各類豬的年齡和免疫情況：①哺乳仔豬，14～21日齡，未免疫；②保育豬，主要選擇一免后二免前的豬只，50～60日齡，斷奶日齡在21d左右，21～25日齡時進(jìn)行首次免疫，注射1頭份豬瘟脾淋苗，50～60日齡時，為加強(qiáng)免疫而注射2頭份脾淋苗；③育肥豬，體重在60kg以上，試驗(yàn)前未注射其他疫苗；④母豬：每半年普免1次，每次肌注4頭份豬瘟脾淋苗。

1.3 方法與步驟

1.3.1 加稀釋液

用移液槍量取稀釋液50mg，加入血凝板上第一至第八排的1～12孔中。

1.3.2 稀釋待檢血清

將待檢血清樣品按順序編號，取待檢血清（1號）樣品50mg加入第一排的第一孔，混勻，然后再取50mg血清稀釋液加入第二孔混勻，依次類推一直稀釋至第十一孔。混勻后取50mg丟棄，此時第一排1～11孔待檢血清的稀釋度（倍數(shù)）依次為1∶2（1）、1∶4（2）、1∶8（3）、1∶16（4）、1∶32（5）、1∶64（6）、1∶128（7）、1∶256（8）、1∶512（9）、1∶1024（10）、1∶2048（11）。

取待檢血清（2號）加人第二排，依上法進(jìn)行，稀釋所有樣品。最后一孔不加血清，作為稀釋液對照孔。

1.3.3 陰性對照血清的稀釋

用移液槍將陰性血清50mg加入血凝板第一排的第一孔中，倍比稀釋到第六孔，然后丟棄50mg，此時陰性血清的稀釋倍數(shù)依次為1∶2（1）、1∶4（2）、1∶8（3）、1∶16（4）、1∶32（5）、1∶64（6）。最后一孔不加血清，作為稀釋液對照孔。

1.3.4 陽性血清的稀釋

用移液槍將陽性血清50mg加入血凝板第二排的第一孔中，倍比稀釋到第十一孔，然后丟棄50mg，此時陽性血清的稀釋倍數(shù)依次為1∶2（1）、1∶4（2）、1∶8（3）……1∶2048（11）。最后一孔不加血清，作為稀釋液對照孔。

1.3.5 加血凝抗原

用移液槍在96孔血凝板中的各孔加入豬瘟血凝抗原25mg。

1.3.6 振蕩混勻

置血凝板于微量振蕩器上振蕩1 min，室溫靜置1.5～2h。

1.3.7 判定標(biāo)準(zhǔn)

以50%紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集的最大稀釋度為該血清的血凝效價。血凝抗原滴度以1∶256為合格抗體，達(dá)1∶16及以上則判定為免疫合格，否則視為不達(dá)標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

經(jīng)過對9個豬場的不同階段豬群的豬瘟抗體進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果表明：母豬血清樣品107頭份，免疫合格的樣品數(shù)為81頭份，平均合格率達(dá)到75.7%；哺乳仔豬的抗體合格率僅次于母豬，檢測了257頭份，免疫合格的樣品數(shù)為185頭份，平均合格率為72.0%；保育豬和育肥豬的免疫抗體值比較低，各檢測273和350頭份，免疫合格樣品分別為173和197頭份，平均合格率分別為63.4%、56.3%。由此可見，該地豬群的整體健康水平和免疫狀況都不太理想。

3 討論

在間接血凝檢測結(jié)果中，當(dāng)豬瘟抗體水平達(dá)到1∶16以上時即可部分抵抗豬瘟病毒的侵襲，保護(hù)率可達(dá)80%左右，其抗體水平即可視為合格。從本次檢測結(jié)果來看，龍海市規(guī)模豬場豬瘟的抗體水平不高，平均保護(hù)率僅為64.44%。從檢測的樣本來看，母豬和哺乳仔豬的保護(hù)率相對較高，都在70%以上；而保育豬和育肥豬的保護(hù)率較低，抗體保護(hù)率還不能達(dá)到完全防控豬瘟的目的，在飼養(yǎng)環(huán)境條件差或季節(jié)變換等情況下可能會導(dǎo)致豬瘟流行。

母豬和哺乳仔豬的免疫合格率之所以比保育豬和肥育豬高，主要有2個方面的原因：（1）母豬的免疫次數(shù)較多且母源抗體水平較高。對于母豬，豬場1年基礎(chǔ)免疫2次，這就使得母豬的抗體水平一直處于比較高的水平，能提供比較強(qiáng)的免疫保護(hù)力。因?yàn)槟肛i的抗體水平相對較高，其提供給哺乳仔豬的母源抗體自然也較高。（2）免疫程序。豬瘟免疫抗體水平與接種豬的體質(zhì)、飼養(yǎng)環(huán)境和免疫程序有一定的關(guān)系，合理科學(xué)的豬瘟免疫程序?qū)μ岣邫C(jī)體產(chǎn)生豬瘟抗體有較好的效果，不同超免時間產(chǎn)生的抗體量并不一致，而且不同免疫程序?qū)ωi瘟抗體產(chǎn)生和發(fā)揮的效果也不一致。

本實(shí)驗(yàn)中的平均抗體合格率為64.44%，這說明該區(qū)域存在豬瘟感染的可能性，尋找一個科學(xué)合理的方案來提高豬群對豬瘟的抵抗力已刻不容緩。因此，我們應(yīng)采取綜合防御措施，制定較為合理的免疫方案，在控制傳染病的傳播途徑上（如嚴(yán)格引種等）以加大力度控制病毒進(jìn)入；加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高豬群的營養(yǎng)水平；進(jìn)行合理的免疫接種，投喂一些免疫增強(qiáng)劑以增強(qiáng)豬群的免疫效果，提高其對疾病的抵抗力；定期進(jìn)行抗體檢測，在免疫接種前先測定仔豬斷奶時的母源抗體效價，排除母源抗體的干擾。同時。還要隨時了解傳染病的活動狀態(tài)，必要時則對某些傳染性疾病用高效抗血清進(jìn)行預(yù)防和治療。通過綜合治理等防制措施，我們一定能進(jìn)一步將一些傳染性疾病造成的損失控制在最低限度。