籠養丹頂鶴繁殖期糞便中生殖激素的測定

【摘 要】本研究于2013年1月至2013年7月在福州市動物園內進行。通過對本園兩對繁殖狀況良好的成年丹頂鶴采集糞便提取激素，利用放射免疫分析法（RIA）測定籠養丹頂鶴糞便中的性激素水平的變化，包括睪酮、孕酮、雌二醇。結果表明，繁殖期丹頂鶴糞便中的睪酮、孕酮、雌二醇水平都遠高于非繁殖期。

【關鍵詞】籠養丹頂鶴；繁殖期；糞便；生殖激素

丹頂鶴屬于國家一級保護鳥類，為世界最瀕危滅絕的鳥類之一，具有極高的觀賞價值與研究和保護價值。多年來我國科研工作者在丹頂鶴的人工飼養及繁育擴群等方面進行了研究探索，并取得了許多成果。根據丹頂鶴的生物學特性及有關繁殖行為學方面的資料顯示，丹頂鶴每年春季繁殖，一般在4月初產卵，5月底結束。本研究利用采集糞便的非傷害法對籠養條件下丹頂鶴的性激素進行研究，可以最大限度地減少對動物的傷害，更可以避免動物應激其生理狀態、繁殖機能的不良影響。本文通過對籠養丹頂鶴繁殖期與非繁殖期糞便中性激素變化的關系進行研究，以探討丹頂鶴的繁殖行為與性激素之間可能存在的變化關系，這對加強丹頂鶴繁殖管理以及進一步的研究都有非常重要的意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本研究于2013年1月至2013年7月在福州市動物園內進行，取兩對繁殖狀況良好的成年丹頂鶴進行糞便采集提取激素。采樣時間按照繁殖期和非繁殖期進行劃分，繁殖期又按照產卵前后劃分為產卵前期（3～4月），產卵中期（4～5月）和產卵后期（5～6月），非繁殖期為（1～2月）和（6～7月），分別進行采樣檢測。

1.2 試驗方法

激素濃度采用放射免疫分析法（RIA）測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所，數據統計分析用SPSS軟件系統完成。

2 結果與分析

2.1 繁殖期與非繁殖期雄鶴糞便中睪酮的變化

表1 不同生理階段雄鶴糞便中睪酮的濃度

階段 性別 n 睪酮（T）濃度（ng/dl）

非繁殖期

（1-2月） ♂ 2 86.81±27.43

（6-7月） ♂ 2 84.54±24.35

繁殖期

產卵前期（3-4月） ♂ 2 205.59±45.67**

產卵中期（4-5月）♂ 2 350.50±20.08**

△△

產卵后期（5-6月）♂ 2 201.32±34.76**

注：* P<0.05，** P<0.01，與非繁殖期相比；△P<0.05，△△P<0.01，與產卵前后期相比。

從表1可以看出，從1月到7月，所研究的雄性丹頂鶴糞便中睪酮的濃度水平表現出了“低-高-低”的變化趨勢，雄性丹頂鶴糞便中睪酮水平從3月開始升高，并在4月升到最高點，5月后開始降低，到6月降低到繁殖前的水平。與非繁殖期相比，繁殖期的睪酮明顯高于非繁殖期，表現出差異極顯著（P<0.01）。繁殖期間產卵中期的睪酮也明顯高于產卵前期與產卵后期，表現為差異極顯著（P<0.01）。

2.2 繁殖期與非繁殖期雌鶴糞便中雌二醇的變化

表2 不同生理階段雌鶴糞便中雌二醇的濃度

階段 性別 n 雌二醇（E2）濃度（pg/ml）

非繁殖期

（1-2月） ♀ 2 8.14±3.73

（6-7月） ♀ 2 8.17±4.01

繁殖期

產卵前期（3-4月）♀ 2 13.17±5.74**

產卵中期（4-5月）♀ 2 40.34±8.49**

△△

產卵后期（5-6月）♀ 212.68±4.56**

注：* P<0.05，** P<0.01，與非繁殖期相比；△P<0.05，△△P<0.01，與產卵前后期相比。

從表2可以看出，從1月到7月，所研究的雌性丹頂鶴糞便中雌二醇的濃度水平表現出了“低-高-低”的變化趨

勢，雌性丹頂鶴糞便中雌二醇水平從3月開始升高，并在4月升到最高點，5月后開始降低，到6月降低到繁殖前的水平。與非繁殖期相比，繁殖期的雌二醇明顯高于非繁殖期，表現出差異極顯著（P<0.01）。繁殖期時產卵中期的雌二醇也明顯高于產卵前期與產卵后期，表現為差異極顯著（P<0.01）。

3 討論

3.1 對試驗方法的討論

研究生殖與內分泌的相互關系，需要采集大量連續的樣本。早期的研究大多以血液為樣本，但在野生動物特別是一些保護的珍稀野生動物中進行大量連續的血樣采集既不方便也不現實。本試驗中對性激素的分析采用了糞便采集的非損傷采樣方法，在動物不受人為干擾的情況下取其糞樣來測定動物的激素水平，從而避免了人為因子對動物激素分泌與釋放的影響。

3.2 研究繁殖季節丹頂鶴糞便中性激素的意義

對丹頂鶴繁殖季節糞便中生殖激素的研究有兩個重要意義：一是建立理想的丹頂鶴生殖模型，二是提高丹頂鶴的繁殖力。后者隨野生丹頂鶴數目的日趨減少而顯得十分重要，通過對丹頂鶴糞便中生殖激素的測定，對籠養丹頂鶴繁殖行為與糞便中性激素變化的關系進行研究，以探討從丹頂鶴糞便中提取和測定性腺激素的方法和丹頂鶴的繁殖行為與性激素之間可能存在的變化關系，為日后大型珍稀鳥類的各項研究提供基礎資料，同時也對加強丹頂鶴的繁殖管理以及進一步的研究都有非常重要的意義。由于丹頂鶴生殖激素濃度測定和放射免疫測定在丹頂鶴上的應用在國內外尚不多見，所以本研究所得的結果可作為今后同類試驗研究的參考依據。

參考文獻

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