雜交鮑人工苗種生產技術的研究

【摘 要】對雜交鮑親鮑采用強化培育和溫和催產、預先培養理想藻種、控制光照強度和使用微生態制劑等方法進行其人工苗種生產，以期培養出雜交鮑健康苗種。在此過程中，摸索親鮑性腺促熟與催產的方法，觀察雜交鮑精卵受精和胚胎發育情況，并研究雜交鮑的苗種前期培育及后期培育管理的方法。

【關鍵詞】雜交鮑；溫和催產；人工苗種；畸形率

雜交鮑（皺紋盤鮑大連群體與盤鮑日本群體雜交及其后代，以下同）是目前我國鮑養殖的主要種類。但由于多年來的自繁自育以及養殖生態環境惡化等原因，導致養殖鮑病害頻繁發生、生長緩慢、成活率低下等。研究發現，鮑的種質退化受養殖生態環境的影響。

針對當前雜交鮑苗種生產存在的問題，我們應改變以往的思路和方法，提出雜交鮑育苗和養成分別集中在不同海區，并采取種質優化技術，提供苗種培育的適宜的生態環境條件等措施，即通過采用選擇育種、雜交育種和親鮑優化培育等方法改良和優化種質；通過采用溫和催產、理想藻種預先培養、控制光照強度和使用微生態制劑等方法滿足其生理生態條件要求，以期達到雜交鮑苗種健康培育之目的。本文報道了雜交鮑親鮑性腺促熟后采用溫和催產方法獲得精卵的方法，進行人工授精并在受精卵孵化后進行苗種前期培育及后期管理，現將實驗結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 雜交鮑親鮑

實驗用雜交鮑親鮑，是蓄養的經強化培育和促熟的親鮑，雌雄比例為10：1，洗凈后用5g/m3聚維酮碘浸泡1h殺除表面病原菌。

1.1.2 培養池的整備

選好合適培養池（約6m×3m×1m），徹底刷池，用10ppm高錳酸鉀消毒，清洗并進過濾清潔海水100cm；把洗凈的附著基薄膜（1m×1m）放入池中，隨后按氮：磷：硅：鐵=10：1：1：0.1的比例施肥，潑灑EM菌20ml/m3，靜水配育3d。

1.2 方法

1.2.1 親鮑性腺的促熟

蓄養的密度為每立方米水體2kg鮑，1d換水2次，1d投喂鮮海帶1次，投喂量視鮑的攝食量而定，一般為親鮑體重的10%～20%。由于鮑是避光性動物，蓄養池上加黑色薄膜遮蓋，用于遮光和保溫，當性腺已經成熟時就可以誘導產卵。

1.2.2 成熟親鮑的催產與觀察

將雌雄親鮑分為I、Ⅱ兩組，I組親鮑陰干2h后，置于流動的海水之中，在較溫和的刺激下進行催產；Ⅱ組親鮑陰干2h后，置于流動的海水之中，在利用強光刺激進行催產。觀察從開始刺激到親鮑排精產卵的時間間隔、頻率和排量的多少。每次試驗之前鏡檢，觀察精子活力和卵子成熟度，估計精子和卵子濃度，便于以合適濃度受精。

1.2.3 受精及受精卵觀察

收集精卵后，在卵子收集液中加入適量精子收集液，受精后鏡檢，視野中受精卵周圍有5～8個精子為正常，發現有第一極體排放后，及時洗卵，把多余精液洗去。

1.2.4 受精卵投放及胚胎發育觀察

收集受精卵后，將受精卵直接布入育苗池，密度約為3～4萬個/m3。

1.2.5 苗種的前期管理與觀察

從幼蟲附著在附著基上開始，到鮑苗從附著基上剝離下來的這期間，屬于苗種前期管理階段。在此階段，需要保持水質新鮮，每日持續進行流水換水，觀察底棲硅藻的繁殖情況，定期補足營養鹽，定期殺除橈足類，防止其與鮑苗爭食附著基上的底棲硅藻。

1.2.6 苗種的后期管理與觀察

鮑苗從附著基上剝離開始，到飼育成為苗種（約1.8～2.0cm）可裝籠養成或作為苗種出售這段期間，稱為苗種后期管理。在此階段，需要注意適時將幼蟲剝離，根據鮑苗大小投喂不同型號的飼料，大于0.5cm的鮑苗，也可將大型藻類剁碎或絞碎后投喂。同時注意換水充氣和疫病防治。

1.2.7 受精率和畸形率計算

受精率=（視野內受精卵數/視野內總卵子數）×100%

畸形率=（視野內畸形受精卵數/視野內總卵子數）×100%

1.2.8 試驗海水

試驗海水為養鮑場過濾海水，pH值8.1，鹽度30.6。

2 結果

2.1 不同催產方式下，親鮑排精卵的時間

在不同催產方式下，雜交鮑親鮑精子和卵子排放的時間見表1。

I組親鮑陰干2.0～3.0h后，置于流動的海水之中，在較溫和的刺激下進行催產；Ⅱ組親鮑陰干2h后，置于流動的海水之中，再利用強光刺激進行催產。每組以下設立2個平行試驗。I為1、2、3，Ⅱ為4、5、6。

表1 催產方式對雜交鮑精卵排放時間的影響

組別I組Ⅱ組

123456

精子排放時間（h）2-132-252-191-351-431-37

卵子排放時間（h）2-492-562-452-142-202-01

注：2-13示2h13min，其余的類似。

2.2 不同催產方式下，親鮑精卵的釋放量

從表2可以看出，不同的催產方式對雜交鮑親鮑的刺激程度是不同的，刺激程度較大的催產方式能促使親鮑排出較多的精卵。

表2 不同催產方式對親鮑精卵排放量的影響

組別催產的持續時間（h）精卵排放量（%）畸形率（%）孵化率（%）

I13較少1585

233較少2080

33較少2080

Ⅱ43一般3565

53一般3550

63較多4050

2.3 催產方式與受精卵的畸形率和胚胎孵化率的關系

從表2可以看出，當采用刺激強度較大的催產方式時，雖然親鮑排精卵較快、較多，但畸形率也相應增大，孵化率則相應降低。所以在催產較順利的情況下，應盡可能采用較溫和的催產方式。

2.4 雜交鮑胚胎發育觀察及苗種培育

經實驗觀察，雜交鮑受精卵大約為180μm，在水溫24℃左右，受精卵40min開始分裂出現二分體，60min進入四分體，約2h后進入八分體，約8h即可孵化出擔輪幼體，開始進行浮游，至12h發育為面盤幼體。幼體附著時體長約300μm，隨后開始分泌圍口殼，并隨圍口殼的增長而逐漸長大。

幼體附著后經一個月左右的時間，當殼體長到2.0㎜時形成了第一個孔，即稱為稚鮑。此時需要增大換水量，并每隔4～5d給苗池施肥，促進底棲硅藻類生長。將鮑苗從附著基上剝離下來，投放到四角磚上培苗，飼育成為苗種（1.8～2.0cm），根據鮑苗大小投喂相應型號的飼料。此時需要嚴格進行換水充氣管理。

3 討論

3.1 親鮑促熟

采用室內加溫控溫的手段。每一種鮑都有一定的生殖水溫范圍，生殖水溫決定著其繁殖季節。根據這個原理，整年都可以通過控溫進行鮑的苗種生產。控制光照，應盡可能地全暗光；密度宜稀，1個箱籠或1個平面網箱放養30只左右成鮑；雌雄分池飼養（由于雄鮑易排精，若雌雄同池飼養易導致雌鮑流產）；加大換水量，1d在300%以上；投喂適口性的餌料，如海帶、江蘺等，2d清換1次，投餌量以殘餌略有剩余為準[1]。

3.2 溫和催產

采用陰干、流水、紫外線照射海水、溫差變化、強光刺激等方法都可以使親鮑排精放卵。生產上，常將這些方法綜合進行，以提高親鮑排放率。如果催產的刺激強度過大，如采用較大的溫變差、強大的紫外線照射劑量、強光刺激等，雖然親鮑的精卵排放了，但其受精率和孵化率都很低，畸形率都很高。模擬親鮑在自然海區中排放的條件要求，僅采用陰干和加大流水量的方法進行人工催產，實踐證明這種方法效果很好[2]。

而采用過氧化氫催產雜交鮑， 其催產濃度為30%的過氧化氫100×10-6～200×10-6（ V/ V） ， 浸浴時間0.5～1.0h。采用過氧化氫催產鮑的效果與紫外線燈照射相同，二者的原理都是一樣的：它們在水中分解產生的供氧體，，能提高鮑體內的脂肪酸環氧化酶合成的速率， 進而加速合成前列腺素前體和前列腺素，而鮑的精卵排放是受到前列腺素的控制。因此，只要在水中加入一定濃度的過氧化氫，使酶加速合成前列腺素，便能誘使鮑作出排精放卵的反應。

3.3 關于流水孵化的探討

流水孵化不直接投放受精卵于育苗池中，而是采取投放幼蟲。將受精卵在孵化池中孵化，其方法是：在孵化池中架設一個250目的長方形網箱，以每立方米體積800萬個卵為宜的密度，并在網箱內噴水流水和微充氣，孵化池出水孔可溢水，保持孵化池水位不變，并經常攪動卵子，這種方法可使孵化池水清新，有利于提高孵化率，同時可提高幼蟲活力，為提高以后幼蟲下池培育的存活率奠定基礎[3]。

3.4 控制光照強度的必要性

水體中硅藻種類較多，但一般每一種硅藻都需要適宜其生長的光照強度和水溫等；反之，某種特定的光強和水溫環境，必然有適應其生長繁殖的某一種優勢藻種。研究發現，鮑苗可攝食的硅藻種類甚多，但有利于鮑育苗的硅藻種類僅卵形藻和舟形藻等少數種類。控制光照強度有利于卵形藻和舟形藻等小個體藻類的生長，光照強度過強，會生產出柱形藻類，界面層過厚，同時會使藻類代謝旺盛和死亡加速，致使水中的pH值過高等，這些都不利于幼體、稚鮑的生長和存活。附著變態后的幼體平臥于生物膜上，其生活環境完全受界面層內生物膜的影響[4]，為減少界面層這一特殊而多變的環境給幼體造成不良影響，可采取如下措施：加大流水量或充氣量，在有力的水團帶動下可大為減薄界面層的厚度；在接藻種時，避免選用那些會長成立體硅藻林的藻種，在投入面盤幼蟲或受精卵之前，若硅藻膜太厚可用水沖去大多數的硅藻后再用；使用中等強度的光照培養硅藻；保持硅藻生物膜的年輕與健康，因年輕的生物膜產生中等水平的氧，夜間也消耗較少的氧。

3.5 苗種的前期管理

從幼蟲附著在附著基上開始， 到要把鮑苗從附著基上剝離下來的這期間， 屬于苗種前期管理階段。此階段需要保持水質新鮮，采用流水換水，并注意觀察底棲硅藻的繁殖情況， 定期補足營養鹽，殺滅敵害生物[2]。

3.6 苗種的后期管理

雜交鮑幼蟲附著飼養50～55d后，達0.3cm以上，發現餌料不足，則可考慮剝離。剝離方法有化學剝離和物理剝離。生產上一般采用物理方法剝離， 就是把附有鮑苗的附著基在水表面來回移動， 鮑苗就會自然脫落，將剝離下來的鮑苗撒入池底鋪有四角磚的水池中， 鮑苗放養密度為8000～10000只/m2。鮑苗剛投放于水池后，因環境變化，一部分鮑苗往往會爬至池壁的水表面處往外逃逸，此時應及時沖刷于水中，以免干露。鮑苗在0.5cm以上才剝離的傳統養殖方式，由于附著基上的餌料不足，使得幼苗在附著期內不斷死亡。現在，鮑苗0.3cm時就開始剝離用人工合成飼料喂養，降低了死亡率，且縮短了養殖期，3個月即可達2cm 以上，而用傳統養殖方式要6個月。在鮑苗飼養過程中，隨著鮑的個體生長，可適當調整鮑放養密度[2]。

鮑育苗是個系統工程，涉及親鮑種質、培育生態環境、硅藻培養、餌料、繁育技術體系等方方面面，只有每一環節都嚴格把關，才可以進行鮑苗種健康培育生產[5-7]。

參考文獻

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[3]嚴正凜，關瑞章，胡家才，等.九孔鮑苗種健康培育技術之探討[J].水產養殖， 2006，27（3）：14-16.

[4]嚴正凜，陳建華，吳萍茹等.光照強度對九孔鮑幼蟲及幼鮑生長存活的影響[J].水產 學報，2001，25（4）：336-341.

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