麻黃附子甘草湯同時煎煮減毒效果觀察

【摘要】目的觀察麻黃附子甘草湯同時煎煮時的減毒效果。方法以附子主要毒性成分烏頭堿、次烏頭堿及新烏頭堿為研究對象，觀察麻黃附子甘草湯同時煎煮時的減毒效果。結果與單一的附子提取液相比，附子與麻黃或甘草共同煎煮后，其毒性成分都有了明顯的下降，且三者同時煎煮時的減毒效果最優。結論麻黃附子甘草湯同時煎煮能達到有效的減毒效果，該配伍方式值得臨床推廣和使用。

【關鍵詞】麻黃；附子；甘草；減毒效果

麻黃附子甘草湯收載于《傷寒論》中，臨床上主要用來治療坐骨神經痛、惡寒發熱等疾病，由麻黃、附子、甘草以一定的比例配伍組成，其中，麻黃發汗解表，附子助陽溫經，甘草驅寒止痛[1]。《神農本草經》中記載，附子性大熱、有大毒，其主要毒性成分為烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿等雙酯類生物堿，主要對心臟、中樞神經系統有明顯的毒害作用[2]。臨床主要通過配伍和炮制來降低附子的毒性，本文以雙酯類生物堿為研究對象，觀察麻黃附子甘草湯同時煎煮時的減毒效果，為藥物的配伍及臨床用藥提供參考并奠定基礎。

1儀器與試藥

LC-2010A高效液相色譜儀（日本島津公司）；BS224S型電子天平（德國Sartorius公司）；麻黃、附子、甘草均由廣東省藥材公司中藥飲品廠提供；烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿對照品購于中國藥品生物制品檢定所，乙醇、氯仿、甲醇、氨水為分析純。

2方法與結果

2.1附子單煎液的提取取27g附子于錐形瓶中，加入220ml pH值為2.5酸性水，煎煮30min后，過濾并收集濾液，如此重復2次，合并濾液，氨水調pH值至9.0左右，再用同體積的氯仿萃取3次，以旋轉蒸發儀除去分離的氯仿后，25ml無水乙醇復溶，混勻，備用。

2.2麻黃附子甘草湯的煎煮分別稱取不同處方比例的麻黃、附子、甘草，用水煎煮。樣品1：18g麻黃、27g附子，用水煎煮30min，即得；樣品2：18g甘草、27g附子，用水煎煮，30min，即得；樣品3：18g麻黃、18g甘草與27g附子，用水煎煮30min。

2.3樣品中煎液的提取將“2.2”項下各樣品過濾，收集濾液，用氨水將濾液pH值調至9.0，再用等體積的氯仿萃取3次，以旋轉蒸發儀除去分離的氯仿，25ml乙醇復溶后，即得配伍溶液1-8。

2.4雙酯類生物堿的測定

2.4.1色譜條件[3]色譜柱：Diamonsil C18（2）（5 μm，250×4.6 mm）；流動相：A0.1%三乙胺-B甲醇，梯度洗脫：0-20min，55%的A，20-55min，70%的A，55-60min，55的A；流速：1ml·min-1，檢測波長：235nm；柱溫30℃；進樣體積：20μL。

2.4.2混合對照品溶液的配制稱取烏頭堿對照品10.2mg，次烏頭堿對照品10.4mg以及新烏頭堿對照品10.0mg置于10ml的容量瓶中，加適量甲醇溶解后，用甲醇繼續定容至刻度，搖勻，于冰箱中保存，備用。

2.4.3標準曲線及線性范圍分別吸取上述混合對照品容液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0，置10ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，搖勻，過濾，在“2.4.1”項色譜條件下進樣，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，得烏頭堿、次烏頭堿及新烏頭堿的回歸方程分別為Y=2.23×106-4201.3（R=0.9999）、Y=2.38×106+5621.9（R=0.9997）、Y=2.63×106-4738.2（R=0.9999），結果表明烏頭堿、次烏頭堿及新烏頭堿分別2.04-204μg/ml、2.08-208μg/ml、2.0-200μg/ml的范圍內，濃度與峰面積線性關系良好。

2.4.4樣品的測定取附子單煎液及3種配伍溶液適量，經0.45μm濾膜過濾后，取續濾液，按“2.4.1”項下色譜條件下進樣，根據標準曲線計算烏頭堿、次烏頭堿及新烏頭堿的濃度，見表1。

3討論

附子為中藥中的“回陽救逆第一品”，但其藥效往往與毒性共存。附子中的主要毒性成分為二萜類的生物堿，其中雙酯型烏頭堿的毒性最大，活性最強，據報道，烏頭堿經小鼠皮下注射的半數致死量為0.295mg/kg，烏頭堿、次烏頭堿及新烏頭堿是引起心律失常的主要原因。目前臨床上常通過炮制和配伍的方法來降低附子的毒性，如將附子與甘草、干姜、大黃、人參配伍，能有效降低烏頭堿類的毒性成分含量，而炮制主要是通過煎煮時的水解作用，將雙酯類烏頭堿轉變為毒性更小甚至是無毒的其他生物堿類，進而達到減毒的效果。麻黃附子甘草湯是臨床上較為經典的一種有效降低附子毒性的配伍，本文結果表明，與單一的提取液相比，附子與麻黃或甘草同時煎煮后毒性成分都有了明顯的下降，并且三者同時煎煮時，烏頭堿類毒性成分的含量是最低的，提示此種情況下附子的減毒效果最優。

綜上所述，麻黃附子甘草同時煎煮時的減毒效果最優，該種配伍方式值得臨床推廣使用，然而，麻黃與附子的減毒機制及三者的配伍順序對減毒效果的影響，還需進一步深入研究。

參考文獻

[1]鐘梅芳.麻黃附子甘草湯的不同配伍方式對其毒性成分的影響分析[J].實用中醫內科雜志，2012，26（7）：68-69.

[2]陳榮昌，孫桂波，張強，等.附子毒性研究進展[J].中國中藥雜志，2013（008）：1126-1129.

[3]汪劍飛.HPLC法測定不同廠家三七傷藥片中烏頭堿，新烏頭堿和次烏頭堿[J].中成藥，2013，35（4）：717-720.