【摘要】粘質沙雷氏菌廣泛分布于自然界,近年來漸成為臨床上常見的條件致病菌。本文報道了從一肺泡灌洗液中分離到一株產紅色色素的革蘭氏陰性桿菌。根據標本中分離得到的粘質沙雷氏菌的生化特性,本菌屬于腸桿菌科,經微生物學鑒定該菌為粘質沙雷氏菌屬。藥敏試驗結果表明該粘質沙雷菌對左旋氧氟沙星、環丙沙星、丁胺卡那、磷酶素、克林霉素、利福平等敏感(S),對慶大霉素、妥布霉素敏感性下降為中介[1],對頭胞類、氨芐青霉素、羧芐青霉素、四環素、氯霉素、復方:新諾明、多粘菌素B等耐藥(R)。該菌株耐紫外線照射。動物試驗結果表明,該菌對小白鼠有致病力。
【關鍵詞】粘質沙雷氏菌;分離;生物學特性
1病歷資料
我院2012年12月收治一呼吸內科患者,患者王XX、男、68歲、嚴重的呼吸道感染癥狀,畏寒、寒戰后發熱40℃,抗炎治療5天無效轉入我院。入院后查體:T:38.9℃;P:104次/分;R:20次/分;BP:110/89mmHg;X光片檢查顯示:左上肺感染灶。WBC計數:28.2×109/L,分類計數:中性分葉核粒細胞:88%、淋巴細胞:11%。單核細胞:1%;血紅蛋白:60g/L;CT提示兩側胸腔積液,積液常規檢查提示為化膿性積液。經補液抗炎及對癥等支持治療,患者一般情況較差,拌膿毒血癥,多臟器能衰竭,家屬要求出院。
2微生物學檢查
2.1分離培養
2.1.1儀器與試劑MH瓊脂平板、血平板(BAP)、中國蘭平板(EMB)、麥康凱平板(MAC)均由杭州天和生物試劑公司提供,Vitek全自動細菌分析儀,35℃CO2恒溫孵育箱,GY-15e細菌鑒定卡,GPS-107藥敏試驗卡為生物梅里埃公司產品。
2.1.2分離培養支氣管肺泡灌洗液經35℃孵育24h后,分純,然后分別接種于BAP,EMB或MAC等腸道選擇鑒別培養基,經24h培養后在血平板上生長良好菌落:圓形,直徑1.5-2mm,光滑,中心粒狀、不透明、灰白色或粉紅色菌落呈粘液狀,能在40℃環境生長,生長pH:6-9不需Na+,在EMB上有時有金屬光澤,在MAC上成粉紅色或紅色菌落.粘質沙雷菌中分出一個生物群,其中,A1A2菌株產生紅色(Prodigiosin)脂溶性色素,不擴散不溶于水,使菌落全部或中心或邊緣呈紅色,培養條件不同,色調可呈橙黃、粉紅或深紅。室溫更易產生,厭O2環境不產生[1]。A2的某些菌株可產生紅色水溶性的吡羧酸(Pyrimine),使培養基呈紅色、菌落微紅或灰白色。
2.1.3細菌鑒定該菌落經涂片革蘭染色、鞭毛染色、莢膜染色鏡檢為革蘭陰性小桿菌。有周身鞭毛、無芽胞、無莢膜。經培養、涂片、染色及分離鑒定,本菌屬于腸桿菌科,該菌為粘質沙雷菌。
2.2生化反應兼性厭氧生長,主要生化試驗氧化酶陰性(-),葡萄糖發酵(+),硝酸鹽還原(+)葡萄酸鹽(+)動力(+)、TST(三糖鐵1產堿/產酸或產酸/產酸、枸櫞酸鈉(CIT)(+)、VRE(脲酶)(+)/±、IND(吲哚)(-)、OPeN(鳥氨酸脫羧酶)(+)、LYS(賴氨酸)(+)、精氨酸(-)、V-P(+)、H2S(-)、丙二酸鹽(-)、苯丙氨酸脫氨酶(-)、脂酶、明膠酶和DNA酶水解均呈(+)、L阿拉伯粘發酵(-)、D-阿拉伯酶(-)、D—山梨醇(+)、蔗糖(+)、乳糖(-)、棉子糖(-)。用GY-15e系統鑒定編碼為11266,符合率99.8%,為粘質沙雷菌[2]。與同屬中其他種的主要區別是阿拉伯糖、棉子糖、木糖均為(-)。
2.3抗原結構粘質沙雷菌已知有O抗原21種、H抗原有25種,其中O5分為O5a、Osb、O5c;O10分為O10a、O10b、O10c;O16分為O16a、O16b、O16c。
2.4藥敏試驗及結果分析采用稀釋法用CPS-107藥敏鑒定卡,各種抗生素的溶解液和稀釋液參照CLSI 2008 M100S18文件。[3]。結果粘質沙雷菌對左旋氧氟沙星、環丙沙星、丁胺卡那、磷酶素、克林霉素、利福平等敏感(S),對慶大霉素、妥布霉素敏感性下降為中介[1],對頭胞類、氨芐青霉素、羧芐青霉素、四環素、氯霉素、復方:新諾明、多粘菌素B等耐藥(R)。
3討論
粘質沙雷菌在自然界廣泛存在,分布于土壤、水、植物表面及食物中。近年來漸成為臨床上常見的條件致病菌。由于該菌具有侵襲性強并對許多常用抗生素有耐藥性,現已成為一種重要的致病菌。多在體衰、免疫力低下、各種醫療處置以及生活環境不良情況下發生感染和醫院內感染,據報道,該菌曾多次引起醫院內感染的爆發流行[4]。對該株粘質沙雷氏菌進行14種抗生素的藥物敏感試驗,結果表明粘質沙雷氏菌對多種抗生素產生較高的耐藥率。常導致人感染的疾病中有:泌尿系統系感染、局部膿腫及多臟器膿腫全身性感染,可從尿、血、傷口、肺、肝脾、皮膚潰瘍、耳分泌物分離到。
參考文獻
[1]孔麗清,齊雅君,唱麗敏,王鐵軍.我院粘質沙雷氏菌的分布及耐藥性分析[J].中國實驗診斷學,2008(12).
[2]張沂平,徐農,婁廣媛,鐘海均,余新民,樓彩金;粘質沙雷菌菌苗治療惡性胸腔積液的臨床觀察[J].臨床腫瘤學雜志,2000(03).
[3]叢玉隆,主編.細菌的抗菌藥物敏感試驗方法[A].實用檢驗醫學[M].北京:人民衛生出版社,2009:1031.
[4]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].南京:東南大學出版社,2006:809.