不同染色方法在脫落細胞學檢查中的應用比較

蒙松年

（邵陽醫學高等專科學校，湖南 邵陽 422000）

自Papanicoloau報道對陰道脫落細胞進行固定著色，進行女性生殖器惡性腫瘤的診斷，脫落細胞學檢查便逐步在臨床推廣應用。

由于脫落細胞脫落后得不到氧氣和養分，加上酶的作用，易發生退化變性；若固定不及時，各種細胞成分自溶破壞，固定不好或過多的人為擠壓，也會影響細胞形態；此外，不同的染色方法，細胞的鏡下表現差別較大，染色操作不當，往往造成人為假象，這些因素，均可干擾影響結果的判斷。

我們通過對2104例脫落細胞（包括細針吸取細胞）標本進行巴氏染色、HE染色和瑞氏染色結果對比分析，為各種標本選擇合適的染色方法及在操作中應特別注意的技術因素，進行了有益的探討。

1 材料與方法

1.1 2104例脫落細胞標本來自附屬醫院門診及住院病人，其中宮頸涂片722例，漿膜腔積液涂片276例，甲狀腺穿刺涂片312例，淋巴結穿刺涂片416例，乳腺穿刺涂片202例，痰液涂片176例。

1.2 對甲狀腺、淋巴結、乳腺的細針吸取細胞涂片、漿膜腔積液涂片進行瑞氏染色，另做HE染色對照，對宮頸涂片、痰液涂片進行巴氏染色，另做HE染色對照。

1.3 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色按《脫落細胞學檢驗》操作規程進行[1]。

2 結果

2.1 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的各自結果，見表1。

2.2 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的各自特點，見表2。

2.3 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的質量控制，見表3。

表1 三種染色方法結果比較

表2 三種染色方法特點比較

3 討論

3.1 細胞涂片的適時固定對保證染色質量具有重要意義

放置過久而未進行固定處理的涂片會使細胞脹大變形，甚至自溶腐敗，從而導致細胞著色差，結構不清，影響觀察。當涂片水分過多時，易引起涂片中細胞脫落。脫水不當，易造成細胞過渡收縮和濃染，同樣無法顯示其清晰結構。因此，為了保證染色效果，瑞氏染色應在涂片晾干后及時進行固定染色，HE染色及巴氏染色時涂片后應及時浸入乙醇固定液中固定，如遇水分過多的涂片，可晾至涂片邊緣廓及涂片內開始出現點狀干燥區域時立即浸入乙醇固定液中進行固定、染色。

3.2 染色的目的

是將細胞在染液中染上不同深淺的顏色，產生不同的折射率以利于在顯微鏡下辨別各種細胞類別，正確的操作是保證染色效果的關鍵。三種染色方法中，瑞氏染色較為容易掌握，應注意在加染液固定后，及時追加緩沖液，以防染液揮發產生沉渣附著在細胞上，影響效果。巴氏染色步驟較多，EA 36染液的PH值、在稀鹽酸中的分色，對巴氏染色的成功與否非常重要，應嚴格按要求操作，同時，要經常注意細胞著色的變化，及時更換染液，否則較難獲得理想的染色效果。HE染色時，要特別注意掌握分化的時間，一旦分化完成，必須立即用水洗去鹽酸酒精，否則細胞核的著色將被褪去。此外，啟用新的蘇木素染液時，應添加一些老的染液使之混合，及時用濾紙吸去染液表層的金屬色澤膜，伊紅染液中不染太久，都是保證染色質量的重要因素。

3.3 細胞學染色方法較多

HE染色、巴氏染色及瑞氏染色三種方法各有其優缺點。對不同的標本可選擇不同的染色方法，以滿足操作簡便、結構清新、易于判斷的要求。許多醫院習慣應用操作簡便的HE染色，巴氏染色并不很普及，巴氏染色和HE染色的涂片，在診斷價值上無根本區別，均能提供清楚的細胞核結構，良惡性細胞核的顯色差異明顯，細胞核的形態及染色改變是細胞學上診斷癌的重要依據。巴氏染色細胞核細微結構清晰，能辨認染色質的模式，胞漿透明、多彩，顯示細胞的分化程度[2]，應用液基細胞學檢驗技術[LCT]，染色過程由電腦全自動控制，簡化了繁雜的染色過程，唯費用較高，在宮頸涂片檢查時國內外推薦使用巴氏染色[3]。HE染色操作簡便，雖對胞漿著色單一，但對胞核著色深淺有層次，惡性腫瘤細胞核深染明顯，有助于判斷，各種涂片均可采用此染色。瑞氏染色結果清晰，核漿分明，核的形態、核仁、包涵物明顯，雖良惡性細胞核顏色一致，從著色深淺上不能區別，但綜合涂片細胞胞體，特別是細胞核的大小、形態等改變，仍能對被檢細胞作出較正確的判斷，且其操作簡便，質控容易，尤其適用于穿刺細胞、漿膜腔積液細胞的檢查，若同時配合以HE染色，則對涂片細胞的評估及診斷更具幫助。

［1］梁英銳.脫落細胞學檢驗[M].北京：人民衛生出版社，1991：32－37.

［2］舒儀經，闞秀.細針吸取細胞病理學[M].北京：人民衛生出版社，2000：4－6.

［3］田玉旺，朱紅艷，邢宜，等.提高細胞學標本陽性檢出率的制片技術探討[J].中國組織化學與細胞化學雜志，2012，21（4）：426.