普萘洛爾治療對增生性血管瘤患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響

吳杉英 王彪 陳麗芬 黃祖根 黃循鐳 王美水

·論著·

普萘洛爾治療對增生性血管瘤患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響

吳杉英 王彪 陳麗芬 黃祖根 黃循鐳 王美水

目的觀察口服普萘洛爾治療增生期血管瘤，對患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響。方法選擇增生期血管瘤患兒40例，口服普萘洛爾治療，抽取服藥前與服藥后8周血液樣本，用Elisa方法檢測血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度。結果服藥8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度比服藥前明顯降低，存在統計學差異。結論普萘洛爾治療增生期血管瘤，其作用機制可能與下調VEGF、bFGF、MMP-9的表達有關。

普萘洛爾嬰幼兒血管瘤血管內皮細胞生長因子堿性成纖維細胞生長因子基質金屬蛋白酶-9

血管瘤是嬰幼兒時期最常見的良性腫瘤之一，是胚胎期血管形成過程中出現的一種先天性發育不良，新生兒的發病率約為1.1%～2.6%[1]，早產兒中較常見，尤其是女性早產兒，通常發生在患兒的頭部或頸部。根據血管瘤內皮細胞的生物學特點及其臨床表現，可將血管瘤的自然病程分為增生期、退化期和退化完成期[2-3]。血管瘤內皮細胞的增生是血管瘤增生期的主要特征[4]，血管內皮細胞生長因子（VEGF）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）與血管瘤內皮細胞增殖密切相關，可用于血管瘤的分期；而基質金屬蛋白酶9（MMP-9）可促進VEGF、bFGF等的釋放，促進血管生長。本研究觀察普萘洛爾治療增生期嬰幼兒血管瘤后，患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的表達水平的變化，以初步揭示其可能的機制。

1 資料與方法

1.1 資料

選取2009年9月至2012年12月，我科收治的嬰幼兒增生期血管瘤患者40例為研究對象。納入標準：患兒年齡在1歲以內；出生時或出生后7～10 d出現“蚊咬”狀或針尖樣紅點，或出生時即為片狀，之后出現斑片擴大或出現皮下質軟腫物；有迅速生長病史；腫物表面呈草莓狀或淡藍色，壓之褪色或縮小。患竇性心動過緩、支氣管哮喘、心源性休克、心臟傳導阻滯（Ⅱ～Ⅲ度房室傳導阻滯）、重度或急性心力衰竭等疾病的患兒除外。

1.2 方法

1.2.1 觀察療效

患兒入院后，告知口服普萘洛爾的目的、安全性及相關風險，并獲患兒家屬書面同意。治療前完善相關檢查，確認無相關禁忌癥后開始治療。劑量為1.5 mg/Kg·d，每天1次，晨起頓服。3 d后如無明顯異常反應，出院繼續服藥至瘤體消退，期間注意測量血管瘤大小，觀察血管瘤表面皮膚顏色及張力變化。

1.2.2 收集及檢測樣本

采集40例患兒服藥前及服藥8周后的血液樣本，每次2 mL（不加抗凝劑），分別裝入試管，在室溫下靜止30 min后，以2 000 r/min離心分離得到血清，吸取血清裝入EP管內，-80℃保存待測。待標本收齊后，采用Elisa方法檢測血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度。

1.2.3 實驗試劑及耗材

離心機、天平、EP管、-80℃冰箱、高精度加樣器及槍頭、酶標儀（450 nm）、37℃恒溫箱、一次性試管、吸水紙、人VEGF ELISA檢測試劑盒、人bFGF ELISA檢測試劑盒、人MMP-9 ELISA檢測試劑盒。

1.2.4 療效判定標準

以Achauer等[5]的4級標準進行分析判斷（以治療8周時結果為準）。Ⅰ級（差）：瘤體縮小＜25%；Ⅱ級（中）：瘤體縮小及皮損顏色消退26%～50%；Ⅲ級（好）：瘤體及皮損顏色消退51%～75%；Ⅳ級（優）：皮損消退＞75%，瘤體消失及病損皮膚恢復或接近正常膚色。Ⅱ～Ⅳ為有效，Ⅰ級為無效。

1.3 統計學處理

采用SPSS17.0軟件進行數據分析。計數資料采用卡方檢驗，計量資料采用配對t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

8周治療后，本組患兒中優11例，好14例，中14例，差1例。服藥8周后，患兒血清中VEGF濃度由（264.18±15.33）pg/mL降至（142.70±18.84）pg/mL；bFGF由（59.41±4.02）pg/mL降至（38.85±5.84）pg/mL、MMP-9濃度由（411.21±28.36）pg/mL降至（279.94± 29.80）pg/mL，均較用藥前明顯下降（P＜0.05）。

3 討論

血管瘤是一種常見疾病，是以血管內皮細胞異常增殖為基礎的良性腫瘤，血管瘤的形成是由血管無節制地生成或血管生成因子和抑制因子不平衡所造成。VEGF、bFGF、MMP-9在血管瘤的形成過程中發揮了重要作用。VEGF是一種糖基化分泌性多肽因子，可使內皮細胞增殖和遷移，提高血管的通透性，促進新生血管和基質細胞生長；bFGF是一種強烈的內皮細胞和管壁結締組織促生長因子，能夠促進內皮細胞遷移進入細胞外基質形成毛細血管組織，而且能誘導VEGF分泌[6]；基質金屬蛋白酶（MMP）是一類具有鋅離子及鈣離子依賴性的細胞外蛋白水解酶，它不僅可促進血管生成因子VEGF、bFGF等的釋放，促進血管生成，還可降解細胞外基質，促進內皮細胞遷移及管狀結構的形成。

血清中VEGF的濃度與血管瘤內皮細胞增殖的相關性早已被證實[7-8]，即增生期血管瘤患者血清中VEGF的濃度明顯高于消退期血管瘤、血管畸形及正常對照組。本研究中，服藥8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度較服藥前明顯降低，該研究結果與近年來相關文獻結果基本相符[9-10]。隨著這三個指標濃度的下降，血管瘤停止生長或消退，因此提示普萘洛爾治療增生期血管瘤，其機制可能與下調VEGF、bFGF、MMP-9的表達有關，但尚待進一步明確。有研究發現，普萘洛爾可能通過抑制cAMP/PKA信號通路對ERK/MAPK信號通路的激活，從而抑制增殖期血管瘤VEGF的分泌[11]。在血管瘤治療后期，普萘洛爾通過下調Raf/絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路，減少VEGF和bFGF的表達，從而促使血管瘤進一步消退[12]。相信隨著今后研究的深入，其機制將更為明確并獲得證實。

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The Influence of Propranolol on VEGF,bFGF,MMP-9 in Serum Samples in the Treatment Proliferative Hemangioma

ObjectiveTo investigate the influence of propranolol on VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples in the treatment of proliferative hemangioma.MethodsForty children with proliferative hemangioma were enrolled and treated with propranolol.The VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples were detected with ELISA assay before and 8 weeks after propranolol treatment.ResultsAfter 8 weeks of treatment,the concentration levels of VEGF,bFGF and MMP-9 in serum were obviously decreased,and the differences were significant.ConclusionThe decrease on the expression of VEGF,bFGF and MMP-9 may play an important role in the treatment of proliferative hemangioma.

Propranolol;Infantile hemangioma;Vascular endothelial growth factor;Basic fibroblast growth factor; Matrix metalloproteinase-9

R732.2

A

1673－0364（2014）04－0181－03

WU Shanying,WANG Biao,CHEN Lifen,HUANG Zugen,HUANG Xunlei,WANG Meishui.
Department of Plastic Surgery, the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University,Fuzhou 350001,China.Corresponding author:Wang Biao(E-mail: wangbiao123@tom.com).

福建省教育廳B類科技計劃項目（JB11055）；國家臨床重點專科建設項目。

350001福建省福州市福建醫科大學附屬第一醫院整形外科。

王彪（E-mail：wangbiao123@tom.com）。

2014年5月12日；

2014年6月20日）

10.3969/j.issn.1673-0364.2014.04.001