HCV-cAg與HCV-Ab聯合檢測的互補作用及HCV陽性者與ALT的關系

陳小龍 唐榮德 華關民 陳 敏 譚亮慶

廣東省江門市新會中醫院，廣東江門 529100

丙型肝炎(丙肝)是一種主要經血液傳播的傳染病，而丙肝病毒(HCV)是其主要的致病因素，HCV感染的實驗室檢查是丙肝診斷的重要依據。近些年來的HCV檢測技術主要是丙肝病毒抗體(HCV-Ab)和丙肝病毒核酸(HCV-RNA)檢測，二者均存在一定的局限性。該院于2013年3月起正式開展了丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)檢測，這與HCV-Ab聯合檢測能起到一定的互補作用，可望提高HCV感染的陽性檢出率。但2項聯合檢測到底能起到多少互補作用以及HCV陽性者與丙氨酸氨基轉移酶(ALT)的關系如何還值得探討，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

該研究的研究對象為2013年3月1日—5月31日這一時段來我院作疾病診治的并來源于2個方面的患者，一是手術前(含輸血前)作例行檢查的患者，共2 061例；二是ALT>80 U/L的肝炎和疑似肝炎患者，共242例。根據研究對象的2個來源，本文將其分為兩組，即手術前檢查組和ALT>80 U/L組。

1.2 檢測方法

1.2.1 基本操作 將患者空腹抽血的血液標本離心分離出血清后，手術前檢查組的標本均于抽血當天完成HCV-cAg和HCV-Ab，(簡稱丙肝2項)及ALT等的檢測；ALT>80 U/L組如果醫生已開出丙肝2項檢查，則于抽血當天完成丙肝2項和ALT的檢測；如果醫生沒有開出丙肝2項檢查，除ALT于抽血當天完成檢測外，將患者血清置于-20 ℃冰箱保存，每2周集中檢測其丙肝2項。在正式開展HCV-cAg檢測前，我們按照試劑盒說明書作了2周的預備實驗，嚴格掌握其操作方法。

1.2.2 HCV-cAg檢測 采用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)定性檢測患者血清中的HCV-cAg，試劑盒由湖南海潤制藥有限公司生產(產品批號：20121201)，檢測患者標本時嚴格按照試劑盒說明書所介紹的方法操作。

1.2.3 HCV-Ab檢測 采用兩步間接酶聯免疫吸附法(ELISA)定性檢測患者血清中的HCV-Ab，試劑盒由珠海麗珠試劑有限公司生產(產品批號：2013010112)，檢測患者標本時嚴格按照試劑盒說明書所介紹的方法操作。

1.2.4 ALT檢測 采用速率法由Roche全自動生化儀完成，我院目前的ALT正常參考區間為0～40 U/L，故ALT>40 U/L示為升高，ALT>80 U/L示為升高1倍。

1.3 統計方法

計數資料以例數(n)和百分率(%)表示，采用χ2檢驗；計量資料以均值±標準差（±s）表示，采用t檢驗；所有數據由該院計算機醫用數理統計系統計算結果。另外，該研究HCV檢測陽性的概念是丙肝2項檢測中任何一項出現陽性或2項均出現陽性被看成是HCV陽性，故研究中聯合檢測陽性在手術前檢查組系已減去2項指標均陽性的10例，在ALT>80 U/L組系已減去2項指標均陽性的8例；在HCV陽性且ALT升高者中有個別患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)陽性，這是由于重疊感染所致，因病例極少，故該研究忽略不計。

2 結果

2.1 兩組丙肝2項的檢測結果

通過組內比較，在手術前檢查組中聯合檢測有2.7%的陽性率，顯著高于單獨HCV-cAg和單獨HCV-Ab的1.6%(P<0.05)；在ALT>80 U/L組中聯合檢測有14.5%的陽性率，高于單獨HCV-Ab的10.7%，顯著高于單獨HCV-cAg的7.0%(P<0.01)。組間比較揭示ALT>80 U/L組各項指標陽性檢出率均顯著高于手術前檢查組，兩組之間差異有統計學意義(均P<0.01)，見表1。

表1 兩組丙肝2項的檢測結果比較[n(%)]

2.2 兩組HCV檢測陽性者ALT的變化情況

ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數在組內比較差異有統計學意義(P<0.01)，HCV-cAg和HCV-Ab單項陽性與手術前檢查組比較差異有統計學意義(P<0.01)。而手術前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數是2項均陽性高于HCVAb陽性、HCV-Ab陽性高于HCV-cAg，ALT均值在HCV-cAg與HCV-Ab和2項均陽性比較差異有統計學意義(P<0.05)，ALT>80 U/L例數僅在HCV-cAg與2項均陽性比較中差異有統計學意義 (P<0.05)，見表2、表3。

表2 兩組HCV檢測陽性者ALT的變化情況(±s)

表2 兩組HCV檢測陽性者ALT的變化情況(±s)

注：組內與2項均陽性比較，△P<0.05；組內與HCV-Ab比較，▲P<0.05；與手術前檢查組比較，*P<0.01。

2項均陽性ALT手術前檢查組 50.0±46.0△▲ 72.8±46.8 92.0±45.9 ALT>80U/L 組 (118.5±28.5)* (112.8±31.0)* 108.7±23.4組別 HCV-cAg陽性ALT HCV-Ab陽性ALT

表3 兩組HCV檢測陽性者ALT>80U/L例數[n(%)]

3 討論

HCV感染通常是持續性的終生感染，它可以通過輸血、靜脈吸毒、密切接觸等途徑傳播。目前特別在縣以下的基層醫院對于HCV感染的臨床診斷仍以ELISA方法檢測HCV-Ab為主，因基層醫院暫時還沒有條件采用聚合酶鏈反應(PCR)技術來檢測HCV-RNA。但由于廠家之間使用丙肝基因重組抗原質量及各抗原片段包被比例的不同，各廠家試劑間的敏感性和特異性存在著一定差異，從而導致HCV-Ab檢測結果不一致。有人[1]認為，因感染丙肝后HCV-Ab出現較慢，一般情況下抗體的血清學轉換可以延遲到暴露后幾個月才發生，此時可出現HCVAb的假陰性。另外，在HCV-Ab的ELISA試劑盒中，由于酶標抗體是廣譜抗人IgG抗體，容易產生假陽性結果。HCV-cAg是在丙肝感染者體內出現的早期感染標志，與HCV-RNA符合性較高[2]，故近些年來有些醫院開展了HCV-cAg的檢測，也出現了相關的報道。如許方[2]等通過同時檢測HCV-cAg和HCV-Ab 2項指標，且對HCV-cAg陽性但HCV-Ab陰性的標本進一步做HCV-RNA定量檢測，結果為90例丙肝抗體陽性組中，34例為HCV-cAg陽性，陽性率為37.78%；391例丙肝抗體陰性而ALT升高組中，2例為HCV-cAg陽性，陽性率為0.51%。史璇[3]在探討HCV-cAg對HCV感染診斷和治療中的作用中，發現90例HCVAb陽性者HCV-cAg檢測陽性率為 42.2%。朱鴻[4]等對173例HCV感染患者和82例健康對照者作了HCV-Ab、總HCV-cAg和HCV-RNA檢測，結果是HCV感染者HCV-Ab均為陽性，而HCV-RNA陽性率為49.7%，HCV-cAg陽性率為36.4%。郭華[5]等回顧性分析本院輸血和手術前檢測患者HCV的結果， HCVAb為2.0%、HCV-cAg為0.6%，HCVcAg陽性率低于HCV-Ab，認為HCV-Ab和HCVcAg檢測均具有一定的特異性。

為了了解HCV-cAg與HCV-Ab聯合檢測對診斷HCV感染的互補作用及HCV陽性者與ALT的關系，從研究結果可以看出，在手術前檢查組中聯合檢測丙肝2項有2.7%的陽性率，顯著高于單獨HCV-cAg和單獨HCV-Ab的1.6%(P<0.05)；在ALT>80 U/L組中聯合檢測有14.5%的陽性率，高于單獨HCVAb的10.7%，顯著高于單獨HCV-cAg的7.0%(P<0.01)。結果說明丙肝2項聯合檢測明顯優于單項檢測，這對HCV感染的診斷起到了很好的互補作用，大大提高了陽性檢出率。由于該研究特地選擇ALT>80U/L的肝炎和疑似肝炎病例來進行實驗觀察，故組間比較揭示ALT>80 U/L組各項指標陽性檢出率均顯著高于手術前檢查組(P<0.01)，ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數在組內比較差異無統計學意義，而與手術前檢查組比較,差異有統計學意義(P<0.01)。值得注意的是，手術前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數是2項均陽性高于HCV-Ab陽性、HCVAb陽性高于HCV-cAg，結果提示ALT的變化與HCV的感染過程有關。由于ALT是反映肝功能是否正常的最靈敏的指標，它在丙肝中多呈輕度或中度升高。HCV-cAg是HCV感染者體內的早期標志物，在HCV感染早期，患者雖然出現HCV-cAg陽性，但許多患者肝臟還未受損，故肝功能異常者較少；HCV-Ab的出現是在HCV感染后的6～12周[6]，大部分病毒攜帶者已發展為丙肝導致肝臟受損，但有些患者已經過治療使得ALT降低，故僅一部分HCV-Ab陽性者肝功能異常；而HCV-cAg與HCV-Ab2項指標均陽性的病例，說明患者正在丙肝患病之中且還未得到治療，肝臟正在受損，故大部分患者肝功能異常。

由于HCV感染的早期存在“窗口期”[7]，在這一階段檢測不到HCV-Ab，因此開展HCV-cAg檢測有利于丙肝感染患者的早期發現，可以在一定程度上彌補HCV-Ab檢測的不足；且2項聯合檢測明顯優于單項檢測，這對HCV感染的診斷起到了很好的互補作用，加上ALT等肝功能指標的檢測，有利于HCV感染的正確診斷。

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