保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高效陰離子色譜測定方法分析

戰英 陳俊竹 趙一暉 張培軍

吉林省衛生監測檢驗中心，吉林 長春 130062

保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高效陰離子色譜測定方法分析

戰英 陳俊竹 趙一暉 張培軍

吉林省衛生監測檢驗中心，吉林 長春 130062

隨著時代的發展，如今開始大量開發應用保健品，在保健品領域內，廣泛重視鹽酸氨基葡萄糖；本文通過試驗，分析了如何對保健食品中鹽酸氨基葡萄糖進行測定。

保健食品；鹽酸氨基葡萄糖；高效陰離子色譜

糖蛋白廣泛存在于人體和動物體內的關節組織中，而鹽酸氨基葡萄糖是糖蛋白的一種天然成分，具有一系列的作用，可以對軟骨及關節功能進行修復和維持，并且也可以有效地推遲骨性關節炎的發展。另外，在肝腎解毒方面，它可以提升嬰兒腸道中雙歧桿菌的增長速度，還有報道稱，鹽酸氨基葡萄糖可以對癌細胞的生長起到有效的抑制作用[1]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

采用了美國生產的ICS2000離子色譜儀，將在線脫氣裝置的四元梯度泵、柱溫箱、脈沖安培檢測器以及淋洗液自動發生器、氨基酸分離柱等。采用了250 mmol/L NaOH；MiliQ超純水，鹽酸氨基葡萄糖標準品。在配合鹽酸氨基葡萄糖標準溶液時，嚴格依據這樣的程序來進行，對100 mg鹽酸氨基葡萄糖標準品進行準確稱取，然后用水稀釋，使其達到100 ml，配成1 g/L的標準貯備液。

1.2 實驗

色譜條件中采用積分脈沖安培檢測器，Au工作電極和PH參比電極。流動相為250 mmol/ L NaOH，流速為每分鐘0.25 ml，柱溫為30℃。用水對鹽酸氨基葡萄糖標準溶液進行稀釋，促使其濃度達到0.1 g/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L，直接進樣測定，橫縱坐標分別為鹽酸氨基葡萄糖標準溶液的質量濃度和峰面積，對標準曲線進行繪制。對樣品進行適量稱取，將60 ml水加入進來，進行15分鐘的超聲波提取。用水稀釋，使其達到100 ml，利用濾膜進行過濾，取上清液，測定之前，需要用水進行稀釋。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

在10～250 mmol/L濃度范圍內，采取一系列方法改變氫氧化鈉的濃度，并且分析樣品測定結果受到本改變的影響程度，結果發現，在流動相方面，選取了250 mmol/L NaOH，可以有效分離鹽酸氨基葡萄糖和樣品中的雜峰，并且不需要再生和活化色譜柱，這樣分析時間就得到了較大程度的縮短。另外，通過調查研究發現，保健食品中的鹽酸氨基葡萄糖，有著較高的濃度，安培檢測器測定的靈敏程度較高，需要高倍稀釋過樣品之后，方可以進行測定，可以將干擾因素給有效的消除掉。在20℃～40℃的范圍內，分析了柱溫對分離的影響情況，結果顯示，鹽酸氨基葡萄糖的測定，不會在較大程度上受到柱溫的影響。

2.2 干擾實驗

在干擾實驗中選取了常見糖類和常見氨基酸，糖類包括黑糖、木糖、阿拉伯糖和乳糖等。在上文所述的色譜條件下，將一定量的干擾物質加入到2.0 mg/L鹽酸氨基葡萄糖標準溶液中，不干擾測定定義為加干擾物的標準溶液和標準溶液兩者的峰面積相對誤差，在10%以內。經過實驗分析，在此波形下，氨基酸沒有響應。可以有效分離掉鹽酸氨基葡萄糖和實驗用到的部分糖類[2]。上文已經提到，保健食品中含有較高含量的鹽酸氨基葡萄糖，在30%左右，經過樣品高倍稀釋過阿拉伯糖和鼠李糖之后，就不需要考慮它的干擾。

2.3 檢出限、線性范圍及精密度

對質量濃度分別為0.05 g/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、3.00 mg/L的鹽酸氨基葡萄糖標準溶液進行配置，在測定的時候，嚴格依據相關條件來進行，發現有較好的線性關系存在于這些濃度范圍內的氨基葡萄糖中，那么就可以將它的線性回歸方程給得出來：Y＝6.82X＋0.82（r＝0.999），其中峰面積和質量濃度分別用Y和X來表示，質量濃度的單位為mg/L；以三倍基線噪聲對應的質量濃度計算方法的檢出限為0.012 mg/L。在相應條件下，對同一標準溶液進行了連續測定，控制測定次數為八次，其中，0.69%、0.68%分別為峰面積和保留時間的相對標準偏差，測定了八份同一保健食品樣品，測定結果只有較小的相對標準偏差。

2.4 加標回收率

在測定本底值方面，首先取12份平行樣品，之后從中選出三份，然后將剩余九份加入到鹽酸氨基葡萄糖標準溶液中，依據上文所述的方法，對鹽酸氨基葡萄糖含量進行測定，平均加標回收率在96.5%～105.5%之間。

2.5 方法的對照試驗

在同一保健食品中的鹽酸氨基葡萄糖測定過程中，分別采用了本種方法和國家標準方法，結果顯示相對偏差在10%以內。

3 結論

本文依據相關理論，對保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高校陰離子色譜測定方法進行了構建，利用本方法來對保健食品中鹽酸氨基葡萄糖進行測定，效果較好，加標回收率較高，可達到96.5%～105.5%，相較于國家標準方法的測定結果，相對偏差較小[3]，說明本方法在靈敏度和精密度方面較高，符合相關要求，可以有效分析保健食品中的總鹽酸氨基葡萄糖。

[1]沈國，徐建忠，唐旭. 高效離子色譜法測定氨基葡萄糖類化合物[J]. 中國衛生檢驗雜志，2010，2（3）：123-125.

[2]吳燕，米亞嫻. 離子色譜法及其在藥物分析中的應用[J]. 天津藥學，2011，2（4）：132-135.

[3]吳學軍，金鵬飛，胡欣. 鹽酸氨基葡萄糖片高效液相色譜測定方法的改進[J].中國藥業，2012，2（1）：144-146.

TS207.3

B

1674-9308（2014）05-0093-02

10.3969/J.ISSN.1674-9308.2014.05.059