高危型HPV-DNA檢測聯(lián)合薄層液基細胞學(xué)對宮頸癌篩查研究

劉珂，鄒志寧，鄧瓊瓊

(武寧縣中醫(yī)院檢驗科，江西武寧332300)

·檢驗與臨床·

高危型HPV-DNA檢測聯(lián)合薄層液基細胞學(xué)對宮頸癌篩查研究

劉珂，鄒志寧，鄧瓊瓊

(武寧縣中醫(yī)院檢驗科，江西武寧332300)

目的評價高危型HPV-DNA檢測聯(lián)合薄層液基細胞學(xué)檢查(TCT)對宮頸癌及癌前病變篩查的效果。方法對婦產(chǎn)科門診的1380例病人分別進行薄層液基細胞學(xué)檢查、高危型人乳頭狀瘤病毒DNA檢測，以病理組織學(xué)診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果高危型HPV-DNA陽性率26.74%，病理學(xué)檢查CINⅡ及其以上病人為51例，以組織病理學(xué)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),CINⅡ及以上為陽性，薄層液基細胞學(xué)、高危HPV-DNA和高危HPV-DNA聯(lián)合薄層液基細胞學(xué)檢查方法的敏感度分別為82.35%、86.27%、96.07%，特異度分別為86.38%、83.52%、80.36%，正確診斷指數(shù)分別為68.73%、69.79%、76.43%。結(jié)論高危型HPVDNA檢測聯(lián)合薄層液基細胞學(xué)檢查在宮頸癌前病變的篩查中有很高的敏感度和正確診斷指數(shù)。

人乳頭狀瘤病毒；薄層液基細胞學(xué)；宮頸癌

DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.048

宮頸癌是目前常見危害女性健康的惡性腫瘤之一,由于宮頸癌有著一個較長的、可逆轉(zhuǎn)的癌前病變期，人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染所致宮頸癌已被公認(rèn)是一個感染性癌[1]，早期患者的治愈率高達90%，因此，對宮頸癌的研究一直受到人們的關(guān)注[2]。薄層液基細胞學(xué)檢查(Thinprep cytologic test, TCT)是目前應(yīng)用最廣泛的篩查技術(shù)，具有較高的細胞學(xué)診斷準(zhǔn)確性和敏感性。目前流行病學(xué)和生物學(xué)資料已經(jīng)證明高危型HPV-DNA感染是宮頸癌及癌前病變的主要原因。本研究通過TCT,高危型HPV-DNA及TCT聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測三種方法篩查宮頸病變患者，探索最佳篩查宮頸癌及癌前病變的方法。

1 材料與方法

1.1 選擇對象2011年1月-2012年12月,在我院婦產(chǎn)科就診具有白帶異常、性接觸性出血、陰道出血婦女1380例,年齡27～69歲,平均39.7歲。分別進行TCT檢查、高危型HPV-DNA檢測或以上兩種方法聯(lián)合檢查和通過陰道鏡取活檢,以組織學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 實驗方法

1.2.1 TCT檢測用專用的宮頸細胞采樣刷,刷取宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)細胞,保存于專用保存液中。細胞學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)采用TBS(The Bethesda System)分類法，即∶陰性和異常上皮細胞。異常上皮細胞包括異常鱗狀上皮細胞和異常腺上皮細胞。異常鱗狀上皮細胞分為意義不明確的不典型鱗狀細胞(ASCUS),低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSL),高度鱗狀上皮內(nèi)病變( HSL),鱗狀上皮細胞癌(SCC)。異常腺上皮細胞指不典型腺細胞(ACC)和腺癌(GC)，細胞學(xué)檢查陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)為LSL及以上的病變。

1.2.2 高危型HPV-DNA檢測根據(jù)美國Digene公司研制的HPV-DNA HC-2方法(Hybrid Cupture,HC-2),按照操作規(guī)定,對標(biāo)本進行目前已知的13種致癌型HPV-DNA(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型)的檢測,根據(jù)其診斷標(biāo)準(zhǔn),HPV-DNA≥1.0ng/L為陽性。

1.2.3 陰道鏡下病理組織學(xué)檢查方法使用深圳金科威公司的SLC-2000型電子陰道鏡進行檢查操作,對可疑病灶進行鏡下定位活檢,對鏡下未發(fā)現(xiàn)明顯病灶，則取3、6、9、12點進行活檢。所有病理標(biāo)本由兩名專門的病理醫(yī)師進行閱片,作出最后的診斷。診斷分為：正常或炎癥,宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(CIN),按輕、中、重分為CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ或原位癌(CIS)、鱗癌,、腺癌。為統(tǒng)一細胞學(xué)與組織學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)TBS標(biāo)準(zhǔn)LSL即CINⅠ，HSL包括CINⅡ和CINⅢ。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 16.0錄入數(shù)據(jù)，并進行分析。

2 結(jié)果

2.1 宮頸細胞學(xué)TCT檢查結(jié)果ASCUS患者171例(12.39%，171/1380)，LSIL患者96例(6.96%，96/1380),HSIL患者36例(2.60%，36/1380)，SCC患者4例(0.29%，4/1380)。

2.2 高危HPV檢查結(jié)果本次檢查的婦女中高危型HPV-DNA檢測陽性共369例，陽性率為26.74%，經(jīng)病理確診的宮頸病變HPV陽性率分別為CINⅡ83.33%(15/18)、CINⅢ或原位癌90%(18/ 20)、鱗癌84.61%(11/13)。

2.3 病理學(xué)檢查結(jié)果該人群宮頸高危鱗狀上皮瘤變及癌(CINⅡ及以上)現(xiàn)患率為3.7%(51/1380)，檢查結(jié)果為CINⅡ18例，CINⅢ或原位癌20例，鱗癌13例。

2.4 三種篩查方法的綜合比較以組織病理學(xué)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，CINⅡ及以上為陽性，計算TCT、高危HPV-DNA和高危HPV-DNA聯(lián)合TCT檢查方法的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值和正確診斷指數(shù)。見表1。

表1 宮頸癌各篩查方法的診斷效果評價

3 討論

目前的流行病學(xué)調(diào)查研究與分子生物學(xué)都證明,高危型HPV感染是宮頸癌發(fā)病的主要因素。本次研究發(fā)現(xiàn)，高危型HPV-DNA陽性率為26.74%，與沈艷紅[3]在我國山西省進行的宮頸癌調(diào)查的結(jié)果接近,可能與婦科門診病人中的高危人群比較集中有關(guān)。單獨以高危型HPV-DNA檢測進行篩查CINⅡ及其以上的病變的敏感度達86.27%，與Wright[4]報告敏感度84%和Schiffman[5]報告的敏感度88%相近，比巴氏涂片的敏感度高25%～30%[6]。國外有研究發(fā)現(xiàn),CIN的自然轉(zhuǎn)歸,無HPV感染患者CIN逆轉(zhuǎn)的發(fā)生是HPV持續(xù)感染的4倍。因此,及時預(yù)測CIN的轉(zhuǎn)歸,高危型HPV-DNA檢測對篩查CINⅡ、CINⅢ和早期宮頸癌的敏感度很高,HC-Ⅱ檢測對于臨床正確處理CIN,無疑是至關(guān)重要的[7]。從宮頸癌前病變發(fā)展成宮頸癌,是一個較長時間的過程,大約10年左右。級別越高,發(fā)展成癌的可能性越大,級別越低,自然消退的可能性越大。大部分的CINⅠ不治療也能自然消退。故本研究以CINⅡ及其以上病變?yōu)殛栃詸z出率。

本研究單獨以細胞學(xué)TCT檢查宮頸病變患者，并以病理學(xué)檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)敏感度為82.35%，陰性預(yù)測值為99.22%。TCT是1996年由美國食品和藥品管理局批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床診斷宮頸疾病的方法，它采用固定樣式的掃帚式刷子按規(guī)定手法進行操作,旋轉(zhuǎn)式刷拭,不留死角,刷頭全部進入細胞保存液，不會丟失標(biāo)本。經(jīng)混合后制成的涂片均勻一致,使細胞具有代表性，因此靈敏度較高。另外此項技術(shù)還具有可重復(fù)性的優(yōu)點。其不足之處在于檢測者之間存在主觀差異。

本次研究發(fā)現(xiàn)TCT聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測敏感度為96.07%，正確診斷指數(shù)為76.43，比單獨TCT檢測和HPV-DNA檢測的靈敏度和正確診斷指數(shù)都高出不少，反映這兩個檢測方法結(jié)合可互相彌補缺點和不足，最大程度發(fā)現(xiàn)陽性病人，減少漏診率。TCT制作的單層細胞片可一次取樣多次重復(fù)制片，并可供HPV檢測，不需另外采樣，不增加病人的麻煩。早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌可以及時采取干預(yù)措施，提高患者的生存率。因此TCT聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測是最佳的篩查宮頸癌的方法。

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R446.19，R446.62，R737.33

A

∶1674-1129(2014)06-0767-02

2014-04-29；

2014-08-07)