養殖暹羅鱷肉肌原纖維蛋白的理化性質

肖 琨，王錫昌

（上海海洋大學食品學院，上海 201306）

養殖暹羅鱷肉肌原纖維蛋白的理化性質

肖 琨，王錫昌*

（上海海洋大學食品學院，上海 201306）

篩選養殖暹羅鱷肌原纖維蛋白含量最高部位，提取并分析離子強度、pH值和溫度對肌原纖維蛋白溶液的溶解性、乳化性和熱誘導凝膠特性的影響。結果表明：暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白所占比例最高（（7.95±0.12） g/100 g，以濕質量計），暹羅鱷尾肉中肌原纖維蛋白主要為肌球蛋白重鏈、副肌球蛋白、肌動蛋白和原肌球蛋白。在低離子強度條件下，肌原纖維蛋白的溶解度和乳化性較低，但有良好的凝膠特性，隨著離子強度的升高，肌原纖維蛋白的溶解度和乳化性升高，凝膠特性則呈現下降趨勢。隨著pH值升高，肌原纖維蛋白溶解度呈現先迅速下降后升高的趨勢，乳化性和凝膠特性則呈現持續緩慢下降的趨勢，其中溶解度和保水性在pH 5.5達到最低點。隨著熱變溫度升高，其凝膠特性顯著增加，保水性先下降后略有升高，在低溫（40 ℃）下有較好的保水性，在80 ℃保水性升高至又一峰值隨后下降。結論：肌原纖維蛋白在NaCl濃度0.2 mol/L進行調配，并在80 ℃條件下加熱處理，暹羅鱷肉類產品將具有較好的質構特性及保水性。

養殖暹羅鱷；肌原纖維蛋白；溶解性；乳化性；凝膠特性

暹羅鱷是鱷魚皮革制品的主要原材料來源，尤以其繁殖能力強，飼養成本低、見效快、經濟效益顯著等優點受到廣泛關注。我國自1993年開始引進并養殖暹羅鱷（Crocodylus siamensis），并于2005年被我國國家林業局列入首批可商業經營利用的野生動物名錄[1]，政策上的鼓勵有力促進了暹羅鱷養殖業的發展。但在大量養殖暹羅鱷的同時也造成了一定程度上生物資源的浪費，鱷魚經剝皮后的部分仍可食用。目前，已有學者[2-3]對暹羅鱷的營養品質、食用品質進行研究，并初步探索制作暹羅鱷肉產品[4]，表明暹羅鱷可食部分仍是可利用率很高的生物資源，暹羅鱷肉產品開發市場前景廣闊。在研究其營養與食用品質的基礎上，對于肌肉蛋白質的功能性質了解成為產品開發的首要步驟。

肌肉蛋白質主要成分是肌原纖維蛋白，占蛋白質含量的50%～60%。肌原纖維蛋白對于肉制品的品質和特性具有非常重要的影響，其功能性質如溶解性、乳化性、凝膠特性、保水性和分散性等對肉制品加工質量影響很大[5]。肌原纖維蛋白凝膠，在溶液界面是肌原纖維蛋白的性質改變，直接影響蛋白的感官性質（肉制品的彈性、多汁性、口感等）[6]。食品蛋白質功能性質的影響因素有很多，內在因素如蛋白質組成、單體或多聚體等；加熱條件如加熱、酸化、干燥等；以及最為普遍的外在因素，如溫度、pH值、鹽及表面活性劑等[7]。

本實驗對養殖暹羅鱷可食部位肌肉的一般營養成分及蛋白質組分進行研究，隨后提取含量最高部位的肌原纖維蛋白，采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分析其組成。進一步探討NaCl濃度、pH值對肌原纖維蛋白溶解性、乳化性和熱誘導凝膠特性（硬度、黏性、咀嚼性、保水性）的影響，以及熱變溫度對熱誘導凝膠特性的影響，為暹羅鱷肉類產品開發提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.5 歲齡養殖暹羅鱷，平均體質量（18.65±1.06）kg，采自江蘇省昆山市正鑫鱷魚開發有限公司，去皮、骨后保存于－20 ℃冰箱中待測。

牛血清白蛋白（生物試劑） 國藥集團化學試劑有限公司；SDS-PAGE相關試劑（生物試劑） 生工生物工程（上海）股份有限公司；催化片（分析純） 丹麥福斯公司；大豆油（食品級） 益海嘉里食品營銷有限公司；其余化學試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

8400凱氏定氮儀、2050索氏抽提系統 丹麥福斯公司；Avanti J-26XP冷凍離心機 美國貝克曼庫爾特有限公司；TA. XT. Plus質構儀 英國Stable Micro System公司；UV2300分光光度計 上海天美科學儀器有限公司；T10 basic高速分散機 德國IKA公司；FE20K pH計美國梅特勒-托利多公司。

1.3 方法

1.3.1 一般營養成分測定[8]

水分含量測定采用GB/T 5009.3—2010《食品中水分的測定》，粗蛋白含量測定采用GB/T 5009.5—2010《食品中蛋白質的測定》，粗脂肪含量測定采用GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測定》，灰分含量測定采用GB/T 5009.4—2010《食品中灰分的測定》。

1.3.2 蛋白質組分分析

參考Asghar[9]、張丹[10]等對蛋白質組分的分離方法。

1.3.3 肌原纖維蛋白的提取

肌原纖維蛋白的提取參考文獻[11-12]的方法，略有改動。稱取5 g解凍的均質肌肉于離心管中，加入4 倍體積的標準鹽溶液（20 mmol/L磷酸鹽緩沖液、0.1 mol/L KCl、2 mmol/L MgCl2、1 mmol/L NaN3、1 mmol/L乙二醇雙四乙酸（ethylene glycol tetraacetic acid，EGTA），pH 7.0），高速分散器均質2 min（勻漿3 s，間隔30 s），隨后在4 ℃下10 000 r/min離心10 min棄去上清液，收集沉淀，重復3～4 次后再向沉淀中加入4 倍體積0.1 mol/L NaCl，高速分散器均質30 s，用單層100 目紗布過濾，4 ℃下10 000 r/min離心，該純化步驟重復2～3 次得到肌原纖維蛋白。

1.3.4 肌原纖維蛋白的SDS-PAGE

參考Laemmli[13]的方法對提取得到的肌原纖維蛋白進行SDS-PAGE分析。分離膠質量分數10%，濃縮膠質量分數5%，電泳緩沖液為0.05 mol/L Tris、0.384 mol/L甘氨酸、質量分數0.1% SDS（pH 8.3）的混合溶液。電泳膠的厚度為1 mm，進樣量為15 μL，進樣質量濃度為1 mg/mL，電泳開始時調節電壓為80 V，當樣品進入分離膠后將電壓調節為120 V。

1.3.5 蛋白質濃度測定

采用雙縮脲法，用牛血清白蛋白作為標準蛋白。

1.3.6 肌原纖維蛋白溶解性的測定

[14]的方法，略加改進。向一定量肌原纖維蛋白質加入不同pH值（4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0），不同NaCl濃度（0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mol/L）的鹽溶液，配制成0.2 mg/100 mL的蛋白質溶液，均質機均質 1 min，10 000 r/min離心10 min。在改變某個因素條件時，其他因素條件保持不變。采用雙縮脲法測定上清液中蛋白含量及樣品中總蛋白含量。溶解度按公式（1）計算。

1.3.7 肌原纖維蛋白乳化性的測定

參考文獻[15]方法，略加改進。蛋白質溶液配制方法同1.3.6節，取15 mL加入大豆油5 mL高速均質器勻漿1 min制成乳狀液，從容器底部吸取50 μL的乳化液加入5 mL的體積分數0.1%的SDS溶液，在500 nm波長處測定吸光度A0，將乳狀液靜置10 min后測吸光度，記為A10，以SDS溶液為對照。按照公式（2）、（3）計算乳化活性指數（emulsifying activity index，EAI）和乳化穩定性（emulsion stability index，ESI）。

式中：2.303為換算系數；ρ為乳化液形成前水溶液中水解物的蛋白質質量濃度/（g/mL）；φ為乳化液中油的體積分數，此處為25%；L為光路長度/cm。

1.3.8 肌原纖維蛋白熱誘導凝膠制備

參考文獻[5]將蛋白質量濃度調整到40 mg/mL，置于10 mL燒杯中，于水浴中以1 ℃/min從25 ℃升至40、50、60、70、80、90 ℃，并在到達終點溫度時于該溫度下恒溫20 min，隨后將燒杯取出，4 ℃下過夜（12 h）測定凝膠相關指標。

1.3.9 肌原纖維蛋白熱誘導凝膠質構特性的測定

TA. XT. Plus型質構分析儀探頭選取P 0.5，參數設置為穿刺前探頭運行速率1.0 mm/s，穿刺時運行速率1.0 mm/s，返回速率1.00 mm/s，壓縮距離4.0 mm，觸發類型：auto，停留時間5 s，觸發力1.0 g，數據搜取速率200 pps。

1.3.10 肌原纖維蛋白熱誘導凝膠保水性的測定

參考Kocher等[16]的方法，將制備好的凝膠在4 ℃條件下，經10 000 r/min離心10 min，去除離心分離的液體，記錄空離心管質量m、離心前離心管與凝膠總質量m1及離心去除水后離心管與凝膠總質量m2。平行3 次，按公式（4）計算保水性。

1.4 數據處理

實驗數據采用SPSS 20.0及Microsoft Excel 2007進行數據處理與檢驗分析，以±s表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 養殖暹羅鱷不同部位一般營養成分

表1 養殖暹羅鱷各部位一般營養成分Table1 General nutritional composition of cultured Crocodylus siamensis muscle

由表1可知，養殖暹羅鱷3 個部位肌肉中的粗蛋白及粗脂肪含量均存在顯著差異（P＜0.05），其中尾肉的粗蛋白含量最高，達91.26%，其次是體肉（89.69%）和腿肉（88.42%）。三者粗蛋白含量均遠高于同屬鱷形目的揚子鱷肌肉和暹羅鱷肌肉，除腿肉中粗蛋白含量略低于青魚（88.91%），養殖暹羅鱷主要部位肌肉中粗蛋白含量均高于其他魚肉及家畜禽肉，并與同屬于爬行綱的中華鱉腿肉中粗蛋白（89.66%）含量相近。雞蛋蛋白質的生物價值極高，而養殖暹羅鱷尾肉粗蛋白含量是雞蛋蛋白質含量（48.01%，以干質量計）[17]的1.9 倍。養殖暹羅鱷各部位肌肉的粗脂肪含量普遍較低，為3.43%～5.46%，蛋白質與粗脂肪比值為16.43～25.78，是高蛋白低脂肪的良好肉質。

2.2 養殖暹羅鱷不同部位蛋白質組分分析

表2 養殖暹羅鱷不同部位肌肉中蛋白質及非蛋白氮的含量Table2 Protein and non-protein nitrogen contents in different parts of cultured Crocodylus siamensis muscle

肌肉中蛋白質按其溶解性可分為水溶性蛋白質（如肌漿蛋白）、鹽溶性蛋白質（如肌原纖維蛋白）和不溶性蛋白質（如基質蛋白）。由表2可知，各部位蛋白質組分基本呈現規律為：肌原纖維蛋白＞肌漿蛋白＞基質蛋白＞非蛋白氮。尾肉中除總基質蛋白含量低于其余部位外，肌原纖維蛋白、肌漿蛋白以及非蛋白氮含量均為最高。

水溶性氮化物包括肌漿蛋白與非蛋白氮，含有大量游離氨基酸、核苷酸等水溶性滋味物質[20]。暹羅鱷3 個主要部位的肌漿蛋白占總蛋白的30%左右，尤其尾肉肌漿蛋白達到31.84%，由此推斷鱷魚肉的滋味豐富，口感獨特。暹羅鱷不同部位肌肉中的肌原纖維蛋白含量均為最高，而肌原纖維蛋白是肉類形成彈性凝膠體的主要作用成分，與肉制品的保水性、黏彈性、質地等密切相關。尾肉中肌原纖維蛋白含量顯著高于其余部位，因此確定為肌原纖維蛋白功能性質的研究對象。

2.3 養殖暹羅鱷尾肉肌原纖維蛋白SDS-PAGE電泳

由圖1可知，養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白主要由分子質量為220 kD的肌球蛋白重鏈、分子質量為100 kD的副肌球蛋白、分子質量為43 kD的肌動蛋白、分子質量為36 kD的肌鈣蛋白、分子質量為35 kD的原肌球蛋白以及一些低分子質量的蛋白，推測為分子質量為23.5 kD的肌球蛋白輕鏈1及16.8 kD的肌球蛋白輕鏈2[21]。這一結果與Marino等[22]研究的結果相一致。電泳圖譜中雜帶較少，說明提取純度相對較高，本實驗方法提取的肌原纖維蛋白可以用于后續實驗研究。

圖1 養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白SDS-PAGE圖譜Fig.1 SDS-PAGE patterns of myofibrillar proteins in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

2.4 養殖暹羅鱷尾肉肌原纖維蛋白功能特性

2.4.1 NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白溶解性及乳化性的影響

表3 NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白功能性的影響Table3 Effect of NaCl concentration on functional properties of myofibrillar proteins in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

由表3可知，肌原纖維蛋白在低離子強度溶液中溶解度較小，隨著鹽濃度的增大，其溶解度顯著提高，當NaCl濃度達到1.0 mol/L之后，蛋白溶解度的變化趨于平緩。EAI隨NaCl濃度的升高而逐漸增大，當濃度達到0.6 mol/L后，EAI增加不顯著。ESI在NaCl濃度為0.8 mol/L時達到最高值，其余濃度下無顯著性差異。

鹽離子與肌原纖維蛋白帶相反電荷的基團作用形成雙電層，減少了蛋白質分子間的靜電作用，增強了蛋白質分子與水分子的作用，從而使得肌原纖維蛋白更好地分散在溶液中，溶解性增大[23]。隨著鹽濃度增加，蛋白質得以發揮表面活性作用，同時高速攪拌使蛋白質分子與脂肪分子充分結合，更易交聯成聚集態[24]，因此EAI呈增高趨勢。在鹽濃度較低時，肌原纖維蛋白溶解度過低，溶液中蛋白質分子相對較少不足以包裹脂肪顆粒，從而導致乳化液靜置分層，ESI相對較低。增加鹽濃度后，更多的蛋白質分子參與形成蛋白膜來包裹脂肪，阻止脂肪顆粒聚集分層，穩定乳化液，并在0.8 mol/L時達到最高值，隨濃度升至1.0 mol/L，鹽析作用又使得乳化液穩定性變差[25]。

2.4.2 pH值對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白溶解性及乳化性的影響

表4 pH值對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白功能性的影響Table4 Effect of pH on functional properties of myofibrillar proteins in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

由表4可知，在NaCl濃度為0.6 mol/L時，pH 4.5～5.5范圍內，肌原纖維蛋白溶解度隨pH值增加顯著下降（P＜0.05），pH 5.5～7.0，肌原纖維蛋白溶解度呈現迅速升高的趨勢。肌原纖維蛋白的EAI在等電點pH 5.5之前，隨pH值升高整體呈下降趨勢，在等電點pH 5.5處降到最低值，隨后又有所增加，與劉紅彥[26]研究結論相一致。pH值對ESI的影響不顯著（P＞0.05）。

肌原纖維蛋白的溶解度在pH 5.5處達到最低值，說明該點接近肌原纖維蛋白等電點，與文獻報道一致[6,23]。此時蛋白質分子以兩性離子形式存在，所帶的凈電荷最少，蛋白質分子之間作用力減弱，其顆粒更易凝聚而產生沉淀，因此溶解度最小，此時吸附在油水界面蛋白質分子也最少，導致乳化活性指數最低。遠離等電點后，蛋白質分子因電荷的靜電斥力增加而分散開，表現為溶解度增大[26]，蛋白質表面張力降低，疏水性基團暴露在外，在吸附脂肪粒的過程中，蛋白質骨架上的疏水殘基移動并定向到油滴表面會發生構象重排[27]，從而有利于體系乳化的進行，表現為乳化性升高。

2.4.3 凝膠性

熱誘導凝膠性是食品蛋白質的一個最重要功能特性，一定濃度的蛋白質分子加熱時會因變性而解折疊發生聚集然后形成凝膠[28]。

2.4.3.1 NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白凝膠特性的影響

圖2 NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠硬度、黏性和咀嚼性的影響Fig.2 Effect of NaCl concentration on the hardness, gumminess and chewiness of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

圖3 NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠保水性的影響Fig.3 Effect of NaCl concentration on the WHC of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

由圖2可知，NaCl濃度對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠硬度、黏性、咀嚼度3 項指標的影響趨勢相同，均隨著NaCl濃度的升高呈現先上升后降低趨勢，在0.2 mol/L處達到高值，并在0.8 mol/L后變化不再顯著。由圖3可知，在NaCl濃度為0.1～0.8 mol/L范圍內，養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠保水性隨NaCl濃度升高而降低，在處0.8 mol/L處保水性為最低（84.28%），隨后顯著升高，但比在0.1 mol/L時最高保水性降低了4.77%。

鹽對肌原纖維蛋白凝膠的影響機理尚有爭議。有研究[29]發現隨著鹽濃度增高，肌原纖維蛋白凝膠的硬度呈現先升高后下降的趨勢，但周逸等[30]研究發現魷魚肌原纖維蛋白在低離子濃度下凝膠的硬度較高，隨離子強度增強，凝膠特性有所下降。于巍等[31]發現低鹽濃度下魚肉的肌原纖維呈緊密的網絡結構，而高鹽濃度下形成較為粗糙的凝膠，較強的剛性使得低鹽濃度下的肌原纖維蛋白熱誘導凝膠的硬度和咀嚼性更高。研究表明[32]低鹽濃度下肌球蛋白分子細絲狀的形式使得體系具有較強黏性，增強離子強度使肌球蛋白分子以單體的形式存在，導致黏度下降。至于鹽對凝膠保水性的影響可如下解釋：NaCl能增加鹽溶蛋白之間的靜電斥力，使蛋白質結構松弛，從而提高鹽溶蛋白凝膠的保水性，但隨添加量增加凝膠脫水而保水性降低[33]。

2.4.3.2 pH值對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白凝膠特性的影響

圖4 pH值對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠硬度、黏性和咀嚼性的影響Fig.4 Effect of pH on the hardness, gumminess and chewiness of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

圖5 pH值對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠保水性的影響Fig.5 Effect of pH on the WHC of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

由圖4可知，隨著pH值的增高，肌原纖維蛋白熱誘導凝膠的硬度、黏性和咀嚼性呈現逐漸下降的趨勢。硬度在溶液pH 6.0～6.5時差異不顯著，在pH 7.0處達到最低值。黏性和咀嚼性在溶液接近中性（pH 6.0～7.0）時沒有顯著性差異。由圖5可知，隨pH值升高凝膠的保水性呈現先下降后升高的趨勢，在等電點pH 5.5處保水性最低（85.40%），與pH 4.5處最高值相比降低了2.75%。pH 6.0～7.0的偏中性環境，凝膠的保水性無顯著性差異，因此在暹羅鱷產品加工過程中無需調節pH值，中性條件即可達到相對較高的保水性。

pH值對凝膠特性的影響表現在對蛋白所帶電荷的影響，進而改變蛋白質構型和電荷分布。研究發現[34]，溶液pH值在等電點附近（pH 5.5左右），肌球蛋白帶電荷最少，形成粗絲狀的不均勻網絡，使凝膠相對較強的硬度和咀嚼性，這樣的結構也不利于凝膠的保水性。而在pH值遠離等電點的條件下，蛋白質的凈負電荷增加，凝膠內部由于多聚體間的引力使蛋白聚集，形成致密緊湊的網絡結構，從而提高凝膠硬度與咀嚼性，并利于束縛水分子，提高凝膠保水性[35]，但致密的網絡結構相較粗絲狀結構會使得凝膠一定程度上喪失黏性。本實驗還發現凝膠的硬度在pH值接近中性時并未如他人研究[30]一樣呈升高趨勢，推測是物種差異導致這一差異，今后可進一步研究暹羅鱷肌肉中影響凝膠在中性條件下質構特性的內部因素。

2.4.3.3 溫度對養殖暹羅鱷尾部肌肉肌原纖維蛋白凝膠特性的影響

圖6 溫度對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠硬度、黏性和咀嚼性的影響Fig.6 Effect of heating temperature on the hardness, gumminess and chewiness of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

圖7 溫度對養殖暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白熱誘導凝膠保水性的影響Fig.7 Effect of heating temperature on the WHC of myofibrillar protein gel in tail muscle from cultured Crocodylus siamensis

研究表明[36]線性升溫制備的熱誘導凝膠質構要優于非線性升溫及恒溫加熱，并且升溫速率保持在0.2～1 ℃/min范圍內時，形成的凝膠硬度無顯著性差異并優于快速升溫。因此本實驗選擇1 ℃/min的升溫速率。由圖6可知，在40～90 ℃范圍內，肌原纖維蛋白凝膠硬度、黏性和咀嚼性均隨著溫度的升高而上升，在40 ℃時為最低值，90 ℃時達到最高值。凝膠硬度在60～70 ℃時變化不顯著，其余各溫度的硬度均有顯著性差異，而凝膠的咀嚼性和黏性均在50 ℃和70 ℃時不存在顯著性差異。由圖7可知，凝膠保水性在40 ℃時出現最高值（94.52%），隨熱變溫度升高而顯著下降（P＜0.05），于60 ℃時到達最低值82.39%，隨后又顯著上升，在80 ℃升高至87.32%，隨后在90 ℃時又略有下降。

加熱可直接影響肌原纖維蛋白形成熱誘導凝膠，蛋白質在室溫（25 ℃）下基本不發生變化，隨著熱變溫度升高，蛋白質分子從天然狀態經由各級結構變化到變性狀態，變性的程度決定了蛋白質最終的質構特性。溫度升到一定程度，肌球蛋白形成復雜的網絡結構，肌原纖維蛋白變性逐步完成，形成凝膠，如果溫度繼續升高會使蛋白質重鏈降解，已形成的蛋白網絡結構會遭到破壞[37]，這一溫度集中在70～80 ℃[38-39]。本研究中暹羅鱷尾部肌原纖維蛋白凝膠在80～90 ℃下的硬度等質構特性仍在升高，說明暹羅鱷肌原纖維蛋白熱誘導凝膠仍未完全形成。由于肌原纖維蛋白溶于高離子強度溶液中，而其在40 ℃的低溫下尚未形成凝膠，因此有較好的保水性；隨著溫度升高，形成的凝膠呈現較為粗糙、多孔的網絡結構，保水性隨之下降；溫度進一步升高，凝膠會通過一些作用力更有規律的排列，逐步形成規則的三維網絡結構，更易束縛水，因此溫度高于60 ℃后，凝膠的保水性又呈現上升趨勢。但當溫度升至80 ℃蛋白質的三維網絡結構破壞將導致保水性無變化甚至下降。

3 結 論

養殖暹羅鱷尾部肌肉的粗蛋白含量顯著高于其余部位，并高于其他魚肉及家畜禽肉，同時粗脂肪含量較少，是高蛋白低脂肪的優良肉類，其蛋白組成中的肌原纖維蛋白含量也顯著高于其余部位，綜合分析是養殖暹羅鱷提取肌原纖維蛋白的最佳原料。

功能性研究中發現，離子強度、pH值和熱變溫度對養殖暹羅鱷肌原纖維蛋白的功能特性有極顯著影響。隨著NaCl濃度增大，其溶解性增強；蛋白質等點pH值為5.5，該點溶解性最弱。肌原纖維蛋白的乳化性與溶解性密切相關，乳化性隨離子強度增加而增強，在等電點處出現最低值。

低鹽濃度時肌原纖維蛋白具有良好的質構特性和保水性，隨NaCl濃度升高其質構特性變差，卻有較好的保水性。pH值在等電點處凝膠質構特性一般，保水性較差。熱變終點溫度對養殖暹羅鱷肌原纖維蛋白凝膠特性產生尤為顯著的影響，質構特性隨溫度升高呈現逐步上升趨勢，保水性在60 ℃出現最低值后又顯著上升，直到高溫導致凝膠結構破壞。

鹽可增加肌原纖維蛋白的溶解性及凝膠特性，但考慮口感需控制添加量，同時pH值的調節并不適用于食品的生產加工，還會增加成本。因此綜合本實驗研究結果，在暹羅鱷肉類產品開發研制過程中，選取NaCl濃度0.2 mol/L進行調配，并在80 ℃下進行烹飪，可得到較好的質構特性及保水性。為落實養殖暹羅鱷尾肉產品良好特性時鹽的加量、pH值及溫度的確定值，有關復配添加劑及加熱條件對其產品特性的影響，還有待更深入的研究。

參考文獻：

[1] 唐樑, 秦明珠. 鱷魚的藥用研究和開發前景[J]. 中外健康文摘: 醫藥月刊, 2007, 4(10): 66-68.

[2] 肖琨, 王錫昌. 養殖鱷魚的營養價值和藥用功能研究進展[J]. 食品工業科技, 2014, 35(11): 355-358.

[3] 闕婷婷, 謝妍, 鄭家聞, 等. 暹羅鱷肌肉營養及腥味成分分析[J]. 浙江大學學報: 農業與生命科學版, 2013, 39(2): 122-132.

[4] 謝妍. 暹羅鱷肌肉營養評價及其肌原纖維蛋白凝膠特性的研究[D].杭州: 浙江大學, 2013: 48-69.

[5] 陳文博. 肌原纖維蛋白熱誘導凝膠形成機制研究[D]. 南京: 南京農業大學, 2010: 3.

[6] 李明清. 鯉魚肌原纖維蛋白功能特性的研究[D]. 哈爾濱: 東北農業大學, 2010: 4.

[7] 王璋, 許時嬰, 湯堅. 食品化學[M]. 北京: 中國輕工業出版社, 1999: 123-176.

[8] 何琳, 江敏, 戴習林, 等. 團頭魴不同生長階段肌肉營養成分分析及評價[J]. 食品科學, 2014, 35(3): 221-225.

[9] ASGHAR A, YEATES N. Systematic procedure for the fractionation of muscle protein, with particular reference to biochemical evaluation of meat quality[J]. Agricultural and Biological Chemistry (Japan), 1974, 38(10): 1851-1858.

[10] 張丹, 王錫昌. 中華鱉肉蛋白質營養特征分析及評價[J]. 食品工業科技, 2014, 35(15): 356-359.

[11] PARSONS N, KNIGHT P. Origin of variable extraction of myosin from myofibrils treated with salt and pyrophosphate[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1990, 51(1): 71-90.

[12] PARK D, XIONG Y L, ALDERTON A L. Concentration effects of hydroxyl radical oxidizing systems on biochemical properties of porcine muscle myofibrillar protein[J]. Food Chemistry, 2007, 101(3): 1239-1246.

[13] LAEMMLI U K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4[J]. Nature, 1970, 227: 680-685.

[14] NALINANON S, BENJAKUL S, KISHIMURA H, et al. Functionalities and antioxidant properties of protein hydrolysates from the muscle of ornate threadfin bream treated with pepsin from skipjack tuna[J]. Food Chemistry, 2011, 124(4): 1354-1362.

[15] CUI S W, CHANG Y H. Emulsifying and structural properties of pectin enzymatically extracted from pumpkin[J]. LWT-Food Science and Technology, 2014, 58(2): 396-403.

[16] KOCHER P, FOEGEDING E. Microcentrifuge-based method for measuring water-holding of protein gels[J]. Journal of Food Science, 1993, 58(5): 1040-1046.

[17] 唐修君, 高玉時, 葛慶聯, 等. 不同雞種雞蛋品質及營養成分比較研究[J]. 家畜生態學報, 2014, 35(1): 35-38.

[18] 汪仁平. 揚子鱷的營養成份初步分析[J]. 四川動物, 1999(2): 9-12.

[19] 朱成科, 黃輝, 向梟, 等. 泉水魚肌肉營養成分分析及營養學評價[J].食品科學, 2013, 34(11): 246-249.

[20] 丁玉庭, 何晉浙, 朱旭東, 等. 黑豚肌肉的蛋白質組成及肌原纖維蛋白質的冷藏穩定性研究[J]. 食品科學, 1999, 20(10): 12-16.

[21] 陳昌, 王鵬, 徐幸蓮. 不同質量比雞胸肉、雞腿肉混合肌原纖維蛋白的熱誘導凝膠特性[J]. 食品科學, 2012, 33(9): 58-63.

[22] MARINO R, ALBENZIO M, DELLA MALVA A, et al. Proteolytic pattern of myofibrillar protein and meat tenderness as affected by breed and aging time[J]. Meat Science, 2013, 95(2): 281-287.

[23] FENNEMA O R. Food chemistry[M]. New York: Marcel Dekkar Inc, 1996: 1055.

[24] 閆海鵬, 吳菊清, 李美琳, 等. 不同種類肉肌原纖維蛋白乳化及理化特性的研究[J]. 南京農業大學學報, 2013, 36(6): 100-104.

[25] 魏朝貴, 吳菊清, 邵俊花, 等. KCl和MgCl2部分替代NaCl對豬肉肌原纖維蛋白乳化凝膠特性的影響[J]. 食品科學, 2014, 35(5): 89-95.

[26] 劉紅彥. 鯉魚肌肉中肌原纖維蛋白的性質研究[D]. 天津: 天津商業大學, 2012: 17-18.

[27] 邵俊花, 吳菊清, 劉登勇, 等. 肌肉蛋白質乳化凝膠及保油保水性機理研究進展[J]. 食品與發酵工業, 2013, 39(4): 146-150.

[28] XU Xianglian, HAN Minyi, FEI Ying, et al. Raman spectroscopic study of heat-induced gelation of pork myofibrillar proteins and its relationship with textural characteristic[J]. Meat Science, 2011, 87(3): 159-64.

[29] 朱衛星. 豬肉肌原纖維蛋白氧化及其凝膠特性的變化研究[D]. 長沙: 湖南農業大學, 2012: 40-41.

[30] 周逸, 金淼, 徐亦及, 等. 秘魯魷魚肌原纖維蛋白提取和加熱條件對其凝膠特性的影響[J]. 食品科學, 2013, 34(14): 126-130.

[31] 于巍, 周堅. 魚類肌原纖維蛋白熱凝及流變特性研究進展[J]. 食品科技, 2007, 32(11): 14-16.

[32] BORDERIAS A, JIMéNEZ-COLMENERO F, TEJADA M. Viscosity and emulsifying ability of fish and chicken muscle protein[J]. International Journal of Food Scie nce & Technology, 1985, 20(1): 31-42.

[33] 徐大倫, 顏偉華, 楊文鴿, 等. 響應面法優化雙髻鯊(Sphyrna z ygaena)肌肉鹽溶蛋白的提取和凝膠形成條件[J]. 海洋與湖沼, 2011, 42(2): 289-293.

[34] 徐幸蓮, 周光宏, 黃鴻兵, 等. 蛋白質濃度、pH值、離子強度對兔骨骼肌肌球蛋白熱凝膠特性的影響[J]. 江蘇農業學報, 2004, 20(3): 159-163.

[35] 常青, 黃啟超, 胡永金, 等. NaCl離子強度、Mg2+濃度、熱變溫度和pH對云南地方黃牛肌肉鹽溶蛋白凝膠保水性的影響[J]. 食品工業科技, 2009, 30(1): 101-104.

[36] 代佳佳, 韓敏 義, 徐幸蓮, 等. 加熱速率對雞胸肉勻漿物凝膠特性影響[J]. 食品科學, 2014, 35(5): 18-22.

[37] 王莉莉, 潘道東. 鵝肉鹽溶蛋白提取條件對其凝膠特性的影響[J].中國食品學報, 2010, 10(6): 107-15.

[38] 楊玉玲, 游遠, 彭曉蓓, 等. 加熱對雞胸肉肌原纖維蛋白結構與凝膠特性的影響[J]. 中國農業科學, 2014, 47(10): 2013-2020.

[39] 孔保華, 王宇, 夏秀芳, 等. 加熱溫度對豬肉肌原纖維蛋白凝膠特性的影響[J]. 食品科學, 2011, 32(5): 50-54.

Physico-chemical Properties of Myofibrillar Proteins from Cultured Crocodile (Crocodylus siamensis)

XIAO Kun, WANG Xi-chang*
(College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)

The highest content of myofibrillar proteins of edible parts from cultured crocodile (Crocodylus siamensis) was investigated. The extracted myofibrillar proteins were explored for the effects of NaCl concentration, pH and temperature on their solubility, emulsifying properties and gel properties. The results showed that the content of myofibrillar proteins in tail muscle ((7.95±0.12) g/100 g on a wet weight basis) was the highest; the electrophoretic patterns indicated that the myofibrillar proteins mainly included myosin, paramyosin, actin, tropomyosin and troponin, and at low ionic strength had poor solubility and emulsifying properties but good gel properties. The solubility and emulsifying properties increased with increasing ionic concentration, while the opposite trend was observed for gel properties. With an increase in pH, the solubility dramatically increased first but decreased later, and the emulsifying properties and gel properties showed a trend of slow decline. The solubility and water-holding capacity (WHC) reached the lowest level at pH 5.5. With increasing temperature, the gel properties increased significantly, and the WHC initially decreased followed by a slight increase, reaching a desired level at a lower temperature (40 ℃) . Taken together, good texture quality and WHC of meat products from Crocodylus siamensis can be obtained for myofibrillar proteins with 0.2 mol/L NaCl and heating at 80 ℃.

cultured Crocodylus siamensis; myofibrillar protein; solubility; emulsifying property; gel properties

TS254

A

1002-6630（2014）23-0092-07

10.7506/spkx1002-6630-201423019

2014-06-30

上海市科委工程中心建設項目（11DZ2280300）；上海市教委重點學科建設項目（J50704）；上海高校知識服務平臺《上海海洋大學水產動物遺傳育種中心》項目（ZF1206）

肖琨（1989—），女，碩士研究生，研究方向為食品營養與品質評價。E-mail：kunxk@163.com

*通信作者：王錫昌（1964—），男，教授，博士，研究方向為食品營養與品質評價。E-mail：xc_wang@shou.edu.cn