香樟葉化學成分的研究

孫崇魯，湯小蕾，周靜峰，吳 浩

浙江醫藥高等專科學校，寧波 315100

樟樹系樟科樟屬，為亞熱帶常綠喬木植物，是我國亞熱帶綠闊葉林的主要樹種之一，屬藥用植物［1，2］。它在我國資源豐富。樟屬植物富含揮發油，普遍具有芳香健胃作用。樟具有殺蟲解毒，抗血栓、動脈硬化、腫瘤、氧化衰老等作用，主治風濕痹痛，水火燙傷，瘡瘍腫毒，疥癬皮膚瘙癢，毒蟲咬傷［3］。樟樹葉有提取色素、香料等用來制成植物農藥，制備氧化劑和醫藥產品等。且樟樹葉為可再生資源，其應用前景廣闊［1］。

目前國內對香樟葉的揮發油成分報道較多［4，5］，其主要含有桉葉素、芳樟醇、α-蒎稀、β-蒎稀、莰烯、黃樟素等揮發油，而對其它成分研究較少。本實驗對香樟葉70%的乙醇提取物進行了研究，利用各種色譜和波譜技術分離純化并鑒定了9 個化合物，分別鑒定為:鄰苯二甲酸二丁酯(1)，l-細辛脂素(2)，(8R，8' R)-3，3'，4，4'-四甲氧基-9-氧代-8-8'，9-O-9'-木脂素(3)，槲皮素-3-Ο-β-D-葡萄糖苷(4)，山奈酚-3-O-β-蕓香糖苷(5)，山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(6)，槲皮素-3-Ο-α-L-鼠李糖苷(7)，蘆丁(8)，異鼠李素-3-O-β-蕓香糖苷(9)。

1 主要儀器與試劑

香樟葉采自浙江醫藥高等專科學校校園內，經中南林業科技大學黃克瀛教授鑒定為香樟葉。核磁共振波譜儀:德國BrukerAM-400;液相色譜-質譜聯用儀:安捷倫科技有限公司;AL204 電子天平:梅特勒托利多儀器有限公司;LABOROTA 4000 旋轉蒸發儀:德國海道夫公司;SHZ-III 型循環水真空泵:上海亞榮生化儀器有限公司;DHG-9070A 型電熱鼓風干燥箱:寧波江南儀器廠;實驗試劑為分析純:寧波奧博科學儀器有限公司;柱層析用硅膠(200～300目):青島海洋化工廠分廠;氘代氯仿、氘代二甲亞砜:J＆K CHEMICAL LTD;數顯恒溫水浴鍋:鄭州長城科工貿有限公司;超聲波清洗器:Sigma 儀器有限公司。

2 提取和分離

取干燥的香樟葉5 kg，粉碎，用70%乙醇回流提取3 次，合并提取液，減壓濃縮得浸膏，將浸膏混懸于適量的水中，分別用石油醚、氯仿、正丁醇進行萃取。氯仿部分經硅膠柱色譜，以石油醚-乙酸乙酯(20∶1～1∶1)梯度洗脫依次得到3 個流分(Fr.1～Fr.3)。流分Fr.1～Fr.3 經硅膠柱，制備薄層色譜和重結晶的方法反復分離純化得到化合物1(850 mg)，2(300 mg)，3(800 mg);正丁醇部分經硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇(20∶1～1∶1)梯度洗脫，得到6個流分(Fr.4～Fr.9)。流分Fr.4～Fr.9 經硅膠色譜柱層析柱、聚酰胺色譜柱層析，制備薄層色譜分離純化得化合物4(20 mg)，5(38 mg)，6(54 mg)，7(66 mg)，8(122 mg)，9(11 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 無色油狀物，易溶于氯仿，乙酸乙酯，溶于甲醇。薄層色譜上10% H2SO4-MeOH 試劑反應顯紫紅色，提示該化合物可能是萜類化合物。ESI-MS(m/z):279［M +H］+，579［2M +Na］+。1H NMR(CDCl3，600 MHz)δ:7.53 (2H，m，H-4，5)，7.72 (2H，m，H-3，6)，4.21(4H，t，J=6.6 Hz，H-8，8')，1.63(4H，m，H-9，9')，1.38(4H，m，H-10，10')，0.88 (6H，t，J=7.8 Hz，H-11，11');13C NMR(CDCl3，400 MHz)δ:167.8(C-7，7')，132.4(C-3，4)，131.0 (C-1，6)，128.9 (C-2，5)，65.6 (C-8，8')，30.7 (C-9，9')，19.3 (C-10，10')，13.8 (C-11，11')。以上數據與文獻［6］報道基本一致，故鑒定為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物2 白色針晶(PE)，易溶于氯仿，乙酸乙酯，溶于甲醇。ESI-MS(m/z):352［M-H］+。1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:2.83(1H，m，H-8’)，3.09～3.22 (2H，m，H-8，H-9'β)，3.83～3.92 (2H，m，H-9α，H-9'α)，4.10 (1H，d，J=9.6 Hz，H-9β)，4.69(1H，d，J=7.2 Hz，H-7')，4.83(1H，d，J=5.0 Hz，H-7)，5.95 (4H，s，OCH2O)，6.78～6.86 (6H，m，H-2'，H-5'，H-6'，H-2，H-5，H-6)。13C NMR (100 MHz，CDCl3)D:134.7 (C-1')，106.4 (C-2')，147.8(C-3')，146.8 (C-4')，108.2 (C-5')，119.2 (C-6')，83.2(C-7')，53.1 (C-8')，72.2 (C-9')，135.3(C-1)，106.5 (C-2)，148.0(C-3)，147.3 (C-4)，108.1 (C-5)，119.2 (C-6)，88.1(C-7)，54.1 (C-8)，70.5 (C-9)，101.1(2OCH2O)。以上光譜數據與文獻報道的1-細辛脂素數據一致［7］，故確定該化合物為1-細辛脂素(1-asarinin)。

化合物3 C22H26O6，白色晶體，ESI-MS(m/z):387［M +H］+，409［M +Na］.1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:6.65(2H，t，J=15.6 Hz，H-2，H-5)，6.55(2H，J=17.2 Hz，H-2'，H-5')，6.42(1H，dd，J=10.0，8.0 Hz，H-6)，6.34(1H，d，J=2.0 Hz，H-6')，4.01 (1H，dd，J=16.0，2.0 Hz，H-8)，3.74(12H，s，3，3'，4，4'-OCH3)，2.83(2H，J=12.8 Hz，H-9')，2.46 (4H，m，H-8，H-8')，1.51 (1H，s，H-8').13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:178.9(C-9)，148.9(C-3)，148.9(C-3')，147.9 (C-4)，147.9(C-4')，130.2(C-1)，130.2(C-1')，121.7(C-6)，120.8(C-6')，112.4(C-2)，112.1 (C-2')，112.1(C-5)，112.6(C-5')，71.2 (C-9')，56.7(CH3O-C4)，56.7(CH3OC4')，56.7(CH3O-C3)，56.7(CH3O-C3')，46.9(C-8)，41.7 (C-8')，38.9(C-7')，35.6(C-7)。上述波譜數據與文獻［8］一致，確定化合物2 為(8R，8'R)-3，3'，4，4'-四甲氧基-9-氧代-8-8'，9-O-9'-木脂素。

化合物4 黃色粉末，mp.231～232 ℃，鹽酸-鎂粉反應陽性，Molish 反應呈陽性，ESI-MS(m/z):465［M+H］+。1H NMR DMSO-d6，400 Hz)δ:7.58(1H，d，J=2.5 Hz，H-2')，7.48(1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6')，6.81(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.40(1H，d，J=2.5 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2.5 Hz，H-6)，5.37(1H，d，J=7.0 Hz，H-1G)，糖部分其它質子δ:3.08～4.32;13C NMR(DMSO-d6)δ:177.6(C-4)，164.1(C-7)，161.4(C-5)，156.4(C-9)，98.9(C-6)，93.7(C-8)，156.3(C-2)，148.5(C-4')，144.9(C-3')，133.4(C-3)，121.6(C-1')，121.3(C-6')，116.3(C-5')，115.3(C-2')，104.0(C-10)，100.9(C1-G)，77.6(C5-G)，76.5(C3-G)，74.2(C2-G)，70.0(C4-G)，61.1(C6-G)。以上數據與文獻［9］報道的槲皮素-3-Ο-β-D-葡萄糖苷的數據一致，故確定化合物4為槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物5 黃色粉末，mp.187～189 ℃，鹽酸-鎂粉反應陽性，Molish 反應陽性;ESI-MS(m/z):595.1［M+H］+。1H NMR(DMSO-d6，400 Hz)δ:7.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-2'，6')，6.81(2H，d，J=8.7 Hz，H-3'，5')，6.12(1H，s，H-6)，6.31(1H，s，H-8)，5.20 (1H，d，J=7.0 Hz，H-1G)，4.50 (1H，d，J=1.0 Hz，H-1R)，3.15～3.80(m，均為糖上氫原子的信號)，0.99(3H，d，J=6.0 Hz，CH3-R)。13C NMR(DMSO-d6，400Hz)δ:156.7(C-2)，133.6(C-3)，177.6(C-4)，161.2(C-5)，98.9(C-6)，164.1(C-7)，93.5(C-8)，156.3(C-9)，103.8(C-10)，121.3(C-1')，130.4(C-2'，6')，115.7(C-3'，5')，159.8(C-4')，101.2(C1-G)，74.1(C2-G)，76.5(C3-G)，70.4(C4-G)，75.8(C5-G)，67.1(C6-G)，100.8(C1-R)，70.2(C2-R)，70.9(C3-R)，71.6(C4-R)，68.4(C5-R)，17.5(C6-R)。以上數據與文獻報道的山奈酚-3-O-β-D-［α-L-吡喃鼠李糖(1→6)］-吡喃葡萄糖苷(即山奈酚-3-O-β-蕓香糖苷)數據基本一致［10］。我們可以確定化合物5 為山奈酚-3-O-β-蕓香糖苷。

化合物6 黃色粉末，鹽酸-鎂粉反應陽性，Molish 反應陽性，分子式C23H22O11。ESI-MS(m/z):432.9［M+H］+，287［M-Rha +H］+;1H NMR (DMSO-d6，400 Hz)δ:7.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-2'，6')，6.81(2H，d，J=8.7 Hz，H-3'，5')，6.12(1H，s，H-6)，6.31(1H，s，H-8)，5.49 (1H，d，J=1.2 Hz，H-1R)，0.99(3H，d，J=6.0 Hz，CH3-R)。13C NMR(DMSO-d6，400 Hz)δ:156.4(C-2)，134.3(C-3)，177.7(C-4)，161.4(C-5)，98.9(C-6)，164.1(C-7)，93.9(C-8)，156.6(C-9)，104.2(C-10)，120.6(C-1')，130.7(C-2'，6')，115.4(C-3'，5')，159.9(C-4')，101.8(C1-R)，70.2(C2-R)，70.4(C3-R)，71.3(C4-R)，69.7(C5-R)，17.4(C6-R)。以上數據與文獻［11］對照基本一致，故鑒定化合物6 為山柰酚-3-Oα-L-吡喃鼠李糖苷(kaempferol-3-O-α-L-rhamopyranoside)。

化合物7 黃色粉末，mp.182～184 ℃，鹽酸-鎂粉反應呈陽性，Molish 反應陽性，分子式C21H20O11。ESI-MS(m/z):449［M+H］+，303(水解掉糖后生成的槲皮素苷元)等.1H NMR(DMSO-d6)δ:7.58(1H，d，J=2.5 Hz，H-2')，7.48(1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6')，6.81(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.40(1H，d，J=2.5 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2.5 Hz，H-6)，5.27(1H，d，J=1.3 Hz，H-1R)，糖部分其它質子δ:3.08-4.32.13C NMR (DMSO-d6)δ:156.7(C-2)，133.5(C-3)，177.7(C-4)，161.2(C-5)，98.7(C-6)，164.1(C-7)，93.7(C-8)，157.1(C-9)，104.1(C-10)，121.2 (C-1')，115.9 (C-2')，144.9 (C-3')，148.5(C-4')，116.3 (C-5')，121.7 (C-6')，101.8(C1-R)，70.3(C2-R)，70.8(C3-R)，71.3(C4-R)，69.7(C5-R)，17.5(C6-R)。以上波譜數據與文獻報道［12］一致，故鑒定為槲皮素-3-Ο-α-L-鼠李糖苷(quercetin3-Ο-α-L-rhamnoside)，即 槲 皮 苷(Quercitrin)。

化合物8 黃色粉末，mp.185～188 ℃。鹽酸-鎂粉反應陽性，Molish 反應陽性，分子式C27H30O16。ESI-MS(m/z):611.1［M +H］+，由其1H NMR 和13C NMR 可知為黃酮苷類化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ:6.11(1H，d，J=1.5 Hz，C6-H)，6.29(1H，d，J=1.5 Hz，C8-H)，7.57(1H，d，J=2.0 Hz，C2'-H)，6.79(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，7.53(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6')，5.33(1H，d，J=8.0 Hz，H1-G)，4.38(1H，d，J=1.0 Hz，H-1R)，0.99 (3H，d，J=6.0 Hz，CH3-R).13C NMR (DMSO-d6)δ:156.8(C-2)，133.6(C-3)，177.7(C-4)，161.3(C-5)，98.7(C-6)，164.1(C-7)，93.7(C-8)，156.7(C-9)，104.0(C-10)，122.2 (C-1')，115.9 (C-2')，144.8 (C-3')，148.5(C-4')，116.3 (C-5')，121.9 (C-6')，101.2(C1-G)，74.1(C2-G)，76.5(C3-G)，70.4(C4-G)，75.9(C5-G)，67.1(C6-G)，101.8(C1-R)，70.2(C2-R)，70.9(C3-R)，71.3(C4-R)，68.7(C5-R)，17.4(C6-R)。與蘆丁共薄層，Rf值及顯色均一致，NMR數據與文獻報道［13］的數據吻合，故確定化合物8 為蘆丁。

化合物9 淡黃色粉末，mp.168～169 ℃，鹽酸-鎂粉反應陽性，Molish 反應陽性，分子式C28H32O16。ESI-MS(m/z):625.1［M+H］+;1H NMR(DMSOd6)δ:7.64(1H，d，J=2.1 Hz，H-2')，7.53(1H，dd，J=8.7，2.1 Hz，H-6')，6.83(1H，d，J=8.7 Hz，H-5')，6.31(1H，d，J=2.1Hz，H-8)，6.19 (1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，5.43(1H，d，J=6.9 Hz，glu-1-H)，4.41(1H，d，J=1.2 Hz，H-1R)，3.83 (3H，s，OCH3)，0.96(3H，d，J=6.0 Hz，CH3-R);13C NMR(DMSO-d6)δ:156.6(C-2)，133.3(C-3)，177.5(C-4)，161.3(C-5)，98.7(C-6)，164.1(C-7)，93.7(C-8)，156.6(C-9)，104.0(C-10)，121.1(C-1')，113.4(C-2')，149.8(C-3')，146.5(C-4')，115.3(C-5')，121.9(C-6')，55.9(CH3O-3')，100.8(C1-G)，74.2(C2-G)，76.5(C3-G)，70.2(C4-G)，75.9(C5-G)，67.1(C6-G)，100.9(C1-R)，70.2(C2-R)，70.8(C3-R)，71.5(C4-R)，68.5(C5-R)，17.5(C6-R)。以上數據與文獻報道一致［14］，該化合物鑒定為異鼠李素-3-O-β-蕓香糖苷。

4 討論

本文通過對香樟葉化合物的分離鑒定發現，正丁醇萃取層中主要以黃酮類化合物為主要成分，氯仿萃取層中主要以木脂素類化合物為主要成分，且含量較大。以往對香樟葉的開發利用，主要利用了其揮發油類成分，開發香精香料等產品。而其所含有的大量的木脂素及黃酮類化合物成分的活性則開發的不夠，如抗氧化，抑菌等活性。因此以成分分離為基礎，并進一步明確香樟葉中所含黃酮及木脂素類成分的藥理作用，可以為進一步開發利用香樟葉奠定基礎。

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