一起老年公寓諾如病毒感染引發(fā)胃腸炎疫情的檢測(cè)與分析

蔣烈 常偉冰 周滔

江蘇省常熟市疾病預(yù)防控制中心，江蘇常熟215500

一起老年公寓諾如病毒感染引發(fā)胃腸炎疫情的檢測(cè)與分析

蔣烈 常偉冰 周滔

江蘇省常熟市疾病預(yù)防控制中心，江蘇常熟215500

目的對(duì)某社會(huì)福利院老年公寓發(fā)生的一起急性老人群體性腸胃炎疫情中采集的標(biāo)本采用實(shí)時(shí)熒光PCR方法（RT-PCR）進(jìn)行諾如病毒核酸檢測(cè)。方法采集該老年公寓患病老人、護(hù)理人員的肛拭子共8份。結(jié)果本次疫情中，在5份患病老人和2份護(hù)理人員的肛拭子標(biāo)本中檢出諾如病毒Ⅱ型（GⅡ）。結(jié)論本次疫情爆發(fā)蔓延可能是由于帶病上班的工作人員在護(hù)理和分發(fā)餐點(diǎn)過(guò)程中將諾如病毒傳染給老人并引起交叉感染所致。

諾如病毒；老年公寓；實(shí)時(shí)熒光；胃腸炎疫情

諾如病毒又名諾瓦克病毒，屬于人類(lèi)杯狀病毒科諾瓦克樣病毒屬，由其感染引起的主要癥狀是惡心、嘔吐、腹瀉。該病毒傳染性強(qiáng)，以腸道傳播為主，可通過(guò)污染的食物、水源、生活接觸或吸入空氣中的病毒氣溶膠傳播[1]。由諾如病毒感染引發(fā)的胃腸炎疾病在全世界廣泛流行。本次實(shí)驗(yàn)利用RT-PCR檢測(cè)技術(shù)，對(duì)常熟市某社會(huì)福利院老年公寓發(fā)生的一起急性群體性腸胃炎疫情中采集的標(biāo)本進(jìn)行諾如病毒核酸檢測(cè)，確定病原，并結(jié)合現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查資料對(duì)此次事件總結(jié)分析。

1 資料與方法

1.1 基本情況

2012年12月10日常熟市疾控中心接某社會(huì)福利院電話報(bào)告，稱(chēng)該院有一個(gè)病區(qū)自本月初以來(lái)先后有十多名老年人出現(xiàn)腹瀉、嘔吐等癥狀。經(jīng)調(diào)查，該院共收住年齡在70歲以上的老人410名，工作人員180名。住院老人飲食主要由該院食堂統(tǒng)一加工后送至各病區(qū)，再由病區(qū)的工作人員進(jìn)行分餐送給各老人，生活不能自理者由護(hù)理人員喂服。目前腹瀉、嘔吐病例均集中在某一病區(qū)，該病區(qū)共有20名生活不能自理的老人，分別住在8個(gè)房間，由9名護(hù)理人員輪班護(hù)理。

1.2 流行病學(xué)資料

1.2.1 主要癥狀經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，該病區(qū)自2012年11月29日起—2012年12月9日，先后有15人（男8人、女7人）出現(xiàn)嘔吐、腹瀉等癥狀。15例患者的臨床癥狀分布為：嘔吐7例（100歲、93歲、79歲、78歲、76歲、47歲、45歲各一例）、腹瀉3例（86歲兩個(gè)人、74歲一人）、嘔吐伴腹瀉5例（87歲、83歲、72歲、42歲、51歲各一人）。

1.2.2 患者治療情況其中一例患者因兩次嘔吐呈咖啡樣嘔吐物，且年齡過(guò)大（100歲）而由院方動(dòng)員其家屬外送醫(yī)院治療外，其余患者均由該院衛(wèi)生所負(fù)責(zé)治療?；颊呓?jīng)對(duì)癥治療，愈后效果良好，無(wú)重癥和死亡病例。

1.2.3 首發(fā)和次發(fā)病例首發(fā)病例為一男性老人，于2012年11月29日出現(xiàn)發(fā)熱（38℃）、惡心等癥狀，伴嘔吐、腹瀉各一次，次日起每天腹瀉2～3次，無(wú)嘔吐。次發(fā)病例為該病區(qū)一女性護(hù)理人員，于2012年12月1日出現(xiàn)嘔吐癥狀。

1.2.4 患者年齡及空間分布15例患者中11例為該病區(qū)住院老人，年齡均在70歲以上，分布在該病區(qū)7個(gè)房間（病區(qū)共有8個(gè)房間，目前除104室無(wú)相同癥狀病例外，其余房間均有病例發(fā)生）。其余4人為該病區(qū)護(hù)理人員，主要負(fù)責(zé)老人的日常起居及飲食分發(fā)等工作。

1.2.5 發(fā)病時(shí)間分布發(fā)病時(shí)間與發(fā)病人數(shù)見(jiàn)圖1。

圖1 常熟市社會(huì)福利院急性胃腸炎病例發(fā)病時(shí)間統(tǒng)計(jì)圖

1.3 材料

1.3.1 標(biāo)本與12月10日采集該社會(huì)福利院老年公寓急性胃腸炎患者肛拭子標(biāo)本8份，其中患病老人6份，患病護(hù)理人員2份（同一護(hù)理班次）。用無(wú)菌棉簽采集肛拭子置于病毒采樣管，冷藏運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.3.2 試劑核酸提取試劑、諾如病毒GⅠ/GⅡ雙重?zé)晒夂怂釞z測(cè)試劑均由江蘇碩世生物科技有限公司提供。

1.3.3 儀器ABI 7500fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀；FRESCO21高速冷凍離心機(jī)；HFsafe-900Ⅱ級(jí)生物安全柜（上海力申）。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 提取病毒核酸取200 μL病毒采樣管中的保存液，按照江蘇碩世生物科技有限公司提供的核酸提取試劑盒說(shuō)明書(shū)，手工提取核酸，得到約50 μL的核酸提取液，備用。

1.4.2 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)：采用江蘇碩世生物科技有限公司提供的諾如病毒GⅠ/GⅡ雙重?zé)晒夂怂釞z測(cè)試劑。根據(jù)本次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本數(shù)和陰性、陽(yáng)性參考品各一管，配制共10份20μL/份的反應(yīng)體系于擴(kuò)增管中，吸取備用的核酸提取液5μL加入擴(kuò)增反應(yīng)體系，于最后兩孔擴(kuò)增管中加入陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，蓋好蓋子，密封擴(kuò)增管。將混合好的擴(kuò)增管在ABI 7500fast實(shí)時(shí)熒光PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增反應(yīng)體系的配制和熒光PCR反應(yīng)參數(shù)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

表1 各房間老人及護(hù)理人員肛拭子檢測(cè)結(jié)果

1.5 質(zhì)量控制

1.5.1 陰性參考品RT-PCR反應(yīng)結(jié)束后無(wú)典型S型擴(kuò)增曲線。

1.5.2 陽(yáng)性參考品RT-PCR反應(yīng)結(jié)束后呈典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤30。

1.5.3 在本次實(shí)驗(yàn)中，需同時(shí)滿足以上兩個(gè)要求，否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。

1.6 結(jié)果判讀

實(shí)驗(yàn)檢測(cè)采用ABI 7500software V2.0.6分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。在儀器正常，陰性參考品、陽(yáng)性參考品均符合質(zhì)量控制條件的情況下，F(xiàn)AM通道擴(kuò)增曲線呈典型S型曲線且CT≤35，判斷為諾如病毒GⅠ陽(yáng)性；無(wú)典型S型擴(kuò)增曲線或者CT＞35，判斷為諾如病毒GⅠ陰性。VIC通道擴(kuò)增曲線呈典型S型曲線且CT≤35，判斷為諾如病毒GⅡ陽(yáng)性；無(wú)典型S型擴(kuò)增曲線或者CT＞35，判斷為諾如病毒GⅡ陰性。

2 結(jié)果

2.1 病毒檢測(cè)

采集8份患者肛試子，其中5份患病老人和2份護(hù)理人員的肛拭子標(biāo)本檢出GⅡ，陽(yáng)性率為87.5%（7/8），1份患病老人肛拭子標(biāo)本未檢出。首發(fā)病例和次發(fā)病例均檢出GⅡ。各房間老人及護(hù)理人員的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 控制措施

①對(duì)老年患者及時(shí)進(jìn)行隔離、治療，一旦有重癥病人立即轉(zhuǎn)市級(jí)醫(yī)院治療。

②檢出陽(yáng)性的護(hù)理人員暫時(shí)調(diào)離工作崗位，特別不得從事接觸直接入口食物的工種，在癥狀完全消失后一周方可恢復(fù)相關(guān)工作。

③加強(qiáng)食品和飲用水的衛(wèi)生安全管理，注意分餐環(huán)節(jié)的規(guī)范操作，該病區(qū)的餐具使用后經(jīng)充分清洗并消毒后再放入保潔器具內(nèi)保存?zhèn)溆?，且不與其他病區(qū)混用。

④對(duì)該病區(qū)的配餐間、開(kāi)水間、衛(wèi)生間、病房及其他公共場(chǎng)所加強(qiáng)通風(fēng)，并進(jìn)行徹底清洗消毒。

⑤加強(qiáng)病人排泄物、嘔吐物的消毒處理。

2.2.6 對(duì)全院?jiǎn)T工，特別是醫(yī)務(wù)人員、護(hù)理人員進(jìn)行一次健康教育，普及預(yù)防急性胃腸炎相關(guān)知識(shí)，提高意識(shí)。

3 分析與討論

根據(jù)此次疫情中病例的臨床癥狀、現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，可認(rèn)定為一起諾如病毒Ⅱ型感染引起的急性胃腸炎疫情，發(fā)生疫情蔓延的原因可能是由帶病上班的工作人員在護(hù)理和分發(fā)餐點(diǎn)過(guò)程中將諾如病毒傳染給老人并引起交叉感染所致。分析資料和檢測(cè)結(jié)果，主要依據(jù)如下：①基本排除細(xì)菌性食物中毒事件，因該社會(huì)福利院所有老人餐飲均由該院負(fù)責(zé)供應(yīng)，所有老人有進(jìn)食相同食譜史，而發(fā)生胃腸炎癥狀的病例均集中在某一病區(qū)，并且該病區(qū)先后出現(xiàn)患者共有十多天，無(wú)集中爆發(fā)時(shí)間段，其他病區(qū)無(wú)人員出現(xiàn)類(lèi)似癥狀。②本次疫情中暴露和發(fā)病時(shí)間存在一致性，隨著時(shí)間推進(jìn)，患者人數(shù)出現(xiàn)明顯進(jìn)展性，符合人-人傳播模式。③首發(fā)病例老人一處于封閉居住狀態(tài)，接觸外環(huán)境感染可能性小，而次發(fā)病例護(hù)理人員一和首發(fā)病例老人一出現(xiàn)癥狀的間隔時(shí)間較短，可能是未表現(xiàn)出臨床癥狀的患病護(hù)理人員一在護(hù)理工作時(shí)將病毒傳染給抵抗力較弱老人一，導(dǎo)致病毒在該病區(qū)的102室的老人間傳播，并且感染同一護(hù)理班次的護(hù)理人員二，兩名患病護(hù)理人員通過(guò)護(hù)理其他房間內(nèi)的老人使GⅡ在該病區(qū)內(nèi)進(jìn)一步擴(kuò)散，造成該次疫情爆發(fā)蔓延。④隨著檢測(cè)確定病原，實(shí)施控制措施，疫情得到控制，無(wú)新發(fā)病例出現(xiàn)，有明顯的終止效應(yīng)。

隨著RT-PCR檢測(cè)技術(shù)的推廣應(yīng)用，近幾年國(guó)內(nèi)多次報(bào)道由諾如病毒感染引起的胃腸炎疫情，證實(shí)諾如病毒是引起非細(xì)菌性胃腸炎爆發(fā)流行的主要病因，已成為重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題[1-3]。國(guó)內(nèi)人群普遍易感，一般好發(fā)于冬春季節(jié)，屬于自限性疾病，能加重兒童和老年患者的病情而引起死亡，病原學(xué)檢測(cè)以GⅡ感染為主[4-6]。本次事件中8份標(biāo)本檢出7份GⅡ陽(yáng)性，符合相關(guān)報(bào)道。熒光實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)技術(shù)特異、快速、靈敏的特點(diǎn)在本次應(yīng)急事件中充分體現(xiàn)，為確定病原，制定正確處置措施提供了強(qiáng)有力的保障，大大提高應(yīng)急事件響應(yīng)處置效率和效果，值得基層疾控大力推廣。

[1]施超，錢(qián)燕華，邵潔，等.諾如病毒性腹瀉研究進(jìn)展[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012,23（1）：25-27.

[2]桑少偉，趙仲堂，索繼紅，等.國(guó)內(nèi)諾如病毒胃腸炎爆發(fā)流行特征分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（20）：4245-4247.

[3]徐友富，童貽剛，茹志濤，等.諾如病毒感染國(guó)內(nèi)外研究概況[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008,5（18）：949-951.

[4]聞棟，顧朝陽(yáng)，祖榮強(qiáng)，等.一起諾如病毒致胃腸炎暴發(fā)疫情調(diào)查[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012,23（5）：4-7.

[5]劉運(yùn)喜，劉麗娟，索繼江，等.一起老年病區(qū)諾如病毒醫(yī)院感染暴發(fā)的調(diào)查[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（6）：1136-1138.

[6]姚萍，張惠力，葛新，等.一起急性胃腸炎暴發(fā)疫情的病原學(xué)診斷[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013,23（9）：2074-2164.

R181.8

A

1672-5654（2014）11（c）-0031-02

2014-09-03）

蔣烈（1977-）,男,江蘇常熟人,本科,主管檢驗(yàn)師，研究方向：病原微生物檢驗(yàn)。