MP—DNA、MP—IgM及MP—IgG在兒童肺炎支原體感染中的動態變化

黃淑媛等

[摘要] 目的 探討MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在兒童肺炎支原體感染中的動態變化情況，為患兒的診治提供依據。 方法 98例患兒均留取咽拭子和血清標本，采用實時熒光PCR檢測患兒咽拭子標本中的MP-DNA；采用顆粒凝集法檢測患兒血清中MP-IgM；采用ELISA檢測患兒血清中MP-IgG。MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者都是陽性者均確診為肺炎支原體感染病例，觀察分析確診病例在不同病程時MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG的動態變化規律。 結果 98例患兒在就診當天MP-DAN的陽性率達76.53%，隨著病程的延長，MP-DNA陽性率逐漸下降；MP-IgM的陽性率在就診當天為36.73%，大約2周時達高峰，后緩慢下降；MP-IgG在就診當天的陽性率很低，只有3.06%，大約4周時達高峰，至第8周時仍持續高值，三者在不同病程時期的檢出陽性率差異有統計學意義（P<0.01），且在就診當天、治療后1、2、4及8周時差異均有統計學意義（P<0.01）。 結論 在肺炎支原體感染患兒不同的病程時期應動態監測MP-DAN、MP-IgM及MP-IgG，并進行綜合分析，實現優勢互補，以提高診斷的特異度和靈敏度，減少漏診和誤診，使患者得到早期正確的診斷及治療。

[關鍵詞] 肺炎支原體；兒童；動態變化

[中圖分類號] R375+.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）02（a）-0095-03

肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）是一種呼吸道感染的常見病原體，在兒童社區獲得性肺炎中，有近40%由MP引起[1-2]。隨著MP的變遷，MP已成為小兒肺炎的主要病原體，并且感染率呈上升趨勢[3-4]，發病年齡也逐漸趨小。據臨床報道，應用大環內酯類抗生素治療MP感染的效果顯著，而β-內酰胺類抗生素無效，故及時準確的診斷可以有效地控制病情，避免延誤MP感染的治療，避免濫用抗生素，并能降低嚴重感染患兒的死亡率，因此，早期診斷出MP感染尤為重要。本研究回顧性分析了本院收治的98例MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者均為陽性的門診及住院患兒的臨床資料，探討MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在兒童MP感染中的動態變化情況，為患兒的診治提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月～2013年3月以本福利中心及東莞市南城醫院98例MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者均陽性的門診及住院MP感染患兒為研究對象，年齡6個月～13歲，其中，男52，女46例。

1.2 方法

每例患兒均取就診當天、1周、2周、4周及8周的咽拭子檢測MP-DAN，并同時抽血進行MP-IgM及MP-IgG檢測；所有患兒均給予阿奇霉素（商品名：希舒美，輝瑞制藥有限公司，0.1 g/袋），10 mg/（kg·d），1次/d，用3 d停4 d，1周為1個療程，共治療4周。

1.2.1 MP-IgG的測定 采用ELISA方法，由晶美生物工程公司提供的MP-IgG抗體試劑盒，操作參照試劑盒內說明書，標本OD值與陰性對照OD值比較，以OD值≥2.0為陽性。

1.2.2 MP-IgM的測定 采用顆粒凝集法，Sero-Dia-Myco Ⅱ試劑盒由日本Fujirebio Inc提供，血清抗體56℃滅活，操作方法按說明書進行，同時設立陽性與陰性對照孔，滴度≥80為陽性。

1.2.3 MP-DNA的測定 采用實時熒光PCR檢測患兒咽拭子標本中的MP-DNA，試劑由中山大學達安基因股份有限公司提供，儀器采用美國生物系統ABI-7500熒光定量PCR儀。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件對相關數據進行分析，計數資料采用？字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

共有98例患兒入選，隨著病情的好轉及治愈，至第8周時只有75例患兒參與隨訪。就診當天患兒MP-DAN的陽性率最高，達76.53%，隨著病程的進展，MP-DNA的陽性率逐漸下降；MP-IgM的陽性率至第2周時達高峰，然后緩慢下降；MP-IgG在就診當天的陽性率很低，至第4周時達高峰，至第8周時仍持續高值。MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在不同病期檢出率差異均有統計學意義（P<0.01），故三者對MP感染的診斷價值高低因病程不同而異（表1，圖1）。

表1 患兒不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG陽性率的比較[n（%）]

圖1 患兒不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG陽性率的

動態變化情況直方圖

3 討論

MP感染在全球范圍內均有發生，是繼細菌、病毒后，引起兒童呼吸道感染又一常見的病原，且MP感染的發病率有逐年上升趨勢，危害較大，嚴重者可引起全身炎癥反應綜合征及心功能不全等肺外并發癥[5]。MP對β-內酰胺酶類抗生素無效，對大環內酯類抗生素療效顯著。因此，早期正確診斷及如何提高MP感染的診斷水平受到普遍關注。MP的分離培養雖然對診斷和鑒別有決定性意義，但是由于耗時較長，培養較困難，且檢出率低，故在臨床上很少應用，血清特異性抗體測定是目前臨床診斷MP感染的最常用的實驗室證據[6-7]。

MP-IgM是機體受MP感染后最早出現的特異性抗體，于發病后1～2 d即可檢出，大部分患者在感染后1周內出現，少部分患兒在感染后7～10 d出現，約2周時達到高峰，可以持續12～16周甚至更長的時間[8]，IgM抗體陽性可作為早期或急性期感染的診斷指標。本研究提示，患兒MP-IgM在就診當天的陽性率為36.73%，至第2周時為79.59%，達到高峰，直至第8周時仍有較高的陽性率。MP-IgG的出現較晚，從病程第2周起陽性率開始增高，至第4周時達高峰，第8周時仍居高不下，基本與文獻報道一致。

國內普遍認為，MP-IgM在感染3～7 d后出現，比MP-IgG出現早，提示MP近期和當前感染，但MP-IgM陽性并不總是表示當前的感染狀態，部分患者可達半年之久，在某些病例中，MP-IgM 在感染1年后仍然持續存在；另外，MP-IgM 在再次感染MP后含量極微，或者無法檢測到[9]。MP-IgM抗體的檢測受多種因素的影響。①年齡：嬰幼兒免疫系統尚處于發展期，發育還未完全，在MP感染后患兒抗體生成不足，影響抗體檢出陽性率；②病程：抗原刺激機體免疫應答產生抗體需要一段時間，MP-IgM抗體發病1周左右時才開始上升，對于病程<1周的患兒，檢測MP-IgM抗體時容易造成漏診、誤診；③機體免疫狀態：對于免疫功能低下的患兒，其免疫反應低，IgM升高幅度很小，導致MP-IgM抗體的陽性率低。因此，血清MP-IgM抗體的檢測在臨床應用中有一定的局限性[7，10]，僅依賴于MP-IgM 的檢測，有可能造成誤診或漏診。而IgG較IgM出現晚，在體內持續時間較長，可以作為回顧性診斷和亞急性感染狀態的指標，進行病原學追蹤。故需結合MP-DNA和MP-IgG以減少漏診和誤診，并進行病原學追蹤。

與MP-IgM相比，MP-DNA陽性率在發病初期就很高，且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響，而產生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發現，不少經臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒，僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現陽性，有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒，其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒，就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現的患兒[13]。因此，在發病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值，可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發病初期的陽性率較高，隨著治療和病情的轉歸，陽性率迅速下降轉陰，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內感染和復制的情況。通過觀察MP-DNA動態變化，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據[14]，故應聯合動態監測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態變化，發現患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復好轉其陽性率逐漸下降，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內的感染和復制情況，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據，可用于患兒病情轉歸的預測評估。

綜上所述，臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高診斷的特異度和靈敏度，減少漏診和誤診的發生，使患者得到早期正確的診斷及治療，而動態檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在診斷中優勢互補，又可了解疾病的病程及轉歸情況，為臨床診斷治療提供參考。

[參考文獻]

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（收稿日期：2013-11-26 本文編輯：袁 成）

國內普遍認為，MP-IgM在感染3～7 d后出現，比MP-IgG出現早，提示MP近期和當前感染，但MP-IgM陽性并不總是表示當前的感染狀態，部分患者可達半年之久，在某些病例中，MP-IgM 在感染1年后仍然持續存在；另外，MP-IgM 在再次感染MP后含量極微，或者無法檢測到[9]。MP-IgM抗體的檢測受多種因素的影響。①年齡：嬰幼兒免疫系統尚處于發展期，發育還未完全，在MP感染后患兒抗體生成不足，影響抗體檢出陽性率；②病程：抗原刺激機體免疫應答產生抗體需要一段時間，MP-IgM抗體發病1周左右時才開始上升，對于病程<1周的患兒，檢測MP-IgM抗體時容易造成漏診、誤診；③機體免疫狀態：對于免疫功能低下的患兒，其免疫反應低，IgM升高幅度很小，導致MP-IgM抗體的陽性率低。因此，血清MP-IgM抗體的檢測在臨床應用中有一定的局限性[7，10]，僅依賴于MP-IgM 的檢測，有可能造成誤診或漏診。而IgG較IgM出現晚，在體內持續時間較長，可以作為回顧性診斷和亞急性感染狀態的指標，進行病原學追蹤。故需結合MP-DNA和MP-IgG以減少漏診和誤診，并進行病原學追蹤。

與MP-IgM相比，MP-DNA陽性率在發病初期就很高，且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響，而產生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發現，不少經臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒，僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現陽性，有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒，其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒，就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現的患兒[13]。因此，在發病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值，可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發病初期的陽性率較高，隨著治療和病情的轉歸，陽性率迅速下降轉陰，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內感染和復制的情況。通過觀察MP-DNA動態變化，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據[14]，故應聯合動態監測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態變化，發現患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復好轉其陽性率逐漸下降，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內的感染和復制情況，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據，可用于患兒病情轉歸的預測評估。

綜上所述，臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高診斷的特異度和靈敏度，減少漏診和誤診的發生，使患者得到早期正確的診斷及治療，而動態檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在診斷中優勢互補，又可了解疾病的病程及轉歸情況，為臨床診斷治療提供參考。

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（收稿日期：2013-11-26 本文編輯：袁 成）

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與MP-IgM相比，MP-DNA陽性率在發病初期就很高，且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響，而產生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發現，不少經臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒，僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現陽性，有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒，其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒，就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現的患兒[13]。因此，在發病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值，可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發病初期的陽性率較高，隨著治療和病情的轉歸，陽性率迅速下降轉陰，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內感染和復制的情況。通過觀察MP-DNA動態變化，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據[14]，故應聯合動態監測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態變化，發現患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復好轉其陽性率逐漸下降，表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內的感染和復制情況，可以為臨床動態觀察治療效果提供依據，可用于患兒病情轉歸的預測評估。

綜上所述，臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高診斷的特異度和靈敏度，減少漏診和誤診的發生，使患者得到早期正確的診斷及治療，而動態檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在診斷中優勢互補，又可了解疾病的病程及轉歸情況，為臨床診斷治療提供參考。

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[9] 馬敏，曹蘭芳，陸偉蓉.血清MP-IgM、MP-IgA和MP-IgG在兒童肺炎支原體感染診斷中的意義[J].中華國際醫學雜志，2003，3（2）：4-6.

[10] 董傳莉，謝懷珍.不同年齡組支原體肺炎分析[J].蚌埠醫學院院報，2008，33（3）：333-335.

[11] 張曉波，陸愛珍.肺炎支原體熒光定量聚合酶鏈反應在肺炎支原體感染中的診斷評價[J].中華兒科雜志，2008， 46（6）：442-444.

[12] 尚曉云.兒童肺炎支原體感染的相關臨床問題[J].中國小兒急救醫學，2010，17（5）：385-389.

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（收稿日期：2013-11-26 本文編輯：袁 成）