血漿Apelin、血管緊張素Ⅱ與高血壓及早期腎損害的相關性研究*

周麗麗，朱鵬立，林帆，黃峰，高通，陳發林，黃建剛

血漿Apelin、血管緊張素Ⅱ與高血壓及早期腎損害的相關性研究*

周麗麗，朱鵬立，林帆，黃峰，高通，陳發林，黃建剛

目的：探討一種新的血管活性肽血漿Apelin和血管緊張素Ⅱ（Ang Ⅱ）水平在高血壓時的改變及其與高血壓早期腎損害的關系，為Apelin成為高血壓可能的治療靶點提供臨床研究數據。

Apelin；高血壓；血管緊張素Ⅱ；腎損害

(Chinese Circulation Journal, 2014,29:800.)

Apelin是1998年Tatemoto等[1]從牛胃提取物中分離出的一種新的血管活性多肽。許多動物實驗證實，Apelin與血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）的平衡參與了血壓的調節[2]。眾多基礎和臨床研究證實，AngⅡ參與高血壓早期腎損害的發生、發展[3]。尿微量白蛋白可以敏感地反映高血壓早期腎損害[4]，尿肌酐排泄穩定，隨機尿白蛋白與尿肌酐比值（UACR）更能反映尿白蛋白的排泄情況。但針對人群Apelin與AngⅡ的相關性及與血壓關系的臨床研究鮮見報道。本研究通過橫斷面調查，探討高血壓人群及非高血壓人群Apelin、Ang Ⅱ和UACR的水平，分析Apelin和AngⅡ的相關性及二者與血壓和UACR的關系。

1 資料與方法

研究對象：研究對象來源于2011-09至2011-11對福建省連江縣苔菉鎮的社區人群進行橫斷面調查，入選標準為年齡30歲以上、居住當地≥5年的常住居民。共納入671例，高血壓組317例，其中男性156例，女性161例，平均年齡（59.1±10.6）歲；非高血壓組354例，其中男性132例，女性222例，平均年齡（52.1±10.2）歲。糖尿病、腎臟病及兩周內服用任何可能影響 Apelin、AngⅡ水平的藥物者均未納入本研究。

體格檢查：直立、免冠、脫鞋、穿單衣情況下測量身高，并計算體重指數。腰圍（cm）：肋骨下緣與髂嵴連線中點水平周徑。血壓的測量：采用標準立式水銀柱血壓計，根據被檢者的上臂圍選擇適當袖帶，坐位，至少安靜休息10 min以上，測量右上臂收縮壓與舒張壓，重復三次取平均值。平均動脈壓=1/3收縮壓+2/3舒張壓。

血生化檢查：采集清晨空腹8～12 h血清標本，采用GPO-PAP法測定甘油三酯，CHOD-PAP法測定總膽固醇，直接法測定低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），尿酸酶紫外法測定尿酸，氧化酶電極法測定空腹血糖，苦味酸法（DxC800生化檢測儀，美國貝克曼庫爾特）測定血肌酐，散射比濁法（BNⅡ特定蛋白儀，德國西門子）測定超敏C反應蛋白（hs-CRP）；采集清晨空腹血漿標本，采用高效液相層析法（HA-8160全自動糖化血紅蛋白分析儀，日本ARKRAY）測定糖化血紅蛋白（HbA1c）。

尿白蛋白和尿肌酐檢查：晨起非應激、非運動狀態下留取第一次清潔中段尿標本，測定尿白蛋白和尿肌酐，計算UACR（mg/g）=尿白蛋白（mg/L）/尿肌酐（g/L）。

Apelin與血管緊張素Ⅱ：采集清晨空腹坐位2 h后血漿標本，酶聯免疫吸附法測定血漿Apelin水平[藥盒采用美國Phoenix Pharmaceuticals Inc生產的Apelin-12試劑盒（批號602803），最低測定濃度0.06 ng/ml，批內差異＜10%，批間差異＜15%]，光密度（OD）值的測定采用瑞士迪肯公司生產的TECAN Sunrise酶標儀；AngⅡ的測定采用放射免疫法（藥盒由中國北京北方生物技術研究所提供，批號 S10950163，濃度測定范圍 25～800 pg/ml，靈敏度 10 pg/ml， 批內變異系數＜10%，批間變異系數＜15%），放射性計數的測定采用中國安徽科大中佳生產的GC-1200 γ放射免疫計數儀。以上藥盒均在有效期內使用，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

診斷標準：根據《中國高血壓防治指南2010》診斷標準，高血壓：在未用抗高血壓藥情況下，收縮壓≥140 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）和/或舒張壓≥90 mmHg；患者既往有高血壓史，目前正在用抗高血壓藥，血壓雖然低于140/90 mmHg，亦診斷為高血壓[5]。根據《中國高血壓防治指南2010》診斷標準，UACR≥30 mg/g定義為微量白蛋白尿陽性[5]。

統計學方法：所有統計數據采用SPSS 17.0軟件處理。正態分布數據以均數±標準差表示，非正態分布數據以中位數（P25，P75）表示，非正態分布數據正態化（自然對數轉化法）后進入分析。組間比較采用獨立樣本t 檢驗，相關關系采用Pearson相關分析和控制混雜因素后多元線性回歸分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1兩組人群臨床特征比較

高血壓組年齡、收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、體重指數、腰圍、hs-CRP、血肌酐、尿酸、甘油三酯、總膽固醇、LDL-C、HbA1c、AngⅡ及UACR水平高于非高血壓組（P＜0.01），差異有統計學意義；HDL-C及空腹血糖兩組間差異無統計學意義（P＞0.05）。高血壓組的Apelin水平低于非高血壓組（P＜0.01）。表1

表1 兩組患者的一般臨床資料比較

表1 兩組患者的一般臨床資料比較

注：與非高血壓組比*P＜0.01。 LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇 HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇 UACR：尿白蛋白與尿肌酐比值 #：非正態分布資料以中位數（P25，P75）表示

項目 非高血壓組 (n=354) 高血壓組 (n=317)年齡 (歲) 52.1±10.2 59.1±10.6*收縮壓 (mmHg) 119.0±11.7 154.7±15.6*舒張壓 (mmHg) 75.7±7.9 90.7±9.7*平均動脈壓 (mmHg) 90.2±8.2 112.1±9.0*體重指數 (kg/m2) 23.6±3.3 25.2±3.6*腰圍 (cm) 79.2±1.2 83.4±1.1*高敏C反應蛋白 (mg/L)# 0.5 (0.3, 1.0) 0.8 (0.5, 1.9)*血肌酐 (umol/L) 64.5±15.8 74.6±27.6*尿酸 (umol/L) 312.5±81.8 333.8±92.8*甘油三酯 (mmol/L) 0.7 (0.5, 1.0) 0.8 (0.6, 1.2)*總膽固醇 (mmol/L) 5.0±0.9 5.2±1.0*LDL-C (mmol/L) 2.8±0.8 3.0±0.9*HDL-C (mmol/L) 1.3±0.3 1.2±0.4空腹血糖 (mmol/L) 5.1±1.0 5.3±1.0糖化血紅蛋白 (%) 5.6±0.5 5.8±0.5*Apelin (ng/ml)# 0.19 (0.16, 0.27) 0.18 (0.14, 0.23)*血管緊張素Ⅱ (pg/ml)# 61.4 (50.9, 74.5) 64.5 (53.4, 81.4)*UACR (mg/g)# 7.3 (3.6, 12.9) 18.9 (10.0, 32.4)*

2.2血壓水平與Apelin、血管緊張素Ⅱ的相關性分析

Pearson相關分析發現：平均動脈壓與Ln（Apelin）存在負相關（r=-0.133，P=0.001，圖1），平均動脈壓與Ln（Ang Ⅱ）存在正相關（r=0.166，P＜0.001，圖2）；采用多元線性回歸分析控制混雜因素對平均動脈壓和Ln（Apelin）關系的影響，結果顯示隨著控制因素的增加，平均動脈壓與Ln（Apelin）、Ln（Ang Ⅱ）的相關性均仍存在，β分別為-0.104和0.105（P＜0.01）。表2

表2 平均動脈壓與Ln（Apelin）、Ln（血管緊張素 Ⅱ） 的多元線性回歸分析

圖1 平均動脈壓與Ln（Apelin）Pearson相關分析散點圖

圖2 平均動脈壓與Ln（血管緊張素Ⅱ）Pearson相關分析散點圖

2.3Apelin和血管緊張素Ⅱ的相關性及多元線性回歸分析

Pearson相關分析發現：Ln（Apelin）與Ln（AngⅡ）存在負相關（r=-0.311，P＜0.001，圖3）。采用多元線性回歸，模型1：調整了年齡和性別；模型2：調整了年齡、性別、收縮壓和舒張壓；模型3：在模型2的基礎上調整了血脂、體重指數和腰圍；模型4：在模型3的基礎上又調整了超敏C反應蛋白、空腹血糖、糖化血紅蛋白、血肌酐和尿酸。Ln（Apelin）與Ln（AngⅡ）的相關性均仍存在，β分別為-0.311、-0.281、-0.280和-0.236（P＜0.05）。

2.4高血壓早期腎損害與Apelin和血管緊張素Ⅱ的關系

按UACR值將高血壓組317例患者分為高血壓未合并早期腎損害亞組（223例）和高血壓合并早期腎損害亞組（94例），高血壓合并早期腎損害亞組的Apelin水平低于高血壓未合并早期腎損害亞組（P＜0.05），AngⅡ水平高于高血壓未合并早期腎損害亞組（P＜0.01），差異均有統計學意義。表3

表3 兩亞組Apelin和血管緊張素Ⅱ水平比較

表3 兩亞組Apelin和血管緊張素Ⅱ水平比較

注：與高血壓未合并早期腎損害亞組比*P＜0.05；與高血壓未合并早期腎損害亞組比**P＜0.01

高血壓合并早期腎損害組Ln (Apelin) (ng/ml) 0.61±0.03 0.48±0.05*Ln (血管緊張素Ⅱ) (pg/ml) 4.14±0.02 4.40±0.05**項目 高血壓未合并早期腎損害亞組

Pearson相關分析發現：Ln（UACR）與Ln（Apelin）存在負相關（r=-0.188，P=0.001，圖4），Ln（UACR）與Ln（Ang Ⅱ）存在正相關（r=0.393，P＜0.001，圖5）；多元線性回歸示：隨著控制因素的增加，Ln（UACR）與Ln（Apelin）、Ln（AngⅡ）的相關性均仍存在，β分別為-0.115（P＜0.05）和0.346（P＜0.01）。表4

圖4 Ln（UACR）與Ln（Apelin）Pearson相關分析散點圖

圖5 Ln（UACR）與Ln（血管緊張素Ⅱ）Pearson相關分析散點圖

表4 Ln（尿白蛋白與尿肌酐比值）與Ln（Apelin）、Ln（血管緊張素 Ⅱ）的多元線性回歸分析

3 討論

Apelin是一種心血管活性肽，作為一種循環和旁分泌激素，廣泛分布于心臟、肺臟、腎臟、中樞神經系統、脂肪組織等，尤其是大血管的內皮細胞及血管平滑肌細胞[6]。Apelin通過與血管緊張素受體AT1相關受體蛋白（APJ）結合，起著擴張血管并參與血壓的調控[7]，許多動物實驗和人群的研究已經證明了Apelin的血壓調節作用[8-11]。本研究發現高血壓組Apelin濃度低于正常對照組，血壓水平與Apelin水平呈線性負相關，調整了混雜因素后這種相關性仍存在，針對本人群的研究結果也提示了Apelin的血壓的調控作用。

離體大鼠門靜脈環舒縮實驗中發現：在內皮完整的大鼠靜脈，Apelin-13能抑制Ang Ⅱ介導的血管收縮反應，并且隨著Apelin的濃度升高，抑制程度也越顯著，但這種抑制效應能被NO合成酶抑制劑所阻斷[12]。在SHR中也觀察到，Apelin/ APJ 系統水平增高表現為反向調節Ang Ⅱ-AT1R信號途徑作用，導致AT1R 表達降低和NO 的滅活減少[13,14]。本研究結果提示，血壓與Apelin水平呈負相關，與Ang Ⅱ呈正相關，Apelin水平和Ang Ⅱ在逐步調整了心血管危險因素后仍呈負相關，我們的研究結果也提示了，Apelin和Ang Ⅱ的平衡在血壓的調節中起著重要作用，結合基礎研究，這種平衡失調導致NO的滅活減少可能是Apelin系統血壓調節作用的途徑之一。

基礎研究表明，Ang Ⅱ通過多條通路促使內皮細胞功能失調和動脈粥樣硬化發生[15]，同樣也作用于腎動脈。在對腎小球入球小動脈的離體實驗中發現：APJ在腎小球內皮細胞、足細胞、集合管等部位均有表達，Ang Ⅱ刺激后入球小動脈血管直徑較基礎條件下明顯縮小，1 min后再給予Apelin刺激則血管直徑又明顯擴張[16]。本研究結果發現，在高血壓人群中合并早期腎損害的人群Apelin水平低于未合并早期腎損害的人群，而Ang Ⅱ水平高于高血壓未合并早期腎損害人群，在高血壓人群UACR與Apelin存在負相關，與Ang Ⅱ存在正相關。因此，推測Apelin及其受體參與腎臟血流的調節并影響高血壓早期腎損害可能與Ang Ⅱ及其受體系統有關。

總之，本研究發現在高血壓及高血壓早期腎損害人群Apelin水平下降，Apelin與Ang Ⅱ存在負相關關系，為Apelin成為高血壓可能的治療靶點提供臨床研究數據。

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Relationship Between Plasma Apelin and Angiotensin II With Hypertension and Hypertension Caused Early Renal Damage

ZHOU Li-li, ZHU Peng-li, LIN Fan, HUANG Feng, GAO Tong, CHEN Fa-lin, HUANG Jian-gang.
Department of Geriatric Medicine, Fujian Provincial Hospital, Fuzhou (350001), Fujian, China

ZHU Peng-li, Email: zpl7755@gmail.com.

Objective: To explore the relationship of plasma apelin and angiotensin II (Ang II) with hypertension and hypertension caused early renal damage in order to provide the information for hypertension treatment.Methods: A total of 671 participants were enrolled in this cross-sectional community investigation. All participants were above 30 years of age with local residency longer than 5 years and were divided into 2 groups: Control group, n=354 nonhypertension subjects and Hypertension group, n=317 patients with essential hypertension. The levels of apelin, Ang II, urine creatinine and urinary albumin were examined. The relationship between blood pressure and the ratio of urinary albumin to urine creatinine (UACR) and the relationship between blood pressure and apelin, Ang II were studied by Pearson correlation analysis and multi linear regression analysis.Results: Compared with Control group, Hypertension group had the lower levels of apelin and higher UACR, both P＜0.01. The mean arterial pressure (MAP) was negatively related to Ln (apelin), positively related to Ln (Ang II), both P＜0.01. With adjusted gender, age and blood lipids, the above relationship still existed. In Hypertension group, the patients combining with the early renal damage had the lower level of apelin and higher level of Ang II, both P＜0.01. The relevant analysis indicated that Ln (UACR) was negatively related to Ln (apelin), positively related to Ln (Ang II), both P＜0.01. With adjusted gender, age, MAP and blood lipids, the above relationship still existed.Conclusion: The patients with hypertension or hypertension caused early renal damage have decreased apelin. Apelin is negatively related to Ang II, therefore, apelin might be used as a target for hypertension treatment in clinical practice.

Apelin; Hypertension; Angiotensin II; Renal damage

2014-01-15）

（助理編輯：許菁）

福建省科技計劃重點項目（2010Y0013）；福建省科技計劃重點項目（2013Y0023）；福建省衛生廳醫學創新課題(2012-CX-1)

350001 福建省福州市，福建省立醫院 老年科 福建醫科大學省立臨床醫學院 福建省臨床老年病研究所（朱鵬立、周麗麗、林帆、黃峰），核醫學科（高通），臨床檢驗中心（陳發林、黃建剛）

周麗麗 住院醫師 碩士 研究方向：高血壓及動脈硬化 Email：wmhf0327@126.com 通訊作者：朱鵬立 Email：zpl7755@gmail.com

R54

A

1000-3614（2014）10-0800-05

10.3969/j.issn.1000-3614.2014.10.011

方法：研究對象來源于社區人群的橫斷面調查，入選標準為年齡30歲以上，居住當地≥5年的常住居民，共納入671例，其中高血壓組317例，非高血壓組354例。所有研究對象進行Apelin、AngⅡ、尿肌酐和尿白蛋白等檢測。Pearson相關分析及多元線性回歸分析血壓、尿白蛋白與尿肌酐比值（UACR）與Apelin和AngⅡ的關系。

結果：高血壓組的Apelin水平低于非高血壓組（P＜0.01），AngⅡ和UACR水平高于非高血壓組（P＜0.01）；平均動脈壓與Ln（Apelin）存在負相關（P＜0.01），與Ln（Ang Ⅱ）存在正相關（P＜0.01），此相關性在調整性別、年齡和血脂等影響因素后仍存在；Ln（Apelin）與Ln（Ang Ⅱ）存在負相關（P＜0.01），此相關性在調整了年齡、性別、血壓和血脂等混雜因素后仍然存在；在高血壓組，合并早期腎損害者的Apelin水平偏低（P＜0.05），Ang Ⅱ水平偏高（P＜0.05）。相關性分析顯示Ln（UACR）與Ln（Apelin）存在負相關（P＜0.01），與Ln（Ang Ⅱ）存在正相關（P＜0.01），此相關性在調整了性別、年齡、平均動脈壓和血脂等混雜因素后仍存在。

結論：高血壓及高血壓早期腎損害人群Apelin水平下降，Apelin與AngⅡ存在負相關關系。