藏藥“桑蒂”抗肝損傷作用機制研究

孟憲華，陳德道，張櫻山，劉鴻雁，李智勤，拉毛卓瑪

西藏奇正藏藥股份有限公司，甘肅 蘭州 730000

藏醫大師宇妥·云丹袞波在最早的藏醫經典著作《醫學四續》中將肝病分為紅色增盛肝病、隱性肝病、類中毒肝病、水竄肝病、肝盜癥、肝血下落、肝血外溢、脊椎僵直肝病、黑痹肝病、消瘦肝病、白隔膜病、黑隔膜病、壞血散布肝病、肝風病、肝萎病、濕寒肝病、牛屈肝病、寒脹肝病等18種，并對每種肝病的癥狀、治法均有詳細論述，其中在隱性肝病、類中毒肝病的治法中應用“桑蒂”配伍

組方治療［1］，說明藏醫先祖在一千多年前就認識到“桑蒂”在肝膽病的治療方面有獨特療效。隨著醫藥學和化學工業的發展，近代醫藥工作者根據藏醫應用“桑蒂”治療肝膽病的臨床經驗，對“桑蒂”抗肝損傷的作用機制進行了相關研究，取得了一定進展。

1“桑蒂”抗肝損傷作用機制研究現狀 “桑蒂”是青藏高原藏藥八珍之一，藏文名為，藏譯音中文名有“桑蒂”［2］“甲蒂”［2］“桑滴”［3］“滴達”［3］“蒂達”［4］“桑斗”［5］等。據文獻記載及調查結果，商品“桑蒂”主要包括龍膽科獐牙菜屬(Swer tia)的多種植物［6］。目前具有法定質量標準，市場上流通的“桑蒂”類藥材主流品種有川西獐牙菜、印度獐牙菜、普蘭獐牙菜、紫紅獐牙菜及其他地方習用品［7-8］。

“桑蒂”類藥材具有清熱、解毒，清肝利膽的功效。臨床上用于治療消化不良、膽囊炎、各型肝炎、急性骨髓炎、急性菌痢、急性結膜炎、急性咽喉炎及燙傷，也用于風火牙痛、熱淋等癥的治療［9］，藏藥標準中多種治療肝膽疾病的藏成藥制劑都有“桑蒂”作為配方生產原料。衛生部藏藥標準［2］共收載藏藥成方制劑200種，其中含有“桑蒂”(統稱獐牙菜)配伍的品種就有33種，占16.5%，如五味獐牙菜湯散［2］、九味獐牙菜丸［2］、二十五味珊瑚丸［2］、二十五味獐牙菜丸［2］、八味主藥散［2］、十味訶子湯散［1］、七味紅花殊勝散［1］、九味牛黃丸［1］、十九味草果散［1］、紫金肝泰膠囊［10］、乙肝寧片［10］等，只要是治療肝膽疾病的藏藥成方制劑，就有“桑蒂”類藥材配伍，足見其在治療肝膽疾病方面具有不可替代的作用。

由于“桑蒂”類藥材在治療肝膽類疾病方面療效顯著，多年來，不少化學和醫藥學研究工作者對“桑蒂”類藥材的化學成分和藥理作用進行了廣泛深入的研究［8-10］，證明“桑蒂”的主要有效成分有呫噸酮類、環烯醚萜類、齊墩果烷型三萜類等，現代藥理研究表明其具有抗菌消炎、抗肝損傷、抗病毒等多種作用。

盡管民族藥已經有數千年的臨床應用歷史，但到目前為止，其作用機制尚未完全闡明。典型民族藥多為復方制劑，每一味藥中又有多種成分，而民族藥的精妙之處還在于君臣佐使的配伍，多味藥物相互作用后協同、制約或改性，作用機制遠較西藥復雜得多。由于民族藥化學成分復雜，無法像化學藥那樣闡明其在體內發揮療效的藥效物質基礎，嚴重制約了民族藥走向國際市場的步伐，成為實現民族藥現代化的主要瓶頸。在醫學科學飛速發展的今天，若不能用現代技術語言闡明民族藥的作用機制，難以實現民族藥的現代化，就難以打開國際市場，故此，不少醫藥工作者對傳統藏藥“桑蒂”抗肝損傷方面的作用機制進行了廣泛深入的研究。

2“桑蒂”抗肝損傷作用機制研究

2.1 治療急性黃疸型肝炎 急性黃疸型肝炎是由肝炎病毒使肝細胞破壞、肝組織破壞重構、膽小管阻塞，導致血中結合膽紅素與非結合膽紅素增高所引起的皮膚、黏膜和眼球鞏膜等部分發黃的癥狀。

發病原因主要是肝炎病毒侵犯肝臟，并在肝細胞內復制，在機體免疫反應作用下，使肝細胞受到損害，影響了肝臟的膽紅素代謝，使膽紅素隨血液運行到身體各個臟器，其中，含有豐富彈性硬蛋白的鞏膜、皮膚最易顯出黃色，而黃染消退也較其他組織緩慢。

藏區部分地區藏醫作為“桑蒂”使用的花錨［11］具有清熱利濕，平肝利膽的功效，用于急性黃疸型肝炎，膽囊炎等的治療，其對急性黃疸型肝炎的保護作用，主要是促進肝細胞再生，使壞死組織修復，減輕肝脂肪變性，使肝功能恢復，這是花錨治療肝炎的藥理學基礎。組織化學觀察證明，花錨能使實驗性肝損傷的肝細胞內糖元含量增加，呈顆粒狀或塊狀，肝細胞的核糖核酸含量增多，呈細粒狀、粗桿狀，甚至塊狀，提示花錨可能有助于肝細胞蛋白質的合成及組織修復。

2.2 治療免疫性肝損傷 免疫性肝損傷是患者肝臟本身的免疫耐受性減退，不能識別自身肝組織(抗原)成分而產生自身免疫反應所引起的一種不能自然痊愈的肝損傷。

川西獐牙菜的醇提物［12］能有效防止免疫性肝損傷小鼠模型各臟器的免疫性肝損傷，研究人員認為小鼠免疫性肝損傷的病理機制與人肝炎的免疫功能紊亂相似，川西獐牙菜保肝、降酶的作用可能與其對機體的免疫調節功能的影響有關。

“桑蒂”類所含的主要有效成分龍膽苦苷［13］，具有較好的保肝作用，可降低各種肝損傷模型的血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)等；龍膽苦苷具有抗氧化作用和細胞保護作用，可使CCl4引起的肝損傷轉氨酶有下降趨勢；硫代乙醇胺(TAA)干擾RNA從細胞核到細胞質的轉運過程，影響蛋白質的合成，龍膽苦苷能保護肝細胞膜，降低TAA對肝臟的侵害作用，不致于使細胞的離子環境破壞，導致肝細胞壞死；D-氨基半乳糖(D-Gal)進入體內后與磷酸尿苷結合，形成UDP-半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，細胞受損，Ca2+內流，同時龍膽苦苷可降低尿嘧啶核苷酸合成，使D-Gal所致肝損傷的ALT、AST下降，降低肝臟損傷。

2.3 治療急性肝損傷 急性肝損傷是各種肝臟疾病所產生的病變結果。臨床上造成急性肝損傷的原因主要有病毒感染、服用藥物不當、食物添加劑、乙醇攝入過量、誤服有毒食物、放射線損傷等。

肝損傷的機制主要是脂質過氧化，氧自由基引起膜結構和功能完整性的破壞還可抑制細胞膜和微粒體膜上鈣泵的活性，使Ca2+內流增加，造成肝細胞脂質過氧化性損傷，從而引起中毒死亡。肝組織丙二醛(MDA)為脂質過氧化產物之一，MDA含量的增加或減少間接反映了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度。

川西獐芽菜醇提物［14］中主要活性成分齊墩果酸、芒果甙、藏茵陳酮可顯著降低急性肝損傷模型小鼠血清ALT、AST活性和肝組織MDA含量，具有明顯的抗肝損傷作用，能誘導細胞、血管內皮細胞釋放NO，使血管擴張，改善微循環，減輕血小板聚集、線粒體損傷，調節枯否氏細胞的代謝，從而對肝臟的血液動力學及形態結構、功能、代謝起到調節和保護作用。

含有川西獐牙菜的藏茵陳膠囊粉末溶液［15］可使小鼠肝及腸系膜微循環血流加速，保證了營養物質的供給，緩解了血小板聚集、線粒體損傷，通過調節血供，對肝及周圍器官脾臟、腸的機能、代謝活動起保護作用。另外，藏茵陳膠囊粉末溶液使抗氧化物NO與谷氨酸氧化還原調節部位的巰基相結合，使亞硝酸化形成二硫鍵，調控離子通道，避免細胞內Ca2+超負荷所致毒性，從而減輕肝細胞損害程度，肝臟的功能趨于正常，恢復凝血與抗凝血之間的動態平衡(肝臟幾乎合成全部的凝血因子)，使凝血時間縮短，明顯減輕CCl4引起的肝臟、脾、腸的損害作用。因此改善血液循環、清除自由基，抗氧化是其發揮保護作用的主要機制。

“桑蒂”類水溶性成分中的呫噸酮苷為保肝的主要成分，實驗證實2，3，5-三甲氧基-1-O-櫻草糖氧基呫噸酮，2，3，4，5-四甲氧基 -1-O-櫻草糖氧基呫噸酮，2，3，4，7-四甲氧基 -1-O-櫻草糖氧基呫噸酮［16］對CCl4造成小鼠急性肝損傷的肝細胞組織學病變均有較好的修復作用，表明這三種呫噸酮苷促進了糖元合成途徑或提高了糖元儲備能力，從而較好地控制肝細胞壞死和促進損傷肝細胞的修復，有效保護肝細胞，避免有毒物質的侵害和自由基大量的產生，從而提高肝細胞糖元的合成或儲備能力。

龍膽苦苷［17］可顯著抑制由CCl4和D-Gal所致急性肝損傷小鼠ALT升高，從而對肝臟起保護作用。一般認為D-Gal肝損傷是由于消耗提供尿苷合成的尿苷二磷酸及核糖核酸材料尿苷，導致糖原及RNA、蛋白質合成障礙，引起肝細胞壞死。鑒于龍膽苦苷明顯增加谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力，該成分的保肝機制與其對抗自由基脂質過氧化密切相關。大鼠口服龍膽苦苷后，能明顯增加膽汁分泌量和膽汁中膽紅素濃度，作用時間可持續3小時以上。利膽而促進膽紅素的排泄是龍膽苦苷治療濕熱黃疸的主要機制之一。

“桑蒂”所含的主要藥效成分之一齊墩果酸［18］對環磷酰胺(CP)所致大鼠肝細胞損傷具有保護作用，齊墩果酸能抑制酶的滲出，且能顯著升高受損肝細胞活力，這可能與齊墩果酸通過抑制CP經肝藥酶的代謝活化及維持細胞膜穩定性和促進肝細胞再生有關。

2.4 治療慢性肝損傷 紫紅獐牙菜［19］能降低血清ALT、AST的含量及肝臟指數，一定程度緩解肝臟纖維化病理改變，同時對總蛋白降低有一定升高作用，紫紅獐牙菜對慢性肝損傷具有明顯保肝降酶作用，可防止肝纖維化的進行性發展，對延緩和治療慢性肝硬化有重要作用。

2.5 治療肝缺血-再灌注損傷(HIRI) 缺血器官、組織重新獲得血液供應，不僅不能使組織、器官功能恢復，反而加重了功能代謝障礙及結構破壞，這種現象稱之為缺血-再灌注損傷。

NO水平下降和O2水平升高而引發的脂質過氧化反應是HIRI的主要發病機制，肝臟缺血期，組織含氧量減少，作為電子受體的氧不足，再灌注恢復氧供應提供了大量的電子受體，使氧自由基在短時間內爆發性增多，導致肝細胞膜脂質過氧化及肝細胞損傷。

川西獐牙菜［20］治療大鼠HIRI的作用可能為誘導肝細胞、血管內皮細胞釋放NO，NO可中和O2而拮抗過氧化作用，使血管擴張，改善微循環，保證了再灌注后肝臟的血供和營養物質的供給，減輕血小板的聚集，線粒體損傷，調節枯否氏細胞的代謝，從而對肝臟的血液動力學及形態結構、功能、代謝起到調節和保護作用。

醫藥工作者從印度獐牙菜中分離得到的有效成分 1-羥基 -2，3，4，6-四甲氧基 -呫噸酮［21］對HIRI有明顯治療作用。研究表明，黃酮類抗氧化劑主要通過酚羥基與氧自由基反應，形成共振穩定的半醌式自由基而阻斷自由基鏈式反應，從而抑制了脂質過氧化，清除了H2O2，減少了引起脂質過氧化的危險，從而保護了生物膜。給予呫噸酮后，缺血再灌注大鼠血清的抗氧化酶活性明顯增加，MDA含量降低，說明該呫噸酮可以抑制自由基的產生，提高抗氧化酶活性，這是缺血腦組織保護作用的機理之一。

“桑蒂”所含的另一有效成分齊墩果酸［22］具有減輕CCl4、對乙酰氨基酚及鎘中毒所致肝損傷的作用。齊墩果酸能增加肝細胞糖原儲備，減少自由基釋放，從而有效減輕HIRI。缺血-再灌注主要通過激活經典的NF-κB通路，進而激活促炎信號轉導通路造成細胞損害。NF-κB是缺血組織中調節細胞因子、炎癥趨化因子和黏附分子的一個重要因素，其活化可加速促炎癥反應因子的釋放，抑制NF-κB活化進入核內可以負向調節促炎癥細胞因子(如 TNF-α、IL-1等)、黏附分子(如 ICAM-1)和誘生型NO合成酶的生成，減輕肝臟炎癥反應程度，從而減輕HIRI；齊墩果酸可抑制缺血再灌注過程中IKK/I-κB/NF-κB信號轉導通路的激活，抑制NF-κB活化入核而發揮介導炎癥反應的作用，從而減輕HIRI的程度。許仄平等［23］認為，HIRI過程中，體內氧化系統被激活，抗氧化系統被過度消耗，從而使活性氧大量生成，齊墩果酸能抑制HIRI過程中活性氧的生成和釋放，而活性氧的減少可進一步減少NF-κB的激活，抑制 NF-κB/I-κB/IKK信號轉導通路，干預NF-κB的激活，從而發揮抗HIRI作用。

3結論

肝損傷是臨床常見疾病，“桑蒂”作為治療肝膽疾病的傳統民族藥物，被醫藥工作者高度重視，對“桑蒂”及其化學成分龍膽苦苷、齊墩果酸、芒果苷及多種呫噸酮等治療免疫性肝損傷、急性黃疸型肝炎、急性肝損傷、慢性肝損傷，肝缺血-再灌注損傷等都進行了臨床研究，并探討了作用機理。

隨著藏藥制劑的現代化研究和藥品質量標準的提升，對藥材基源和治療性成分的研究日益重視，但對“桑蒂”中不同藥材抗肝損傷作用的差異性的研究尚未見報道。而對“桑蒂”抗肝損傷作用的研究主要停留在提取物水平，對所含化合物的研究較少，今后應加強化合物發揮抗肝損傷作用的內源性分子靶點的研究，只有在分子水平上研究抗肝損傷作用機制，才能找到問題的本質，成為“桑蒂”抗肝損傷作用機制研究的發展方向。

據估計［13］目前世界上用于治療肝炎的藥物有500種之多，但至今尚無一種藥物能真正根治肝炎。因此，開發和篩選對肝臟有確切保護作用的新藥，仍是一項十分艱巨的工作，對藥物抗肝損傷的作用機制進行深入研究，對新藥開發將產生重要意義，將會使含有該藥材的中成藥的現代化研究發展到新的水平。

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