十個杏鮑菇菌株栽培試驗與子實體的營養成分分析*

張海軍 黃民鳳, 2 羅智勇 鄭雪平 夏志蘭,2**

?

十個杏鮑菇菌株栽培試驗與子實體的營養成分分析*

張海軍1，2黃民鳳1, 2羅智勇1鄭雪平3夏志蘭1,2**

（1.湖南農業大學園藝園林學院，長沙 410128；2.國家中醫藥管理局亞健康干預技術實驗室，長沙 410128；3.北京市正興隆生物科技有限公司，北京 102211）

通過對10個杏鮑菇菌株進行出菇試驗，觀察生長情況、農藝性狀，測算生物轉化率和營養成分含量，篩選出優勢菌株3號“佳豐”和4號“ZX00-1”，這兩個菌株菌絲長勢、生物轉化率均優于其他菌株，且營養成分含量高，具有較高藥用價值和經濟價值。

杏鮑菇；農藝性狀；生物轉化率；生物學特征；營養成分

杏鮑菇（）又名刺芹側耳，隸屬傘菌目、側耳科、側耳屬[1]。中醫認為，杏鮑菇有益氣、殺蟲和美容作用，可促進人體對脂類物質的消化吸收和膽固醇的溶解，對腫瘤也有一定的預防和抑制作用[2]。杏鮑菇含有利尿、健脾胃、助消化的酶類，有強身、滋補、增強免疫力的功能[3]。其含有的大量寡糖，可與胃腸中的雙歧桿菌一起作用，具有很好的促進消化、吸收的功能，是老年人和心血管疾病與肥胖癥患者理想的營養保健食品。

杏鮑菇質地脆嫩，營養豐富，與香菇、銀耳和黑木耳相比，蛋白質含量和灰分含量較高，甘露醇、游離氨基酸含量豐富，而脂肪含量和總糖含量較低[4]。林衍銓等人分析杏鮑菇子實體蛋白質的含量、氨基酸組成，得出杏鮑菇含有17種氨基酸（未測色氨酸），其中7種是人體必需氨基酸，占氨基酸總量的42%以上，符合世界衛生組織（WHO）提出的蛋白模式必需氨基酸（E％）總量應達到40％左右的要求，具有很高的營養價值[5]。

本試驗通過對收集的10個杏鮑菇菌株進行菌絲培養，觀察測定各菌株的菌絲長勢及所做的出菇實驗，分析各菌株子實體的生物轉化率、營養成分的含量，挑選出最具藥用和生產價值的優勢杏鮑菇菌株。

1 材料和方法

1.1 菌株來源 10個杏鮑菇菌株（表1）均由湖南農業大學食用菌研究所和國家中醫藥管理局亞健康干預技術實驗室提供。

1.2 培養基配方 母種PDA培養基（加富）：葡萄糖20 g，馬鈴薯200 g，瓊脂粉20 g，蛋白胨2 g，MgSO40.5 g，KH2PO41 g，蒸餾水1 000 mL，pH 6.5～7.0。液體菌種培養基：葡萄糖20 g。馬鈴薯200 g，蛋白胨2 g，MgSO40.5 g，KH2PO41 g，蒸餾水1 000 mL，pH 6.5～7.0。栽培種培養基：木屑30%，玉米芯30%，麥麩18%，棉籽殼14%，豆粕6%，輕質碳酸鈣1%，石灰1%，含水量62%～63%，pH 6～7。

1.3 主要儀器設備 UV-1800分光光度儀、冰箱、電熱爐、搖床、電子天平、恒溫水浴鍋、YXQS46280型高壓蒸汽滅菌鍋、旋轉蒸發器、凱氏定氮儀、超凈工作臺、低溫控制空調、增濕儀、離心機、干燥箱。

1.4 試驗方法

（1）菌種擴繁。對杏鮑菇菌種進行擴繁，將擴繁的試管種放入20～25 ℃培養室中黑暗培養，空氣相對濕度控制在60%左右。每天觀察菌絲生長狀態，記錄其生長速率。

（2）接種與菌絲培養。按照栽培種培養基配方制備菌瓶，于121 ℃高壓蒸汽滅菌3 h。菌料溫度降到26 ℃以下時在超凈工作臺接種，將不同菌株的液體菌種依次轉接到菌瓶中。平均每個菌瓶裝料870 g，每個菌株30瓶重復。控制培養室溫度在20～23 ℃，濕度在60%～66%，黑暗培養。2～3天后開始檢查菌絲生長情況，及時清理污染的菌瓶。當菌絲封住料面并吃料2 cm左右時，每3天檢查1次，并進行通風換氣，空氣濕度低于50%時，通過增濕儀補充空氣濕度。測量記錄各杏鮑菇菌株的菌絲生長速率、生長勢、污染率及滿瓶時間。

（3）出菇管理及采收。菌絲滿瓶后，經6～10天后熟再進行搔菌，搔菌后控制溫度18～20 ℃，濕度80%～85%。當菌絲恢復生長出現透明或黃色水珠時，表明已達到生理成熟，要進行溫差、光照刺激處理。控制溫度12～15 ℃，光照500～800 lx，濕度85％～90％，CO2濃度1 000 mL/m3（ppm）以下，約7～10天形成菇蕾。菇蕾長3 cm左右時進行疏蕾，一般每瓶留1～2個菇蕾。疏蕾后控制溫度15～18 ℃，空氣相對濕度85%～90%，CO2濃度2 000～4 000 mL/m3。每天通風情況根據菇型來決定，試驗只觀察記錄各菌株第一潮菇從現蕾到采摘的相關情況。從接種到第一潮菇采收需50～60天。采收以菌蓋基本展開且菌蓋邊緣不上翹、菌蓋中心不下凹為標準。

（4）計算生物轉化率。子實體采收后，立即稱量鮮重，每個菌株30袋，計算其平均值。生物轉化率/% = 子實體鮮重/培養料濕重×100。

（5）營養成分含量測定。粗多糖含量測定：把杏鮑菇子實體切片，在70 ℃下烘12 h至恒重，粉碎過40目篩，得子實體干粉。采用熱水浸提、乙醇沉淀法提取多糖：稱取子實體干粉1 g，按照料液比1∶20加入蒸餾水，90 ℃恒溫水浴浸提3 h，3 000 r/min離心15 min，合并上清液，用旋轉蒸發器對上清液進行蒸發濃縮至原體積的1/4，加入3倍體積的90%乙醇沉淀24 h，6 000 r/min離心5 min，得白色沉淀物，真空干燥得到杏鮑菇粗多糖粉末，重復3次。粗多糖得率/% = 多糖總重/杏鮑菇子實體干重×100。

游離氨基酸含量測定：把杏鮑菇子實體切成碎片，在70 ℃下烘12 h至恒重，粉碎過40目篩，得子實體干粉。加入5 mL乙酸鋅溶液和5 mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，定容至刻度，靜止沉淀后，過濾，濾液備用。分別精確移取過濾后濾液1.0 mL注入25 mL的容量瓶中，加入0.5 mL的pH 8.0的索倫遜緩沖液和0.5 mL的2%茚三酮溶液，在沸水浴中加熱15 min，靜置10 min，冷卻至室溫后，用蒸餾水定容到25 mL，混勻。以空白試劑做對照，于波長570 nm處測定吸光度。

蛋白質含量測定：把杏鮑菇子實體切成碎片，在70 ℃下烘12 h至恒重，粉碎過40目篩，得子實體干粉。準確稱取已干燥的子實體試樣0.2 g（精確至0.001 g）于消解罐中，加入濃硫酸5 mL和雙氧水1.5 mL，輕搖，靜置2 min旋緊密封蓋，于0.6 MPa壓力下消解3 min，同時做空白試驗。消解完畢，取出消解罐冷卻后，將消解液置于50 mL容量瓶中，定容，搖勻。取10 mL經消化的樣品溶液進行蒸餾，加入10 mL 40%的氫氧化鈉溶液，使蒸餾器內的溶液變為棕色為止。餾出液用0.100 mol/L鹽酸標準溶液滴定，吸收液顏色由藍色變為紫紅色為滴定終點，計算蛋白質含量。

2 結果與分析

2.1 菌絲生長速率 采用劃線法，每5天測量一次菌絲長度，以總長度除以天數，為菌絲生長速率，重復3次，取平均值。

從表1可以看出，10號菌株的菌絲長勢強，其次為菌株2、3、4、5、6、9號；菌絲滿瓶時間4、9、10號菌株較快，為24天。綜合分析，10號菌株菌絲長勢較好。

表1 各杏鮑菇菌株的菌絲生長情況及子實體生物轉化率

注：＋＋＋＋表示菌絲體生長勢最強，＋＋＋表示菌絲體生長勢強，＋＋表示菌絲體生長勢一般。

2.2 生物轉化率 菌株1、3、4、8、10號的生物轉化率高，達到40%以上（表1）。特別是3號，轉化率高達49.4%，可作為優質杏鮑菇菌株，投入大規模生產，以獲得較大效益。

2.3 營養成分含量 各菌株子實體營養成分含量分析結果（表2）表明，3、4號菌株的粗多糖、游離氨基酸和蛋白質含量較高，其次是菌株1、8、10號。綜合分析，4號菌株子實體的營養成分含量較高，每100 g干品含粗多糖5.002 g，游離氨基酸2.758 g，蛋白質21.713 g，最適合作為藥用型菌株栽培。

表2 各杏鮑菇菌株子實體的營養成分含量（g）

3 小結與討論

通過比較10個杏鮑菇菌株的菌絲長勢、子實體農藝性狀及營養成分，發現3號和4號的長勢好，生物轉化率高，粗多糖、游離氨基酸以及蛋白質含量高。而兩者中，4號的菌絲長勢和營養成分優于3號，但產量次于3號。綜合考慮，3號杏鮑菇菌株較適合用于工廠化生產，經濟效益高；4號菌株藥用價值高、品質好。

為進一步提升杏鮑菇品質、縮短生產周期、提高生產效率，今后的研究重點應集中在以下幾個方面：①利用分子生物學和微生物學手段，通過細胞和基因研究，探索杏鮑菇菌絲扭結成菇、有性孢子兩兩融合的過程等關鍵環節，全面了解杏鮑菇的生理生長過程；②收集更多國內外的主栽杏鮑菇菌株及野生菌株，開發相關菌種SSR、AFLP、SNP等分子標記技術，進行 DNA指紋圖譜分析，建立多個遺傳背景差異顯著且具備優良品質的核心種質資源庫，完善杏鮑菇新品種選育理論與技術體系；③研究杏鮑菇不同生長時期對環境要求變化的規律，為大規模工廠化生產提供參考依據。

[1] 黃年來. 一種市場前景看好的珍稀食用菌一杏鮑菇[J].中國食用菌, 1998, 17(6): 3～4.

[2] 郭美英. 杏鮑菇的特性與栽培技術研究[J]．食用菌，1998, 20(5): 11～12.

[3] 陳士瑜．側耳類栽培新技術[M]．上海: 上海科學技術文獻出版社, 2005: 19~20.

[4] MO H Z, XU Z Q, YAN M C, et a1．biological activities analysis and antibacterial activity of the indigenous pleurotus eryngii [J]．Agro Food Industry Hi Tech, 2005, 16(6): 16～18.

[5] 馬桂珍, 周超, 王增池. 對食用菌菌種業健康發展的思考[J]. 北方園藝, 2010 (3): 213～215.

杏鮑菇新品種選育及工廠化高效生產關鍵技術集成與示范。項目編號： 2012BAD16B022

，E-mail: 695218379@qq.com。

S646.1

A

2095-0934（2014）01-038-03