10歲犬瘟熱病例的診斷

包喜軍，劉文春，葉俊華

（1.公安部南京警犬研究所，江蘇 南京210012；2.公安部南昌警犬基地，江西 南昌330100）

犬瘟熱是犬的急性傳染病之一，本病由犬瘟熱病毒（canine distemper virus，CDV）引起，一年四季發病，冬春季多發，該病毒可通過空氣飛沫傳播、直接或間接接觸傳播等，本病的臨床表現主要包括：精神沉郁，流膿性鼻涕，眼睛分泌物增加，咳嗽，聽診肺部有雜音，體溫呈雙相熱型，鼻鏡和足墊角質化過度，部分患犬出現肌肉痙攣和后肢癱瘓等神經癥狀[1]。該病毒主要侵害3～6月齡的幼犬，偶見于成年犬，但成年犬多可耐過，在臨床上老齡犬發生該病的報道較少。筆者近期遇到一例10歲犬抽搐的病例，對該病例除進行常規的膠體金試紙快速診斷外，還進行了動物回歸試驗，上述結果均證明該病為犬瘟熱。

1 材料

1.1 病例來源 病例來自公安部南昌警犬基地犬病醫院，雜交犬，雌性，10歲，體重約10 kg。

1.2 試劑及儀器 CDV膠體金檢測試紙（BIO?INDIST），血細胞分析儀（IDEXX LaserCyte），血液生化分析儀（IDEXX VETTEST）。

1.3 試驗動物 健康羅威納幼犬10頭，3～6月齡，未免疫，來自公安部南昌警犬基地。

2 方法

2.1 臨床檢查 問診患犬的發病時間，檢查患犬的臨床癥狀。

2.2 膠體金試紙快速診斷 用無菌棉簽蘸取眼睛、鼻分泌物，將棉簽放入裝有稀釋液的樣品管中充分攪拌，用吸管吸取攪拌后的稀釋液，滴注3～4滴稀釋液于CDV膠體金檢測試紙樣品孔中，待10min后觀察結果。

無菌采集血液1mL，離心，吸取血清3～4滴滴注于CDV膠體金檢測試紙樣品孔中，待10min后觀察結果。

2.3 實驗室檢驗 常規采集前肢頭靜脈血，進行血常規和部分生化指標檢測。

2.4 動物回歸試驗 將10頭幼犬分為兩組，試驗一組7頭犬，試驗二組3頭犬。

將采集到的患犬的口腔、鼻腔和眼睛分泌物稀釋，將稀釋液直接滴入試驗一組幼犬鼻腔，每只犬滴注0.5mL，第二天再滴注一次；試驗二組幼犬只滴注生理鹽水。

連續觀察并記錄兩組犬的臨床癥狀變化，在第5天和第10天分別采集犬鼻腔和眼睛分泌物用CDV膠體金檢測試紙檢測分泌物中有無病毒抗原。

3 結果

3.1 臨床檢查及快速診斷 來院就診時病程已兩日，流膿性鼻涕，眼睛分泌物增加，可視黏膜潮紅，體溫39.6℃，四肢抽搐、不能站立，飲食欲廢絕。

眼睛、鼻腔分泌物CDV膠體金檢測試紙檢測呈陽性，血液CDV膠體金檢測試紙檢測呈陽性。

3.2 實驗室檢驗 血常規檢查表明炎性細胞升高（表1），部分生化指標結果表明患犬肝臟功能有異常（表2）。

3.3 動物回歸試驗 試驗一組幼犬在接種后3～5天相繼出現類感冒癥狀，表現為精神沉郁，流鼻涕，眼睛分泌物增加，咳嗽，體溫升高等；在第5天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經CDV膠體金檢測試紙檢測均呈陰性，在第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經CDV膠體金檢測試紙檢測均呈陽性。試驗二組幼犬在觀察期內無明顯病理性臨床癥狀；在第5天和第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經CDV膠體金檢測試紙檢測均呈陰性。

表1 患犬血常規檢查

表2 患犬血液生化檢查

4 結論

綜合對患犬的臨床檢查、膠體金試紙快速診斷、實驗室檢驗和動物回歸試驗，確診該病例為犬瘟熱。

5 討論

根據對發病機理的研究，犬瘟熱病毒的潛伏期一般為3～5 d，在病毒的潛伏期內，感染犬一般無明顯臨床癥狀，隨后則出現犬瘟熱典型癥狀，如：出現雙相熱型發熱，眼、鼻有卡他性或化膿性分泌物，在第二次發熱表現嘔吐和腹瀉，呼吸道有卡他炎癥，有時發展成肺炎，鼻鏡和足墊角質化過度，有神經癥狀[1]。在本試驗中，試驗一組幼犬大部分在接種后3～5 d相繼出現似犬瘟熱的感冒癥狀，本試驗結果證明了CDV可以通過身體的所有分泌物排到體外，尤其是呼吸道的分泌物，將分泌物對易感犬實施各種途徑的試驗性接種，均可使犬發生具有臨床癥狀的感染[1-2]；在用CDV膠體金檢測試紙對試驗犬分泌物進行檢測時，在第5天的分泌物中未檢測到病毒，在第10天對分泌物檢測時呈陽性，表明在第5天時病毒并未出現在上皮細胞中，在第10天時上皮細胞已有病毒存在，此研究結果與犬瘟熱病毒在感染后最初主要在淋巴系統中增殖，隨后出現于支氣管淋巴結、扁桃體內和上皮細胞的研究結果相一致[1]。

CDV引起的免疫會持續時間很長，但不會終生免疫[2]。在本試驗中，患犬年齡已達10歲的老齡犬，問診患犬主人，該犬在1歲內時曾進行CDV疫苗接種，以后則再未接種該疫苗，在該年齡發病，表明患犬已無對CDV的免疫，由此可見，CDV不會引起終生免疫的理論是正確的，但具體的免疫保護期則有待于進一步研究。

在犬瘟熱疾病發展過程中，病犬的肺可能不被感染，但在致死性病例中，患犬經常因為繼發細菌感染而引起支氣管肺炎[1]，所以當發生感染時，患犬的血常規檢查則表現明顯的炎性細胞增多癥狀，該病例的血常規呈現炎性細胞增多，表明患犬已經繼發細菌感染，所以在對該病例的治療時應注重考慮炎癥的控制；通常在患犬瘟熱時，犬的血清學檢查一般無特異，在疾病的初期或比較嚴重時，會出現白蛋白降低或球蛋白升高[2]，但在該病例的部分血液生化指標檢測時出現肝功能指標升高的現象，這可能是由于其他疾病所導致，此癥候的出現是否與犬瘟熱具有相關性需要進一步研究。

膠體金試紙快速診斷技術是一種基于單克隆抗體的膠體金免疫層析診斷技術，其在與巢式PCR進行比較時，敏感性（89.7%和85.7%）和特異性（94.6%和100%）略低[3]，但因其使用方便、造價低廉、特異性高、檢測時間短等，所以在臨床上得到廣泛應用。

[1]殷震，劉景華.動物病毒學[M].2版.北京：科學出版社，1997：756-762.

[2]施振聲.譯.小動物臨床手冊[M].4版.北京：中國農業出版社，2004：1096-1098.

[3]Dong-Jun An，Tae-Young Kim，Dae-Sub Song，et al.An immu?nochromatography assay for rapid antemortem diagnosis of dogs suspected to have canine distemper[J].Journal of Virological Meth?ods，2008，147（2）：244-249.