羅丹明6G熒光特性及其在熒光猝滅法中的應(yīng)用

張瑞華，崔建升，孟素英

(1.河北科技大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，河北石家莊 050018;2.河北省污染防治生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室，河北石家莊 050018)

熒光光譜法具有速度快，取樣量少，選擇性好，靈敏度高，重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，利用熒光光譜技術(shù)進(jìn)行分析研究在國內(nèi)外已有大量的報(bào)道。例如劉小靜等對(duì)三維熒光光譜分析技術(shù)的發(fā)展及其在各領(lǐng)域的應(yīng)用研究進(jìn)行了綜述與展望［1］。如同生物傳感器檢測(cè)中選擇合適的生物識(shí)別元件，才能提高傳感器的靈敏度和準(zhǔn)確性、延長傳感器的使用壽命等一樣的原理［2］，熒光分析法中熒光探針的選擇也是非常重要的。迄今為止，關(guān)于熒光傳感器的文獻(xiàn)報(bào)道比較多，但熒光探針的選擇范圍仍相當(dāng)有限［3］。在已報(bào)道的熒光探針分子中，有機(jī)染料分子因其強(qiáng)的顏色及熒光特性而備受青睞，常見的有機(jī)染料分子如羅丹明類、熒光素、香豆素等。堿性羅丹明類染料用于各類物質(zhì)的測(cè)定已有很長的歷史，因具有價(jià)格便宜、容易修飾及光譜性質(zhì)豐富等特點(diǎn)，成為理想的熒光探針生色團(tuán)，但對(duì)其熒光特性的分析及其應(yīng)用方面的總結(jié)還有些欠缺。本文就此對(duì)羅丹明6G的熒光特性及其在熒光猝滅法中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述。

1 羅丹明類染料的熒光特性

羅丹明類化合物是以氧雜蕙為母體的堿性咕噸染料［4］，由于苯環(huán)間有氧橋相聯(lián)，分子具有剛性平面結(jié)構(gòu)，容易吸收入射光的能量而發(fā)射長波，從而產(chǎn)生熒光［5］。與其他常用的熒光染料相比，羅丹明類熒光染料具有摩爾吸光系數(shù)高、光穩(wěn)定性好、對(duì)pH值不敏感、較寬的波長范圍及可延伸到可見光區(qū)的吸收和較高的量子產(chǎn)率等優(yōu)點(diǎn)［6］，此外其熒光性質(zhì)可調(diào)控、熒光輻射波長在可見光區(qū)域熒光檢測(cè)時(shí)背景信號(hào)小等優(yōu)異的光物理和光化學(xué)性能，因此被廣泛應(yīng)用在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、藥理學(xué)、生理學(xué)、環(huán)境化學(xué)、單個(gè)分子檢測(cè)、熒光標(biāo)記、激光染料、熒光探針、信息科學(xué)等方面，是分析化學(xué)和生物醫(yī)藥科學(xué)等生物技術(shù)領(lǐng)域中最常用的熒光染料［7－8］。

隨著應(yīng)用范圍越來越廣泛，羅丹明類熒光染料的研究發(fā)展迅速且受到了更多的重視［9］。這樣特殊的結(jié)構(gòu)及相應(yīng)的熒光特性，使羅丹明類熒光染料成為化學(xué)和生物分析領(lǐng)域中研究較為廣泛的課題［10］。NOELTING和DZIEWONSKY在1905年首先合成了羅丹明染料［11］。

2 羅丹明6G的熒光特性

羅丹明類化合物包括羅丹明6G、羅丹明B、羅丹明G、羅丹明101、異硫氰酸羅丹明、高氯酸羅丹明6G等［3］。其中羅丹明6G(rhodamine 6G，R6G)是一種水溶性陽離子熒光染料，其水溶液在紫外光照射下發(fā)出綠黃色熒光，堿性溶液顯暗綠色熒光，乙醇溶液呈現(xiàn)紅黃色帶綠黃色熒光，被廣泛用于熒光標(biāo)記或定量分析［12］。羅丹明6G分子結(jié)構(gòu)式如圖1所示。

圖1 羅丹明6G的分子結(jié)構(gòu)式Fig.1 Molecular structure of rhodamine 6G

熒光壽命和熒光量子產(chǎn)率是熒光物質(zhì)的重要發(fā)光參數(shù)。羅丹明6G的熒光壽命在納秒級(jí)［13］，且其熒光壽命隨著濃度的增加而減少，例如在2× 10－4mol/L時(shí)為3.7 ns，當(dāng)羅丹明6G的濃度大于10－2mol/L時(shí)，熒光壽命迅速降低，主要由于能量轉(zhuǎn)移到雙分子羅丹明6G熄滅中心了，熄滅中心的壽命約為(1±0.5)ps［14］，流動(dòng)狀態(tài)下，羅丹明6G的熒光壽命為(4.2±0.2)ns［15］。熒光量子產(chǎn)率是指熒光物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光光子數(shù)的比值，它是衡量熒光物質(zhì)熒光量的尺度，通常情況下其數(shù)值總是小于1，其數(shù)值越大，化合物的熒光越強(qiáng)。熒光量子產(chǎn)率的大小，主要決定于化合物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，同時(shí)也與化合物所處的環(huán)境因素有關(guān)。在室溫下，KUBIN等研究了在0.5 mol/L的硫酸介質(zhì)中羅丹明類化合物的熒光量子產(chǎn)率，其中羅丹明6G的結(jié)果為0.95，顯示了很好的熒光性［16］。WüRTH等用光學(xué)和光聲方法測(cè)定了羅丹明6G的絕對(duì)量子產(chǎn)率，它在乙醇和水溶液中的結(jié)果分別為1±0.06和0.92±0.05，這提供了一個(gè)基本的熒光量子產(chǎn)率標(biāo)準(zhǔn)［17］。

羅丹明6G是廣泛應(yīng)用于光學(xué)、光譜學(xué)和激光科學(xué)的有機(jī)染料［18］。1980年，徐其亨對(duì)此類染料的結(jié)構(gòu)及其性能進(jìn)行了綜合研究和歸納，認(rèn)為羅丹明類染料中苯環(huán)間有“氧橋”相聯(lián)，具有剛性平面結(jié)構(gòu)，容易吸收入射光的能量而發(fā)射長波，從而產(chǎn)生熒光。另外它本身具有醌式結(jié)構(gòu)，能產(chǎn)生顏色，被氧化時(shí)其醌式結(jié)構(gòu)遭破壞，染料溶液顏色變淺甚至變?yōu)闊o色，為熒光分析和光度分析奠定了理論基礎(chǔ)［8］。陳尚賢等從改變?nèi)軇┬再|(zhì)，了解R6G是離子型化合物。在有機(jī)溶劑中，分子和離子形式可同時(shí)存在，且其熒光來源于它的離子態(tài)［19］。ZEHENTBAUER等也研究了8種不同濃度的有 機(jī) 溶 劑 (methanol，ethanol，n-propanol，iso－propanol，n-butanol，n-pentanol，acetone，and dimethyl sulfoxide(DMSO))對(duì)羅丹明6G熒光光譜的影響效應(yīng)［20］;張建華等研究了羅丹明類堿性染料溶液的表面張力、吸收光譜和熒光變化，發(fā)現(xiàn)羅丹明類堿性染料是一種陽離子表面活性劑。羅丹明6G溶液的濃度約為4.48×10－3mol/L時(shí)，開始出現(xiàn)膠束，臨界膠束濃度(CMC)值為2.09×10－3mol/L，R6G溶液的濃度小于1.05×10－5mol/L，溶液的熒光最強(qiáng)［21］。到20世紀(jì)80年代后期，又有人對(duì)羅丹明類染料的聚集狀態(tài)進(jìn)行了研究，但由于數(shù)學(xué)模型太簡便，因此所測(cè)定的締合物和締合度都不準(zhǔn)確。在此基礎(chǔ)上，何錫文等確立了新的數(shù)學(xué)模型，確定了羅丹明6G的水溶液主要是單體和二聚體共存后，又以羅丹明6G為例，研究了用熒光法估計(jì)熒光試劑在溶液狀態(tài)的締合程度，探討了以解聚的方式來提高熒光強(qiáng)度的途徑，最后推論:羅丹明6G的單體是產(chǎn)生熒光的主要原因，而雙聚和質(zhì)子化是熒光猝滅的主要影響因素［22］。

3 羅丹明6G在熒光猝滅法中的應(yīng)用

在痕量分析中，熒光分析法因其靈敏度一般高于分光光度法，具有檢測(cè)靈敏度高、選擇性較好、成本低、易操作、方便快捷等優(yōu)點(diǎn)而日益受到人們的重視。在熒光分析中，可以采用不同的試驗(yàn)方法來對(duì)物質(zhì)濃度進(jìn)行測(cè)量。其中最簡單的是直接測(cè)定，只要分析物質(zhì)本身發(fā)熒光，便可以通過測(cè)定其熒光強(qiáng)度以知其濃度。對(duì)于有些物質(zhì)，它們本身不發(fā)熒光或者因熒光量子產(chǎn)率很低而無法進(jìn)行直接測(cè)定，便只能采用間接測(cè)定的方法。熒光猝滅法便是其中的一種，依據(jù)熒光猝滅的程度與分析物質(zhì)濃度之間的定量關(guān)系，通過測(cè)定熒光化合物熒光強(qiáng)度下降的程度，便可間接地分析該物質(zhì)。一般來說，熒光猝滅法比直接熒光測(cè)定法更為靈敏，具有更高的選擇性。

自20世紀(jì)80年代初，開始研究和利用羅丹明6G的熒光猝滅以來，有的是基于該物質(zhì)的吸收光譜可以和羅丹明6G的發(fā)射光譜有效重疊，從而發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移使熒光猝滅;有的是基于和羅丹明6G染料生成無熒光的締合物(或絡(luò)合物)，使熒光猝滅;有的是基于該類染料的氧化還原性，通過氧化還原破壞其剛性結(jié)構(gòu)，使熒光猝滅;對(duì)于金屬離子的測(cè)定，是利用待測(cè)金屬離子與R6G試劑反應(yīng)生成配合物或離子締合物，在有機(jī)溶劑中發(fā)出的熒光或試劑本身產(chǎn)生的熒光而進(jìn)行測(cè)定;羅丹明6G還被用于作為檢測(cè)碘化物的光纖傳感器的熒光探針，也是基于碘離子能使羅丹明6G熒光猝滅的原理而建設(shè)起來的［23］。它在分析化學(xué)上廣泛應(yīng)用于檢測(cè)金屬離子、陽離子、陰離子和蛋白質(zhì)等，是一種靈敏度頗高的實(shí)用有機(jī)分析試劑。

3.1 羅丹明6G-共振能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅

熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)熒光猝滅法是近年來發(fā)展的高靈敏度測(cè)定痕量組分的新方法，該方法自20世紀(jì)40年代末提出以來在化學(xué)、生物以及其他領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。FORSTER能量轉(zhuǎn)移理論認(rèn)為，當(dāng)能量給予體分子和接受體分子兩者的基態(tài)與第一激發(fā)態(tài)的振動(dòng)能級(jí)間能級(jí)差相當(dāng)，或者能量給予體分子的發(fā)射光譜與能量接受體分子的吸收光譜能有效重疊，可以發(fā)生從能量給予體分子到能量接受體分子的非輻射能量轉(zhuǎn)移［24－25］。

作為一種重要的光物理技術(shù)，熒光共振能量轉(zhuǎn)移與常規(guī)熒光法和共振光散射相比，具有靈敏度高、適用范圍廣、受環(huán)境因素(如瑞利散射光)干擾少，重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。下面將羅丹明6G在能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法中的部分應(yīng)用列表，如表1所示。

3.2 羅丹明6G-雜多酸離子締合物熒光猝滅

近年來以堿性染料－雜多酸離子締合物為基礎(chǔ)測(cè)定磷、砷、硅，有了迅速發(fā)展。王筱敏等利用在酸性介質(zhì)中磷鉬酸鹽與羅丹明6G形成絡(luò)合物，使羅丹明6G熒光猝滅，來測(cè)定磷，測(cè)定范圍在0～10×10－9，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為9%，回收率為96% ～102%［39］;高甲友等研究了在聚乙烯醇(PVA)存在下，砷鉬雜多酸與堿性染料羅丹明6G生成離子締合物，使羅丹明6G熒光猝滅測(cè)定砷，其質(zhì)量濃度在2～60 ng/mL范圍內(nèi)與熒光猝滅值成線性關(guān)系［40］，王燕也利用此方法進(jìn)行了測(cè)定，在最大激發(fā)波長λmax=580 nm處，砷質(zhì)量濃度在0～0.16 μg/mL范圍內(nèi)符合比爾定律［41］;除此之外宋功武等在這方面做了大量的工作:研究了磷鉬雜多酸測(cè)定磷［42］;硅鉬雜多酸測(cè)定硅［43］、磷、硅鉬雜多酸測(cè)定磷和硅［44］;硅、砷鉬雜多酸同時(shí)測(cè)定硅和砷［45］;還有磷，砷、硅鉬雜多酸體系不需要其他分離手段，用此法可對(duì)鋼合金中的磷、砷、硅進(jìn)行同時(shí)測(cè)定［46］，測(cè)定結(jié)果滿意。此外，宋功武等、滕恩江等高甲友等還在研究雜多酸離子締合物熒光猝滅反應(yīng)的基礎(chǔ)上，引入流動(dòng)注射，提高了分析速度，測(cè)定了磷［47－50］、硅［51］、砷［52］，以及同時(shí)測(cè)定了磷和硅［53］、磷和砷［54］、砷和硅［55］、磷、砷和硅［56］，取得了良好的效果。

3.3 羅丹明6G-碘化鉀離子締合物熒光猝滅

一般在表面活性劑存在的酸性條件下，有些物質(zhì)可以使碘化鉀中的 I－生成 I3－陰離子，I3－又與R6G形成穩(wěn)定的多元離子締合物，從而使羅丹明6G熒光猝滅。隨著物質(zhì)濃度的增加，生成的I3－陰離子濃度也增加，(R6G－I3)n締合微粒濃度也相應(yīng)增加，體系的熒光猝滅值增加。這是由于R6G+陽離子可與I－陰離子通過離子鍵形成疏水性的R6G－I3離子締合物，并聚集成(R6G－I3)n締合微粒，使得R6G熒光分子被包裹在締合微粒體內(nèi)而不能與激發(fā)光分子作用，導(dǎo)致體系中可以產(chǎn)生熒光的R6G分子數(shù)減少，故體系的熒光降低［57－58］。熒光猝滅值在一定范圍內(nèi)與物質(zhì)濃度呈線性關(guān)系，由此建立了一種羅丹明6G熒光猝滅法分析物質(zhì)的新方法。具體的應(yīng)用見表2。

表1 羅丹明6G在能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法中的應(yīng)用Tab.1 Rhodamine 6G in energy transfer fluorescence quenching method application

續(xù)表1

續(xù)表2

4 結(jié)語

羅丹明6G優(yōu)越的熒光特性，使得羅丹明6G熒光猝滅法還可用于很多方面，方法靈敏度高，其選擇性在表面活性劑的存在下也有很大的提高，此外因其形成的絡(luò)合物較差的水溶性，同時(shí)用于絡(luò)合的配體經(jīng)常也會(huì)同其他離子有一定的絡(luò)合能力，使其選擇性降低。綜上所述，如何更深入地研究表面活性劑的作用機(jī)理，尋求更加適用的反應(yīng)體系，設(shè)計(jì)合成具有更好選擇性、較高靈敏度、抗干擾能力強(qiáng)，并可以在環(huán)境和生物體內(nèi)廣泛應(yīng)用的熒光探針還需要我們進(jìn)一步的探索和研究。同時(shí)還應(yīng)加強(qiáng)羅丹明6G熒光猝滅機(jī)理的探討，使羅丹明6G的應(yīng)用更加完整、系統(tǒng)，形成一套具有理論指導(dǎo)的分析方法。相信隨著科學(xué)工作的深入，羅丹明6G在熒光猝滅法中的應(yīng)用會(huì)得到更好的發(fā)展和深入。

/References:

［1］ 劉小靜，吳曉燕，齊彩亞，等.三維熒光光譜分析技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.河北工業(yè)科技，2012，29(6):422－425.

LIU Xiaojing，WU Xiaoyan，QI Caiya，et al.Applications of threedimensional fluorescent spectroscopy analysis technology［J］.Hebei Journal of Industrial Science and Technology，2012，29(6): 422－425.

［2］ 王曉輝，金 靜，任洪強(qiáng)，等.水質(zhì)生物毒性檢測(cè)方法研究進(jìn)展［J］.河北工業(yè)科技，2007，24(1):58－62.

WANG Xiaohui，JIN Jing，REN Hongqiang，et al.Development of biotoxicity testing method on detecting water quality［J］.Hebei Journal of Industrial Science and Technology，2007，24(1):58－62.

［3］ 劉國宏.熒光素及羅丹明類衍生物熒光探針及其應(yīng)用［J］.長治學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，23(5):17－21.

LIU Guohong.Fluorescein and rhodamine derivatives fluorescent probe and its application［J］.Journal of Changzhi University，2006，23(5):17－21.

［4］ 王曉春，劉曉端，楊永亮，等.羅丹明類熒光探針在重金屬和過渡金屬離子檢測(cè)中的應(yīng)用［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2010，30(10):2693－2699.

WANG Xiaochun，LIU Xiaoduan，YANG Yongliang，et al.Application of rhodamine－based fluorescence chemosensor in heavy metal Ions and transition metal Ions detection［J］.Spectroscopy and Spectral Analysis，2010，30(10):2693－2699.

［5］ 莊會(huì)榮，馮尚彩，平 梅.羅丹明類染料在分析化學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2001，37(3):143－146.

ZHUANG Huirong，F(xiàn)ENG Shangcai，PING Mei.Progress in application of the dyestuff of rhodamine kinds in analytical chemistry［J］.Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis)，2001，37(3):143－146.

［6］ 孫 偉，胡德禹，吳志兵，等.基于羅丹明的重金屬和過渡金屬陽離子熒光分子探針研究進(jìn)展［J］.有機(jī)化學(xué)，2011，31(7): 997－1010.

SUN Wei，HU Deyu，WU Zhibing，et al.Research progress of fluorescent molecular probes for heavy and transition metallic cations based on rhodamine fluorophore［J］.Chinese Journal of Organic Chemistry，2011，31(7):997－1010.

［7］ 袁躍華，田茂忠，馮 鋒，等.羅丹明類陽離子熒光探針［J］.化學(xué)進(jìn)展，2010，22(10):1929－1939.

YUAN Yuehua， TIAN Maozhong， FENG Feng， etal.Rhodamine－based fluorescent probes for cations［J］.Progress in Chemistry，2010，22(10):1929－1939.

［8］ HAUGLAND R P，SPENCEM T Z.Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals［M］.6th ed.Eugene:Molecular Probes Inc，1996.

［9］ 顏范勇，陳立功，閆喜龍，等.羅丹明類熒光染料的合成及應(yīng)用［J］.化學(xué)進(jìn)展，2006，18(2):252－261.

YAN Fanyong，CHEN Ligong，YAN Xilong，et al.Synthesis and applications of rhodamine fluorescent dyes［J］.Progress in Chemistry，2006，18(2):252－261.

［10］ HAUGLAND R P.Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals［M］.9th ed.Eugene:Molecular Probes Inc，2002.

［11］ 趙秀蘭.羅丹明衍生物在傳感分析化學(xué)中的應(yīng)用［J］.安慶師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2011，17(1):126－128.

ZHAO Xiulan.Application of rhodamine derivatives in sensor analysis［J］.Journal of Anqing Teachers College(Natural Science Edition)，2011，17(1):126－128.

［12］ STRACKE F，HEUPEL M，THIEL E.Singlet molecular oxygen photosensitized by rhodamine dyes:Correlation with photophysical properties of the sensitizers［J］.Journal Photochemistry Photobiology A:Chemistry，1999，126(1/2/3):51－58.

［13］ SELANGER K A，F(xiàn)ALNES J，SIKKELAND T.Fluorescence lifetime studies of rhodamine 6G in methanol［J］.The Journal of Physical Chemistry，1997，81(20):1960－1963.

［14］ PENZKOFER A，LU Y.Fluorescence quenching of rhodamine 6G in methanol at high concentration［J］.Chemical Physics，1986，103(2/3):399－405.

［15］ GOODWIN P M，AMBROSE W P，MARTIN J C，et al.Analysis of fluorescence lifetime data for single rhodamine molecules in flowing sample streams［J］.Anal Chem，1994，66(1):64－72.

［16］ KUBIN R F，F(xiàn)LETCHER A N.The effect of oxygen on the fluorescence quantum yields of same coumarin dyes in ethanol［J］.Chemical Physics Letters，1983，99(1):49－52.

［17］ WüRTH C，GONZáLEZ M G，NIESSNER R，et al.Determination of the absolute fuorescence quantum yield of rhodamine 6G with optical and photoacoustic methods－providing the basis for fluorescence quantum yield standards［J］.Talanta，2012，90:30－37.

［18］ 侯立松，劉 純，陳述春.凝膠中羅丹明6G的熒光性質(zhì)［J］.材料科學(xué)進(jìn)展，1991，5(1):70－74.

HOU Lisong，LIU Chun，CHEN Shuchun.Fluorescent properties of phodamine 6G doped in silica gels and coatings via the sol－gel process［J］.Advances in Materials Science，1991，5(1):70－74.

［19］ 陳尚賢，張?jiān)缕?羅丹明6G的熒光光譜［J］.化學(xué)學(xué)報(bào)，1987，45(4):395－398.

CHEN Shangxian，ZHANG Yueping.Fluorescence spectra of rhodamine 6G［J］.Acta Chimica Sinica，1987，45(4):395－398.

［20］ ZEHENTBAUER F M，MORETTO C，STEPHEN R，et al.Fluorescence spectroscopy of rhodamine 6G:Concentration and solvent effects［J］.Spectrochimica Acta Part A:Molecular and Bio－molecular Spectroscopy，2014，121:147－151.

［21］ 張建華，崔秋紅，王玉興，等.羅丹明6G表面活性的研究［J］.冶金分析，2000，20(2):22－24.

ZHANG Jianhua，CUI Qiuhong，WANG Yuxing，et al.Study on the surfactant feature of rhodamine 6G［J］.Metallurgical Analysis，2000，20(2):22－24.

［22］ 何錫文，史長虹，張貴珠，等.羅丹明6G的溶液狀態(tài)和熒光特性的研究［J］.分析化學(xué)，1993，21(9):1008－1012.

HE Xiwen，SHI Changhong，ZHANG Guizhu，et al.Fluorimetric property of rhodamine 6G in aqueous solution and state of Its molecular aggregation［J］.Chinese Journal of Analytical Chemistry，1993，21(9):1008－1012.

［23］ WYATT W A，BRIGHT F V，HIEFTJE G M.Characterization and comparison of three fiber－optic sensors for iodide determination based on dynamic fluorescence quenching of rhodamine 6G［J］.Analytical Chemistry，1987，59(18):2272－2276.

［24］ 許金鉤，王尊本.熒光分析法［M］.北京:科學(xué)出版社，2006.

XU Jingou，WANG Zunben.Fluorescence Analysis Methods［M］.Beijing:Science Press，2006.

［25］ KAPUTSKAYA I A，ERMILOV E A，TANNERT S，et al.The influence of F?rster energy transfer on spectral and kinetic characteristics of phosphorescence and thermally activated delayed fluorescence of acriflavine in a polyvinylalcohol matrix［J］.Journal of Luminescence，2006，121(1):75－87.

［26］ 寧 玲，呂昌銀，陳云生，等.PAN－Rh6G能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定水樣中痕量鎘(II)［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(8):1353－1354.

NING Ling，LYU Changyin，CHEN Yunsheng，et al.Determination of trace Cadmium base on fluorescence quenching energy transfer system with rhodanmine 6G－PAN in water sample［J］.Chinses Journal of Health Laboratory Technology，2007，17(8): 1353－1354.

［27］ 賀元文，呂昌銀，張建文，等.羅丹明6G－PAN能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定痕量錳(Ⅱ)［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17 (5):821－822.

HE Yuanwen，LYU Changyin，ZHANG Jianwen，etal.Determination of trace manganese(Ⅱ)based on energy transfer fluorescence quenching between rhodamine 6G and complex PAN－Mn2+［J］.Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2007，17(5):821－822.

［28］ 張建文，賀元文，呂昌銀，等.羅丹明6G－PAN能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定痕量鋅［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(6): 995－996.

ZHANG Jianwen，HE Yuanwen，LYU Changyin，etal.Determination of trace zinc by fluorescence quenching with rhodamine 6G－complex of PAN－Zn2+energy transfer system［J］.Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2007，17(6): 995－996.

［29］ 傅 麗.能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定加替沙星［J］.分子科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，25(6):407－410.

FU Li.Measurements of gatifloxacin with a technique of energy transfer fluorescence quenching［J］.Journal of Molecular Science，2009，25(6):407－410.

［30］ 劉保生，高 靜，楊更亮.吖啶橙－羅丹明6G能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定維生素B12［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2005，25(7): 1080－1082.

LIU Baosheng，GAO Jing，YANG Gengliang.Determination of vitamin B12concentration by fluorescence quenching with acridine orange－rhodamine 6G energy transfer system［J］.Spectroscopy and Spectral Analysis，2005，25(7):1080－1082.

［31］ 劉保生，王桂華，孫漢文，等.吖啶橙－羅丹明6G能量轉(zhuǎn)移熒光法測(cè)定痕量磷［J］.分析化學(xué)，2001，29(1):42－44.

LIU Baosheng，WANG Guihua，SUN Hanwen，et al.The energy transfer fluorescence method for determination of trace phosphorous with acridine orange－rhodamine 6G［J］.Chinese Journal of Analytical Chemistry，2001，29(1):42－44.

［32］ 劉保生，高 靜，楊更亮.吖啶橙－羅丹明6G熒光共振能量轉(zhuǎn)移及其羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定蛋白質(zhì)［J］.分析化學(xué)，2005，33(4):546－548.

LIU Baosheng，GAO Jing，YANG Gengliang.Fluorescence resonance energy transfer between acridine orange and rhodamine 6G and fluorescence quenching of rhodamine 6G reaction for the determination of proteins［J］.Chinese Journal of Analytical Chemistry，2005，33(4):546－548.

［33］ 寧 玲，呂昌銀，陳云生，等.PAN－Rh6G能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定痕量鎳(Ⅱ)［J］.南華大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2008，36(3): 382－384.

NING Ling， LYU Changyin， CHEN Yunsheng， etal.Determination of trace nickel based on fluorescence quenching the energy transfer system with Rhodanmine 6G－complex of PANNi2+［J］.Journal of Nanhua University(Medical Edition)，2008，36(3):382－384.

［34］ 歐陽運(yùn)富，王永生，薛金花，等.吖啶橙－羅丹明6G共振能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法測(cè)定尿中1－羥基芘［J］.分析試驗(yàn)室，2007，26(11):53－56.

OUYANG Yunfu，WANG Yongsheng，XUE Jinhua，et al.Determination of 1－h(huán)ydroxypyrene in urine by resonance energy transfer fluorescence quenching of acridine orange－rhodamine 6G［J］.Chinese Journal of Analysis Laboratory，2007，26(11): 53－56.

［35］ 曹冬林，劉保生，傅 麗，等.吖啶橙－羅丹明6G能量轉(zhuǎn)移熒光猝滅法定量測(cè)定茶多酚［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2007，26(4): 537－540.

CAO Donglin，LIU Baosheng，F(xiàn)U Li，et al.Determination of tea polyphenols with acridine orange－rhodamine 6G by energy transfer fluorescence quenching method.Journal of instrumental analysis［J］.Journal of Instrumental Analysis，2007，26(4):537－540.

［36］ 傅 麗，劉保生，曹冬林，等.吖啶黃－羅丹明6G之間熒光能量轉(zhuǎn)移及其在測(cè)定釩中的應(yīng)用［J］.冶金分析，2007，27(7): 26－29.

FU Li，LIU Baosheng，CAO Donglin，etal.Studyon fluorescence resonance energy transfer between acridine yellow and rhodamine 6G and its application in the determination of Vanadium.metallurgical analysis［J］.Metallurgical Analysis，2007，27(7):26－29.

［37］ LIU Baosheng，LIU Z，CAO Z.Fluorescence resonance energy transfer between acridine orange and rhodamine 6G and analytical application in micelles of dodecyl benzene sodium sulfonate［J］.Journal of Luminescence，2006，118(1):99－105.

［38］ XU Hao，LI Ying，LIU Chunmei，et al.Fluorescence resonance energy transfer between acridine orange and rhodamine 6G and its analytical application for vitamin B12with flow－injection laser－induced fluorescence detection［J］，2008，77(1):176－181.

［39］ 王筱敏，邵 謙，柏竹平，等.羅丹明6G熒光淬滅法測(cè)定水中微量磷［J］.光譜學(xué)與光譜分析，1988，8(3):51－54.

WANG Xiaomin，SHAO Qian，BAI Zhuping，et al.The determination of tract phosphorus by using fluorescence quenching of rhodamine 6G with molybaophosphate［J］.Spectroscopy and Spectral Analysis，1988，8(3):51－54.

［40］ 高甲友，趙 嵐.砷鉬雜多酸－羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定痕量砷［J］.冶金分析，1996，16(3):45－46.

GAO Jiayou，ZHAO Lan.Determination of trace arsenic by heteropoly arsenomolybdic－rhodamine－6G fluorescence quenching method［J］.Metallurgical Analysis，1996，16(3):45－46.

［41］ 王 燕.羅丹明6G－砷鉬雜多酸分光光度法測(cè)定無機(jī)鹽中微量砷［J］.徐州師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，1996，14(2): 42－44.

WANG Yan.Using Rhodamine 6G－HeteroPolymolybdoarscnic acid spectrophotometry to measure the tiny amount of as in inorganic salts［J］.Journal of Xuzhou Teachers college，1996，14 (2):42－44.

［42］ 宋功武，王明雄.羅丹明6G－磷鉬雜多酸離子締合物熒光猝滅法測(cè)定痕量磷的研究［J］.湖北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，1989，11(3):32－35.

SONG Gongwu，WANG Mingxiong.Fluorescence quenching method for the determination of trace amounts of Phosphorus with rhodamine 6G－molybdophosphiorc acid ion association complex［J］.Journal of Hubei University(Natural Science)，1989，11 (3):32－35.

［43］ 宋功武.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定微量硅的研究［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，1995，14(1):85－87.

SONG Gongwu.Rhodamine 6G fluorescence quenching method for the determination of trace silicon［J］.Journal of Instrumental Analysis，1995，14(1):85－87.

［44］ 宋功武，曹桂春.羅丹明6G－磷、硅鉬雜多酸離子締合物熒光猝滅法測(cè)定痕量磷和硅［J］.分析儀器，1992(4):58－59.

SONG Gongwu，CAO Guichun.Rhodamine 6G fluorescence quenching method for the determination of trace phosphorus and silicon［J］.Analytical Instrumentation，1992(4):58－59.

［45］ 宋功武.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定微量硅、砷［J］.儀器儀表與分析監(jiān)測(cè)，1991(4):50－52.

SONG Gongwu.Rhodamine 6G fluorescence quenching method for the determination of trace silicon and arsenic［J］.Instrumentation Analysis Monitoring，1991(4):50－52.

［46］ 宋功武.磷、砷、硅鉬雜多酸－羅丹明6G熒光猝滅法連續(xù)測(cè)定磷、砷、硅的研究［J］.分析試驗(yàn)室，1992，11(5):36－37.

SONG Gongwu.Rhodamine 6G fluorescence quenching method for the determination of trace phosphorus，arsenic and silicon［J］.Chinese Journal of Analysis Laboratory，1992，11(5):36－37.

［47］ 宋功武.流動(dòng)注射－羅丹明6G熒光淬滅測(cè)定痕量磷［J］.光譜學(xué)與光譜分析，1991，11(3):59－61.

SONG Gongwu.Flow injection analysis for tract phosphorus determination with fluorescence quenching of rhodamine 6G with molybdophosphate［J］.Spectroscopy and Spectral Analysis，1991，11(3):59－61.

［48］ 高甲友.流動(dòng)注射熒光猝滅法測(cè)定環(huán)境水樣中痕量磷［J］.環(huán)境污染與防治，2003，25(2):125－126.

GAO Jiayou.Determination of trace phosphorus in water samples of environment by flow injection fluorescence quenching method［J］.Environmental Pollution and Control，2003，25(2): 125－126.

［49］ 宋功武，馮 健.直接熒光法和流動(dòng)注射熒光法測(cè)定微量磷的研究［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，1998，17(3):77－79.

SONG Gongwu，F(xiàn)ENG Jian.Direct fluorophotometric and flowinjection fluorophotometric methods for the determination of trace phosphorus［J］.Journal of Instrumental Analysis，1998，17(3): 77－79.

［50］ 滕恩江，吳忠詳，魏復(fù)盛.流動(dòng)注射熒光淬滅法測(cè)定天然水中痕量磷［J］.中國環(huán)境監(jiān)測(cè)，1989，5(5):19－22.

TENG Enjiang，WU Zhongxiang，WEI Fusheng.Flow－injection fluorophotometric methods for the determination of trace phosphorus［J］.Environmental Monitoring in China，1989，5(5):19－22.

［51］ 宋功武.用流動(dòng)注射熒光法測(cè)定硅［J］.分析測(cè)試技術(shù)與儀器，1997，3(4):49－52.

SONG Gongwu.Flow injection analysis fortrace silicon determination with fluorometry［J］.Analysisand Testing Technology and Instruments，1997，3(4):49－52.

［52］ 葛伊莉，宋功武.流動(dòng)注射熒光法測(cè)定砷的研究［J］.儀器儀表與分析監(jiān)測(cè)，1998(1):41－43.

GE Yili，SONG Gongwu.Flow injection analysis for trace Arsenic determination with fluorometry［J］.Instrumentation Analysis Monitoring，1998(1):41－43.

［53］ 宋功武，方光榮.流動(dòng)注射熒光猝滅法測(cè)定磷和硅［J］.分析儀器，1998(2):50－52.

SONG Gongwu，F(xiàn)ANG Guangrong.Flow injection analysis fluorescence quenching method for determing trace phosphorus(Ⅴ) and silicon(Ⅳ)［J］.Analytical Instrumentation，1998(2): 50－52.

［54］ 宋功武.流動(dòng)注射熒光法測(cè)定磷和砷［J］.光譜學(xué)與光譜分析，1999，19(3):211－212.

SONG Gongwu.Flow injection analysis for trace phosphorus(Ⅴ) and arsenic(Ⅴ)determination［J］.Spectroscopy and Spectral A－nalysis，1999，19(3):211－212.

［55］ 宋功武，呂少仿.流動(dòng)注射熒光法同時(shí)測(cè)定砷和硅的研究［J］.現(xiàn)代科學(xué)儀器，1997，4(4):18－19.

SONG Gongwu，LYU Shaofang.Flow injection analysis for trace determination of arsenic and silicon with fluorescence［J］.Modern Scientific Instruments，1997，4(4):18－19.

［56］ 宋功武.流動(dòng)注射熒光法測(cè)定磷、砷、硅［J］.分析化學(xué)，1997，25(12):1404－1406.

SONG Gongwu.Flow injection analysis for determination of trace phosphorus，arsenic and silicon with fluorescence quenching［J］.Chinese JournalofAnalyticalChemistry，1997，25(12): 1404－1406.

［57］ 蔣治良，劉鳳志，劉紹璞，等.氯金酸－羅丹明S締合納米微粒體系的共振散射增強(qiáng)與熒光猝滅研究［J］.分析化學(xué)，2003，31(11):1364－1368.

JIANG Zhiliang，LIU Fengzhi，LIU Shaopu，et al.Enhanced resonance scattering and fluorescence quenching behavior of(AuCl4－rhodamine S)nassociation nanoparticle system［J］.Chinese Jour－nal of Analytical Chemistry，2003，31(11):1364－1368.

［58］ 李 芳，蔣治良.(PtI6－2RDG)n締合納米微粒體系的共振散射、熒光猝滅和減色效應(yīng)研究［J］.分析測(cè)試技術(shù)與儀器，2002，8(3):147－152.

LI Fang，JIANG Zhiliang.Resonance scattering and fluorescence quenching and hypochromic effects of(PtI6－2RDG)nassociation nanoparticle［J］.Analysis and testing technology and instruments.2002，8(3):147－152.

［59］ 王興民，滕秀蘭.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品中痕量鐵［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2008，44(1):35－37.

WANG Xingmin，TENG Xiulan.Determination of trace amount of iron in agricultural products by the quenching of fluorescence of rhodamine 6G［J］.Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis)，2008，44(1):35－37.

［60］ 王益林，陸建平，湯艷榮，等.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定中草藥中微量鐵［J］.分析試驗(yàn)室，2008，27(7):109－111.

WANG Yilin，LU Jianping，TANG Yanrong，et al.Determination of iron in chinese herbal medicine based on fluorescence quenching of rhodamine 6G［J］.Chinese Journal of Analysis Laboratory，2008，27(7):109－111.

［61］ 高甲友.羅丹明6G熒光光度法測(cè)定痕量鐵(Ⅲ)［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2007，43(5):405－406.

GAO Jiayou.Determination of trace amount of iron based on fluorescence spectrometry of rhodamine 6G［J］.Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis)，2007，43(5): 405－406.

［62］ 羅世地，鄧春梅，康信煌.二氧化氯－碘化物－羅丹明6G體系熒光猝滅反應(yīng)［J］.化學(xué)研究與應(yīng)用，2004，16(4):549－550.

LUO Shidi，DENG Chunmei，KANG Xinhuang.Fluorescence quenching reaction of the ClO2－I－rhodamine－6G system［J］.Chemical Research and Application，2004，16(4):549－550.

［63］ 陸建平，王益林，蔣桂海.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定Hg2+離子［J］.廣西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2007，32(1):31－34.

LU Jianping，WANG Yilin，JIANG Guihai.Determination of Hg2+with rhodamine 6G by fluorescence quenching method［J］.Journal of Guangxi University(Natural Science Edition)，2007，32 (1):31－34.

［64］ 高甲友.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定痕量鉻［J］.冶金分析，2005，25(1):34－35.

GAO Jiayou.Determination of chromium(Ⅵ)with rhodamine 6G by fluorescence quenching method［J］.Metallurgical Analysis，2005，25(1):34－35.

［65］ 高甲友.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定食鹽中痕量碘酸根［J］.冶金分析，2003，23(3):38－39.

GAO Jiayou.Determination of trace iodate ion by fluorescence quenching method［J］.Metallurgical Analysis，2003，23(3):38－ 39.

［66］ 李建國，王耀榮，魏永前，等.硒(Ⅳ)－碘化物－羅丹明6G體系熒光猝滅反應(yīng)測(cè)定茶葉中痕量硒［J］.分析試驗(yàn)室，1997，16(5):54－56.

LI Jianguo，WANG Yaorong，WEI Yongqian，et al.Determination of trace selenium in tea leaves based on fluorescenceⅥquenching with Se(Ⅳ)－I－rhodamine 6G system［J］.Chinese Journal of A－nalysis Laboratory，1997，16(5):54－56.

［67］ 高甲友.熒光光度法測(cè)定痕量過氧化氫——基于對(duì)羅丹明6G的熒光猝滅效應(yīng)［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2008，44(2): 189－190.

GAO Jiayou.Fluorescence determination of trace hydrogen peroxide:Based on the fluorescence quenching effect of rhodamine 6G［J］.Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis)，2008，44(2):189－190.

［68］ 王 鋼，何應(yīng)律，趙中一，等.鎘－碘化鉀－羅丹明6G水相熒光體系的研究［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，1994，30(3):148－150.

WANG Gang，HE Yinglyu，ZHAO Zhongyi，et al.Study on the fluorescence reaction system of Cd－KI－rhodamine 6G in water solution［J］.Physical Testing and Chemical Analysis(Part B: Chemical Analysis)，1994，30(3):148－150.

［69］ 王 鋼，何應(yīng)律，趙中一，等.羅丹明6G水相熒光光度法測(cè)定汞［J］.巖礦測(cè)試，1993，12(2):159－160.

WANG Gang，HE Yinglyu，ZHAO Zhongyi，et al.Rhodamine 6G water fluorescence spectrophotometry determine Mercury［J］.Rock and Mineral Analysis，1993，12(2):159－160.

［70］ 梁愛惠，章表明.羅丹明6G熒光猝滅法測(cè)定痕量次氯酸根［J］.桂林工學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，28(2):212－215.

LIANG Aihui，ZHANG Biaoming.Determination of trace hypochlorite with rhodamine 6G by fluorescence quenching method［J］.Journal of Guilin University of Technology，2008，28(2): 212－215.

［71］ 麻文勝，黃國霞，梁愛惠，等.羅丹明染料熒光猝滅法測(cè)定超痕量辣根過氧化物酶［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2009，29(3): 759－761.

MA Wensheng，HUANG Guoxia，LIANG Aihui，et al.Fluorescence quenching assay of ultratrace horseradish peroxidase using rhodamine dye［J］.Spectroscopy and Spectral Analysis，2009，29 (3):759－761.

［72］ JIE Nianqin，ZHANG Qiang，YANG Jinghe，et al.Determination of chromium in waste－water and cast iron samples by fluorescence quenching of rhodamine 6G［J］.Talanta，1998，46(1):215－219.

［73］ MA Chunhua，LIN Liping，DU Yanyan，et al.Fluorescence quenching determination of iron(III)using rhodamine 6G hydrazide derivative［J］.Analytical Methods，2013(7): 1843－1847.