桂枝桃仁及其配伍對抗凝血作用影響的研究*

周 蓓

(廣西中醫藥大學藥學院， 廣西 南寧 530001)

臨床常以桂枝、桃仁兩藥配伍基本構成的方劑，利用通脈行瘀的特點，用來治療瘀血內結的各種病證。目前實驗報道多集中對單味藥或將桂枝-桃仁放入中藥復方的藥效學研究，而對兩者配伍后的報道甚少。因此，本研究在中藥七情配伍理論的指導下，觀察桂枝-桃仁配伍后與單味藥相比，對小鼠出、凝血時間和凝血酶時間的影響，探討兩者的配伍關系。

1 材料

1.1 實驗動物 昆明種小鼠，體重為(20±2)g，雌雄各半，由廣西中醫藥大學實驗動物中心提供。動物合格證號：SYXK 桂2011-0001。

1.2 藥物 桂枝為樟科喬木植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的嫩枝[1]。桃仁為薔薇科小喬木桃[Prunus persica(L.)Batsch或山桃P.davidiana(Carr.)Franch.]的成熟種子[1]。桂枝、桃仁均購置廣西中醫藥大學附屬第一醫院中藥房，并經廣西中醫藥大學藥學院中藥鑒定教研室教授鑒定為正品。生產批號：20110701。阿司匹林腸溶片，25 mg/片，南京白敬宇制藥有限責任公司。無菌生理鹽水，100 mL/瓶。

凝血酶時間測定試劑盒(液體)，購自南京建成生物工程研究所。GB-204型電子秤，瑞士梅特勒-托利多儀器上海有限公司。內徑1 mm，長15 cm的玻璃毛細管，華西醫科大學儀器廠。移液槍，上?？蠌妰x器有限公司。磨砂載玻片、鑷子、剪刀、離心管1.5 mL、灌胃針頭、注射器、濾紙、秒表、解剖刀、小鼠固定器等均由廣西中藥藥效研究重點實驗室提供。

2 方法

2.1 分組 取昆明種小鼠50只，按小鼠體重隨機分5組：空白組；阿司匹林組；桂枝組；桃仁組；配伍組。

2.2 藥液制備 按照傳統煎煮法，將藥材桂枝、桃仁、桃仁-桂枝(1：1)分別煎煮。先將藥材置煎煮容器內，加5～7倍量的自來水浸泡30 min，過濾。煎煮3遍，頭煎40 min，藥渣加3～5倍量水繼續煎煮，二煎20 min，混勻，合并2次濾液，濃縮至所需濃度。冷卻裝入滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。

2.3 處理方法 所有小鼠分籠飼養于廣西中醫藥大學實驗動物中心。自由飲水、進食，定期更換墊料，適應環境3 d后，開始灌胃，灌胃嚴格遵循操作規則及濃度要求，減少由操作不當引起的動物死亡。每日1次，連續10 d。灌胃均按0.2 mL/20 g?？瞻捉M給予等體積的生理鹽水。

2.4 觀察指標及檢測方法

2.4.1 小鼠出血時間的測定 采用斷尾法[2]。末次給藥1 h后將小鼠固定，用毫米尺測量尾長度后，用手術剪于距尾尖1.5 mm處剪斷尾，待血液自行溢出開始計時，每間隔30 s用濾紙吸去血滴1次，直至血流自然停止(用濾紙吸時無血為止)，即為出血時間。

2.4.2 小鼠凝血時間的測定 采用毛細玻管法[2]。末次給藥1 h后，將內徑為1 mm，長度為15 cm的玻璃毛細管插入小鼠內眥球后靜脈叢，至毛細玻管內血柱超過10 cm時取出，平放于桌面，每隔30 s折斷毛細管約0.5 cm，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血絲，自血液流入毛細管內開始計時，至血凝絲出現為止，即為凝血時間。

采用玻片法[2]。末次給藥1 h后，將5號針頭插入小鼠眼眶內，使血液自動流出，去掉第一滴血后，在載玻片上滴1滴血，直徑大約5 mm，立即用秒表計時，每隔30 s用大頭針自血滴邊緣向中間輕挑一次，當有血絲挑起時停止計時，即為凝血時間。左右各測一次，取平均值。

2.4.3 小鼠凝血酶時間測定 小鼠來源、分組、給藥同前，末次給藥后1h摘眼球取全血，全血與0.109M的檸檬酸三鈉按9：1混合均勻，3000 rp離心15min，收集上層血漿，轉移到離心管中，預熱至37℃水浴，孵育3 min，加配制好的凝血酶試劑0.l mL，秒表記錄。實驗操作嚴格按照試劑盒要求操作。

3 結果

3.1 對小鼠出血時間的影響 見表1。

表1 各組小鼠出血時間比較

注：與空白組比較，﹡P<0.05；與阿司匹林組比較，▲P<0.05；與桂枝組比較，△P<0.05

3.2 對小鼠凝血時間的影響 見表2。

表2 各組小鼠凝血時間比較

注：與空白組比較，﹡P<0.05；與阿司匹林組比較，▲P<0.05

3.3 對小鼠凝血酶時間的影響 見表3。

表3 各組小鼠凝血酶時間比較

注：與空白組比較，﹡P<0.05；與阿司匹林組比較，▲P<0.05

4 討論

配伍理論是中藥復方的核心問題，藥對是中藥復方配伍中最基本、最常見和最簡單的形式，專指臨床上相對固定的兩味藥所組成的方劑。藥對桂枝、桃仁源于經方，屬張仲景最具特色的配伍之一。中醫藥理論認為，桂枝與桃仁兩藥配伍，共奏活血化瘀，消癥散結之效。其中桃仁味苦甘平，苦能泄降導下以祛瘀，甘能和暢氣血以生新，為活血通經常用之藥；桂枝甘溫助陽，可行里達表，以“動”為用，有溫通一身之陽氣、流暢血脈而和血散瘀之功[3]。仲景化瘀消癥一類方劑如《金匱要略》桂枝茯苓丸、《傷寒論》桃核承氣湯、《金匱要略》鱉甲煎丸、“調經祖方”的溫經湯等均以此為基本藥對。

現代藥理學研究表明，絕大部分具有活血祛瘀作用的中藥均有不同程度的抗凝作用?，F代醫學認為：正常的止血、凝血過程與血管壁的結構與功能、凝血因子的含量及其活性等因素密切相關。桂枝具有抗菌、抗病毒、解熱鎮痛、鎮驚、抗驚厥、抗炎，對心血管作用等多種藥理活性[4]。其中，桂皮油能使血管擴張，增強血液循環，改善外周循環的作用，桃仁提取物有顯著抑制血凝的作用，并且能擴張外周血管，增加器官血流量[5]。本研究結果表明，與桂枝組比較，配伍組抗凝血的作用更強，符合七情理論“相使”的配伍關系，以桃仁為主，桂枝為輔的藥對配伍的功效優于其中的單一藥物。本研究以期為桂枝、桃仁藥對的臨床合理遣藥組方提供實驗依據，為促進桂枝-桃仁藥對的理論研究和臨床應用提供參考。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中國藥典[M].北京：化學工業出版社，2005：195-196.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學[M].第2版，北京：人民衛生出版社，1996：8.

[3]郭延東.張仲景運用桂枝對藥探析[J].中國中醫基礎醫學雜志，2011，17(4)：430-431.

[4]《中華本草》委員會.中華本草[M].上海：上?？茖W技術出版社，1999：1626.

[5]何賽萍，徐曉東.桃核承氣湯析[J].浙江中醫學院學報，1999：23(5)：9-11.