雌激素治療對絕經婦女Th1/Th2平衡的影響

盧寨娥 蔣競

雌激素治療對絕經婦女Th1/Th2平衡的影響

盧寨娥 蔣競

目的 探討雌激素治療對絕經婦女輔助性T細胞1（Th1）/輔助性T細胞2（Th2）平衡的影響。方法將研究對象分為生育年齡組、絕經組、雌激素治療組共3組，每組各10例，分離、培養所有研究對象外周血T淋巴細胞，ELISA法測培養液上清液IL-4、IFN-γ質量濃度，并計算IFN-γ/IL-4比值。結果絕經組IFN-γ水平明顯高于生育年齡組、IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統計學意義（P＜0．05或0．01）；雌激素治療組IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統計學意義（均P＜0．01）；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經組、IL-4水平顯著高于絕經組、IFN-γ/IL-4比值顯著低于絕經組，差異均有統計學意義（P＜0．05或0．01）。結論絕經后發生Th1/Th2平衡變化，出現向Th1漂移現象，而雌激素治療能改善Th1/Th2平衡的偏移。

雌激素 絕經 Th1/Th2細胞

CD4+輔助性T細胞（Th）按產生細胞因子的種類不同分為兩大類：輔助性T細胞1（Th1）和輔助性T細胞2（Th2），Th1主要分泌IFN-γ、IL-2、TNF等Ⅰ型細胞因子，參與細胞毒性T細胞介導的細胞免疫，在抗細胞內感染（如病毒感染、結核分枝桿菌感染等）中發揮重要作用；而Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等Ⅱ型細胞因子，其功能在于刺激B細胞增殖及嗜酸性粒細胞活化，促進抗體（IgG1與IgE）產生，參與體液免疫，在抗細胞外感染與致敏原引起的免疫應答中起重要作用。目前，我國已步入老齡化社會，相關老年疾病如骨質疏松癥、心血管疾病、感染性疾病、老年癡呆癥、尿失禁等嚴重影響絕經婦女的生活質量。隨著2002年 WHI（Women′s Health Initiative）研究問世，有關激素治療的臨床應用與利弊分析再次成為世界關注的熱點。本研究通過給予手術絕經或自然絕經婦女雌激素口服3個月，觀察雌激素治療后Th1、Th2型細胞因子IFN-γ、IL-4水平的變化，了解和明確雌激素治療對絕經婦女免疫功能的影響。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2009-01—2011-l2本院婦產科門診的女性患者30例，年齡25～35（27±4.57）歲者10例（生育年齡組），具有正常卵巢功能、月經規則；年齡48～60（53±2.48）歲者20例，均因良性疾?。ㄈ缱訉m肌瘤）行手術切除子宮與雙側卵巢，其中10例為絕經組，10例為雌激素治療組。治療組絕經婦女具有激素補充療法適應證，無激素補充療法禁忌證，在入組前至少3個月未接受激素補充治療。所有研究對象無免疫系統疾病，1年內未使用過對免疫功能有影響的藥物。

1.2 給藥方法 生育年齡組及絕經組均口服安慰劑1片/d，連續服用3個月；雌激素治療組口服戊酸雌二醇片（商品名：補佳樂）1mg/d，連續服用3個月。

1.3 IL-4和IFN-γ水平測定 所有研究對象用藥3個月后抽取外周靜脈血，分離外周血淋巴細胞，制備T淋巴細胞懸液，取1×106/ml T淋巴細胞置于RPMI 1640中加10%FBS，0.1mM MEM非必須氨基酸，5mM L-谷氨酸鹽，100μg/ml鏈霉素，100IU/ml青霉素，在37℃、5%CO2培養箱中培養24h，培養后取上清液，采用ELISA法測定IL-4和IFN-γ水平。

1.4 統計學處理 采用SPSS11.0統計軟件，計量資料均以表示，組間比較采用方差分析。

2 結果

3組對象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比較見表1。

表1 3組對象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比較

由表1可見，絕經組IFN-γ水平明顯高于生育年齡組、IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統計學意義（P＜0.05或0.01）；雌激素治療組IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統計學意義（均P＜0.01）；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經組、IL-4水平顯著高于絕經組、IFN-γ/IL-4比值顯著低于絕經組，差異均有統計學意義（P＜0.05或0.01）。

3 討論

絕經期婦女卵巢功能衰退，體內雌激素水平下降，出現免疫老化和免疫功能的重塑[1-3]。正常免疫功能的維持依賴于適度的淋巴細胞凋亡及精確的Th1/Th2平衡。大量研究證實，Th1和Th2是一對重要的調節細胞，同時Th1和Th2細胞又互為抑制細胞，Th1細胞分泌的IFN-γ可抑制Th2細胞的分化和功能，Th2細胞分泌的IL-4可抑制Th1細胞的分化和功能。單個細胞表達細胞因子并非隨意性的，IL-4和IL-5常同時表達，IL-4和IFN-γ通常相互排斥。故有時Th1或Th2細胞即指產生IFN-γ或IL-4的細胞[4]。研究發現，老年人外周血CD4+T細胞產生的IFN-γ高于年輕組，而IL-4降低[5-7]，提示老年個體有Thl極化現象。

相關研究發現，性激素可影響Th1/Th2平衡[8]。近年來有研究報道，激素補充治療能夠改善絕經婦女Thl/ Th2平衡，影響骨代謝[9-10]。性別和性激素可影響Th1/Th2型細胞因子產物。與女性相比，男性淋巴細胞與植物血凝蛋白共培養后產生高水平的IFN-γ和IL-2，而IL-4和IL-10的水平較低[11]。目前，已有大量證據表明，女性絕經后自發出現的Th1型細胞因子增加與卵巢功能減退有關[12]，表明雌激素水平可影響體內Th1/Th2平衡，引起Th1/Th2平衡向TH1漂移，可能是引發衰老機體免疫功能紊亂，削弱了機體對抗細胞外微生物感染的能力的一個重要原因。本研究結果顯示，絕經組婦女IFN-γ水平明顯高于生育年齡組，絕經組IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，提示絕經婦女Th1/Th2平衡向Th1漂移，削弱了老年機體對抗細胞外微生物感染的能力；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經組、高于生育年齡組，IL-4水平顯著高于絕經組、低于生育年齡組，可見雌激素治療可以明顯改善絕經婦女Th1/Th2平衡向Th1漂移，從而可能增加了機體對抗細胞外微生物感染的能力。

綜上所述，隨著年齡增長，Th1/Th2平衡向Th1漂移，引起Th1型細胞因子IFN-γ分泌增加，削弱了機體對抗細胞外微生物感染的能力，引發衰老機體免疫功能紊亂。雌激素治療后可以減少絕經婦女Th1型細胞因子IFN-γ的分泌，從而糾正Th1/Th2失衡，促進抗體（IgG1與IgE）產生，參與體液免疫，而Th2型細胞因子IL-4分泌增加，增強機體對抗細胞外微生物感染的能力，干預免疫衰老，可為激素替代治療提供有利的理論依據。

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Effects of estrogen therapy on the Th1/Th2balance in postmenopausal women

ObjectiveTo investigate the effects of estrogen therapy on Th1/Th2 balance in postmenopausal women．MethodsThe study included 10 women in child-bearing period,10 postmenopausal women and 10 postmenopausal women with estrogen therapy．The peripheral blood lymphocytes were separated and cultured,the levels of IL-4 and IFN-γ in cultured supernatant were measured by ELISA,and ratio of Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)was calculated．ResultsThe IFN-γ level in postmenopausal women was significantly higher,the IL-4 level was lower and the IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period women(P＜0．05 or 0．01)．The IL-4 level in estrogen therapy group was lower and IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period group (both P＜0．01)．The IFN-γ level was lower,the IL-4 level was higher and the IFN-γ/IL-4 ratio in estrogen therapy group was lower than those in postmenopausal group (P＜0．05 or 0．01)．ConclusionThe peripheral blood lymphocytes shift towards Th1in post-menopausal women,and estrogen therapy can regulate the Th1/Th2balance．

Estrogen PostmenopausalTh1/Th2cell

2012-11-06）

（本文編輯：歐陽卿）

浙江省醫藥衛生科研基金資助項目（2006A106）

315000 寧波市婦女兒童醫院婦產科