王 程 彭仁欣 歐陽石連 鄭 詩 駱 磊
(長沙醫學院,湖南 長沙 410219)
水迷宮是由英國學者在1981年設計建立的,現已廣泛應用于神經學的研究[1]。丁草胺(Butachlor),一般用作水稻田除草。我國農藥使用量一直非常高,同時由于農藥的殘留性高且不易降解,會對環境產生較大污染。據有關研究顯示,丁草胺會嚴重影響生物的神經系統,并導致學習記憶能力下降,另外由于農藥殘留還會對食物鏈中各個環節的生物產生影響,最終影響人類的健康。本研究針對丁草胺對小白鼠記憶能力的影響進行探討,現做如下報告。
選取實驗用健康小白鼠 40 只,體重(30.12±1.03)g,雌雄各 20 只,將全部小白鼠進行編號處理,根據小白鼠編號進行分組,其中高濃度觀察組(A組)10例,中濃度觀察組(B組)10例,低濃度觀察組(C組)10例,空白對照組(D組)10例,四組小白鼠在性別、周齡等方面的一般資料差異不具有統計學意義(P>0.05),具有可比性。
全部小白鼠均用數量進行適應性喂養2周,其中A、B、C三組小白鼠分別以灌胃方式染毒,其丁草胺濃度分別為4.0mg/kg、2.0mg/kg、1.0mg/kg,連續染毒21日后用水迷宮系統進行實驗,以驗證丁草胺對小白鼠記憶能力的影響,空白對照組以蒸餾水作為對照藥劑。
水迷宮系統:該系統采用直徑2米的圓形水池,其內含一個直徑1.5米的小水池,在實驗前給池內注入適量黑墨水,以避免小白鼠直接看見平臺,將池內劃分為4個象限,在第一象限內加入一個平臺,在實驗階段不改變平臺的位置,并在水池內設置指引小白鼠方向的標記物,實驗中用簾子隔斷水迷宮系統與外界的聯系,避免因外界影響而導致實驗誤差[2]。實驗工作人員通過固定攝像頭觀察簾內試驗情況。
訓練方法:在停止染毒之后對小白鼠進行訓練,連續訓練5日,每日每只小白鼠訓練4次。首次訓練前先將小白鼠放入水池中自由游泳3min,使其熟悉實驗環境。依次從4個象限將小白鼠放入水池中,放入時小白鼠保持面向池壁,若小白鼠于1min內找到平臺則記錄其時間;若小白鼠沒能在1min內找到平臺,則由實驗人員將小白鼠陰道至平臺停留5s。
實驗中A組、B組、C組小白鼠在入水次數相同時其平均逃避潛伏期均比D組時間長,除C組第一次入水與D組平均逃避潛伏期無明顯差異外,其他差異均具有統計學意義(P<0.05)。詳見表1。
于同一象限入水時,A組、B組、C組的平均逃避潛伏期均比D組長,其數據差異具有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表1 不同入水次數的平均逃避潛伏期(x±s)(s)

表2 不同象限的平均逃避潛伏期
丁草胺作為常用的農田除草劑,在農田以及土壤中都會有一定的殘留,并且丁草胺具有降解難的特點[3]。
本研究結果表明高、中、低不同劑量的除草劑丁草胺均會使小鼠的記憶能力下降而導致平均逃避潛伏期和平均游泳距離變長,隨著除草劑丁草胺濃度的增加影響更為顯著 (建立在與對照組相比的基礎上),這說明一定濃度下的丁草胺對小鼠產生較大的毒害影響,與上述相關研究結論一致。評估丁草胺對小鼠記憶功能的影響時,第1次入水和遠離目標象限的象限入水所測定的數據更具可信性,因為第1次入水反映更多的是小鼠的短時記憶或長時記憶。而遠離目標象限的象限入水所得的數據,也能降低了小鼠找到逃避平臺的隨機偶然性對實驗結果的影響。
[1]方松,余化霖.Morris水迷宮實驗中海馬相關空間學習記憶的研究進展[J].國際病理科學與臨床雜志,2010,04(11):321-326.
[2]李愛萍,趙慧,李韶,樸花,孫長凱.不同鼠種在Morris水迷宮學習記憶行為中的種屬差異[J].中國行為醫學科學,2009,01(03):35-37.
[3]劉忠珍.丁草胺與土壤及土壤組分作用機理的研究[D].杭州:浙江大學,2009.