143例育齡人群地中海貧血基因診斷結果的分析

【摘 要】目的：了解本縣地中海貧血基因型的分布情況，為本縣育齡人群優生優育提供遺傳咨詢。方法：采用PCR和反向斑點雜交技術檢測293例篩查陽性標本。結果：293例中143例基因診斷為地中海貧血攜帶者，α-地中海貧血基因攜帶者98例（其中HbH病4例），β-地中海貧血攜帶者37例，α-地貧復合β-地貧攜帶者8例 。結論：廣泛宣傳地貧知識、擴大篩查范圍、加強基因診斷是地貧高發區提高人口質量、阻斷重型（包括中間型）地貧患兒出生的有效途徑。

【關鍵詞】地中海貧血；基因診斷； 篩查

【中圖分類號】R556 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2014）02-0574-02

地中海貧血是一組嚴重威脅人類健康的致死、致殘的遺傳性血液病，該病在我國南方有較高的發病率，廣西地區α-和β-地中海貧血的發病率最高，其中α-地中海貧血基因攜帶率17.75%，β-地中海貧血基因攜帶率6.54%[1]，每年重型地中海貧血出生新生兒>3000人（包括中間型地中海貧血）[2]，而重癥地貧目前尚無理想的治療方法且需付出高昂的代價，預防措施是通過基因診斷阻止重型地貧患兒的出生。地中海貧血基因突變有明顯的地域群體差異性，現將 143份診斷結果分析如下：

1 研究對象和方法

1.1 研究對象、標本采集和保存

在賓陽婦幼保健院進行孕檢、婚檢和全縣各鄉鎮衛生院RBC指標MCV和（或）MCH篩查陽性的孕婦及其配偶共293例，每例均是自愿檢查并簽訂地貧基因診斷知情同意書。抽取RBC指標篩查陽性的患者靜脈血4ml，2 ml置ETDA-K2抗凝管抗凝2-8℃保溫運送本地區指定的產前篩查中心，未能及時送檢標本4℃冰箱保存，一周內送檢，另2ml用ETDA抗凝做血紅蛋白分析。

1.2 方法

采用全自動血細胞分析儀分析RBC指標（MCV、MCH），血紅蛋白組分分析采用Bio-RadVARIANTTMⅡ HPLC血紅蛋白分析系統。6種常見α-地中海貧血和17種β-地中海貧血基因檢測送本地區指定的產前基因診斷中心。

1.3 篩查判斷標準

血液紅細胞指標MCV/MCH陽性標準：MCV<82fl、MCH≤27pg（廣西衛生廳標準），血紅蛋白HPLC分析HbA2正常值2.8%，HbA2>4.0%疑為β-地貧，其他類型血紅蛋白參照相應的HPLC分析數據庫及色譜予以判斷。

1.4 基因診斷檢測類型 α-地中海貧血基因檢測常見3種缺失類型（（即：東南亞缺失型（--SEA/）、右缺失型（-α3.7/）、左缺失型（-α4.2/）和3種非缺失類型類型（即：αcs/α、αQsα/、αWsα/），β-地中海貧血基因檢測中國人常見17種點突變類型即：CD41-42、CD71-72、CD27-28、CD14-15 CD31、CD17、CD43、Int、CAP、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、IVS-Ⅱ-654、βE、-32、-29、-28、-30。

2 結果

293例RBC指標（MCV、MCH）和/或低于判斷標準的雙陽夫婦中，檢出α-地貧98例（包括HbH病4例）。β-地中海貧血37例，診斷為β-地貧攜帶者的HbA2均≥4.1%，α-地中海貧血復合β-地中海貧血攜帶者8例HbA2均≥5%，HbCS、HbH病全部檢出出CS、HbH，基因檢測6中常見類型α-地中海貧血均被檢出，檢出5種β-地中海貧血突變位點，4例HbH病的基因型為：--SEA/-α3.71例、--SEA/ -α4.21例、--SEA/αcsα 2例。143地中海貧血基因診斷結果見下表一和表二：

3討論

293份RBC表型篩查陽性標本，有143例基因診斷為地中海貧血基因攜帶者，確診率占地中海貧表型篩查陽性的48.81%（143/293），尤其β-地貧攜帶者初篩和基因診斷完全吻合，充分證明在地中海貧血高發區對育齡人群大規模實行RBC指標（MCV、MCH） 篩查和血紅蛋白初診的重要性。143例地中海貧血基因攜帶者中，α-地中海貧血占68.5%（98/143），以--SEA/、αc s α/、-α3.7/ 3種類型多見，結果與報道的南寧[3]、橫縣[4]、梧州[5]相似，其中非缺失型α-地貧也占到27.66%與廣州的相同[6]，而αcsα/高于αWsα/，與有關資料不同[7]，原因可能是αcsα/能引起較重的血液學表型而被納入基因確診的范圍有關，輕型α-地貧、輕型β-地貧、α復合β地貧和中間型地貧一般引起MCV、MCH的明顯變化，表現出典型的小細胞低色素性貧血，臨床上相對不容易漏診，而靜止型地貧的 MCV、MCH通常都沒有明顯異常，臨床上極容易漏診，所以當配偶基因診斷為輕型地貧時，另一方必須做地貧基因診斷以避免中間型地貧患兒的出生（此型患者臨床表現輕重不一，輕者只有輕度貧血，重者需要依靠輸血才能維持生命），但由于地貧知識的缺乏和沒有足夠的重視，沒有表型陽性的一方通常忽視醫生的建議而不做基因診斷。37例β-地中海貧血攜帶者檢出5種基因突變類型，以CD41-42和CD17的突變為主，而較少見的IVS-Ⅰ-1（G>T ）在送檢標本不多（293份）的情況被檢出與有關資料不同 [8]，說明地中海貧血突變基因具有高度的異質性，某些突變甚至表現出明顯的地域性或群體特異性。廣西是α和β地貧高發區，必然存在較多見的α地貧和β-地復合形成的遺傳類型，由于α-復合β-地貧表型篩查表現為輕型β-地貧的特征，因此在進行基因診斷和遺傳咨詢時，對篩查為β-地貧的攜帶者一定考慮合并α-地貧的可能。缺鐵性貧血和輕型、中間型α、β地貧都表現小細胞低色素性貧血，而缺鐵性貧血在妊娠中較常見，基因診斷能明確病因對癥治療，從而避免濫用補血劑和感染時誤服氧化性藥物，而且對地貧攜帶者的保健提供指導和及早發現地貧基因遺傳家族也具有重要意義。現今廣西的免費篩查僅限于婚檢人群，基因診斷補助對象也僅限于表型篩查雙陽的夫婦，而該地區地貧和異常血紅蛋白病總攜帶率高達24.55%，同型地貧婚配的發生率也較高，同時如今臨床的基因檢測也存在缺陷，只檢測我國95-98%的地貧基因，所以有關機構支持和推進地中海貧血相關研究就顯得非常重要，由于靜止型、輕型地貧攜帶者的生理、智力、壽命都不受影響無需治療，而重型、中間型地貧卻致死、致殘，如果把篩查范圍擴大到新生兒、兒童、青少年，陽性者告知其進行基因診斷并出具檢測卡，并提供將來婚配遺傳風險咨詢，讓公眾廣泛認識地貧是可防可控的遺傳性疾病，提高基因診斷與產前診斷重要性的認識，是預防重型地貧患兒出生的有效途徑。

參考文獻：

[1] 尹曉林，張新華.地中海貧血高發地區的貧血性疾病診斷思維[J].醫學與哲學（臨床決策論壇版）2010.3（12）

[2] 徐湘民，張新華，陳荔麗. 地中海貧血預防控制操作指南[M].人民軍醫出版社，2011年3月第一版：P26.

[3] 張新華，周英杰，李平萍等.廣西南寧市農村育齡人群地中海貧血篩查及基因型和血液參數分析[J].中華流行病學雜志，2006，27（9）：769.

[4] 黃忠，呂福通，張天朗等.11446對新婚夫婦a-地中海貧血篩查結果分析血[J].中國優生與遺傳，2011，19（11）：115.

[5] 余永雄，黃麗，陳唯.梧州婚配群體的a-地中海貧血攜帶者篩查與基因診斷分析[J].重慶醫學，[2012，41（10）：1002.

[5] 屈艷霞，陳桂蘭，唐盈等.101非非缺失型a-地中海貧血基因分析[J].中國優生與遺傳，2012，20（8）：19.

[6] 徐湘民，張新華，陳荔麗， 地中海貧血預防控制操作指南[M].人民軍醫出版社，2011：P29.

[7] 王珺，云妙英，崔箭，廣西壯族地區β-地中海貧血的研究進展[J].中央民族大學學報（自然科學版），2010，19（2）：81.

[8] 徐湘民，張新華，陳荔麗. 地中海貧血預防控制操作指南[M].人民軍醫出版社，2011年3月第一版：P20.

作者簡介：

文謹，女，主管技師，研究方向：醫學檢驗，Email：2771882359@qq.com