巧妙運用疫苗特性科學制定豬群免疫程序（上）

張衛　邵永超　張建新

摘 要：本文介紹了豬免疫的一般原理和常用疫苗的特性，以及免疫程序的概念、其制定免疫程序的基本要求。分析了影響豬免疫力的有關因素，介紹了提高免疫力的途徑和抗體滴度形成、傳遞的一般規律。

關鍵詞：疫苗特性； 免疫程序

2003年的“非典”、2009年的豬流感（H1N1）、2013年的“禽流感（H7N9）”，新病毒的不斷出現，給人類健康再次敲響警鐘。同樣，隨著新病毒的不斷出現，豬病防控的壓力越來越大。因為豬群不但是容易變異的流感病毒的攪拌器，還是容易變異的藍耳病病毒的載體。加上豬群面臨多種飼養方式并存、飼養區密集、豬舍簡陋、病死豬處理手段落后導致的局部環境惡化、飼料和獸藥等投入品質量不穩等不利因素的影響，我國豬病防控面臨空前的挑戰，甚至成為人類生命和健康安全的隱患。在此非常時期，有必要強調免疫程序的重要性。本文從動物免疫的一般概念和豬用疫苗的特性入手，介紹免疫程序的重要性和制定免疫程序的原則。

1 一般概念

重溫動物免疫學的一般概念，有助于理清思路。重新認識免疫程序的意義，是做好豬群疫病防控的基礎工作。

1.1 抗逆性 動物對環境的適應能力稱之為適應性，衡量動物對不良環境因素的適應性強弱時使用抗逆性的概念。

1.2 免疫和免疫力 能夠避免感染某種疫病的現象稱之為免疫，免疫力是衡量動物抵御疫病侵襲能力的指標。

1.3 豬免疫力高低的一般規律 豬同其他哺乳動物一樣，有對疾病的非特異性免疫（多數是先天性）和特異性（包括出生后自然接觸形成的免疫能力和人工接種疫苗形成的免疫能力，也稱獲得性免疫）免疫兩種免疫能力。顯然，免疫力的高低同豬的品種有關，也同品系、雜交組合、自身的親緣系數、年齡，以及豬的生理狀態、身體健康狀況有關。臨床衡量特異性免疫力的高低，通過抗體檢測完成。對一個具體樣本，用抗體的滴度（用以2為底的對數形式反映，如21、22、……210表示，或1∶2、1∶4、1∶8、1∶16……1∶1024、1∶2048表示）。對于一個群體，則用免疫后群體隨機抽樣的抗體合格率表示。

1.4 影響豬免疫力高低的因素 在一定的區域內，或者在某一個豬場，會有如下表現：

1.4.1地方土種豬抵抗在當地流行疫病的能力要比外來品種強一些。高度純化的品系（或家族）的抗病力低于純度低的品系（或家族）。

1.4.2雜交后代的個體和群體抗病力較高。但是，近交的家系、家族成員的抗病力明顯降低。父母雙方血緣關系較遠或者不同品種之間的雜交，其后代抵御惡劣環境和抗擊疾病的能力明顯高于純繁個體和近交個體。

1.4.3某些疫病的病原微生物僅在一定年齡段致病。例如仔豬副傷寒臨床只在20日齡以上、半歲以下豬群發病，紅痢多見于2日齡以內、黃痢見于5～20日齡、白痢見于20～60日齡仔豬群等。

1.4.4豬的體質下降時感染或發生疫病是最常見的現象。如群體位次最末的小豬容易發病；高溫季節長期的熱應激狀態下豬的抗病力下降，容易發病；冬季寒冷時由于關閉豬舍門窗導致通風不良，豬群容易發生呼吸道疾病或通過空氣傳播感染疫病的大面積流行。

1.4.5氣候因素。疫病的發生，除了同豬自身因素有關之外，氣候條件、氣溫變化也是重要因素。如大風、降溫、濃霧等因素常誘發疫病。某些疫病本身就是季節性流行的疫病。只是在管理水平較高時，不易大面積流行而是零散發生罷了。如常在夏季發生的豬的乙型腦炎、豬附紅細胞體病、豬弓形體病，常在冬季發生和流行的口蹄疫病等。

1.4.6局部小環境是否符合豬的生長發育需要，不僅影響豬的生長速度，也會導致豬抗病力和免疫力降低。例如，一些豬舍面積不夠、或者豬舍設計有缺陷的豬群容易發病，集中養豬區的豬群容易發生流行性疫病。

1.4.7管理因素常常是疫病爆發的導火索。曾經發生過因閹割、轉群、然放爆竹、排放天然氣導致豬群發生疫情的事件。

1.4.8其他因素。飼料質量不佳、飼料霉變導致疫情發生的事件更是司空見慣。寄生蟲病的存在，常常導致羸弱個體的形成，使之成為疫病爆發的突破口。

1.5 提高豬群免疫力的途徑 在品種、環境、飼養、管理等條件確定的情況下，要提高豬群的抗病力，常用的辦法是免疫接種和藥物預防。

豬群只有少數疫病可以通過健康豬同染疫豬（或隱性感染的帶毒帶菌豬）的相互接觸形成免疫。如細小病毒病，通常產仔3胎以上或3歲后的母豬不再免疫細小病毒疫苗。大部分疫病需要通過人工接種疫苗才能形成有效的免疫力，甚至需要數次免疫。

黏膜免疫：是指對豬群通過鼻腔噴霧、滴鼻的方式接種疫苗之后，刺激豬的上呼吸道黏膜，形成呼吸道上皮組織分泌富含抗體的黏液，截斷病原微生物通過呼吸道進入肺部的免疫機制。多用于呼吸系統感染疫病的預防。

體液免疫：是指對豬體接種疫苗之后，特定抗原刺激豬體，激活豬體的網狀內皮系統，從而引起體內免疫器官產生大量特異性抗體，并激活體液中廣泛存在的B細胞、T細胞，從而殺滅并清理體內病原微生物的過程。

細胞免疫：是指接種疫苗之后，特定抗原直接激活豬體內具有免疫功能的細胞，免疫細胞迅速釋放免疫物質進入體液，進而殺滅病原微生物的過程。細胞免疫發揮作用需要的時間較短。據報道，多數弱毒活疫苗免疫時，能夠激活細胞免疫。

免疫現象的物質基礎是特異性抗體的存在。體液中普遍存在的抗體具有對多數體積較大病原發生中和反應的能力，通俗的說法是具有較寬的免疫譜。但是，對于一些體積較小的病原微生物（或稱小顆粒病原微生物），如細小病毒、圓環病毒、藍耳病等直徑只有10～30μm的病毒，抗病毒藥物難以殺滅。所以，體內抗體的多少，尤其是體內特異的能夠殺滅某種特定病毒的抗體水平的高低，直接決定著免疫效果。對于直徑較大的病原微生物，可以通過激活體液免疫予以殺滅，而那些直徑較小的病毒，則必須通過激活細胞免疫才能有效清理。

2 豬用疫苗的種類和特點

疫苗分類的方法很多，按照形態分類有固體疫苗（包括干粉劑）、液態疫苗，按照活性特征可分為活苗（弱毒苗）、死苗（滅活苗），按照保存溫度可分為冷凍苗（0～15℃）、常溫苗（2～8℃）等。這些分類方法適用于不同的工作環境，在不同的人群中使用。對于免疫程序制定者來說，更高的要求是除了必須熟悉前述分類以外，還應掌握疫苗的具體特性，以及不同保存方式可能帶來的影響，如佐劑的類型、制作工藝、解凍速率、稀釋倍數、免疫應答的強弱等。

2.1 弱毒活疫苗具有生物活性，不僅要求嚴格的冰凍保存條件，而且對運輸中的顛簸震動、解凍溫度、解凍液的pH值、滲透壓都有嚴格要求。通常其周轉箱內都放置冰袋、箱體都有隔熱防震層、使用具有制冷功能的專用車輛運輸，并且都配備有專門的解凍液以保證活性。由于具有良好的生物活性，弱毒活疫苗接種后，豬體的免疫應答反應明顯，抗體產生的也較快。多數弱毒活疫苗在首次免疫的情況下，接種7 d后可在血樣中檢測到抗體，在2～3周間達到保護水平。最新的報道甚至認為只有弱毒活疫苗可以激活細胞免疫。顯然，弱毒活疫苗在具有前述優勢的同時，包裝、運輸、保存條件苛刻使其伴隨的屬性，運輸、保管環節一旦脫離冷凍環境，野蠻裝卸、未使用規定的解凍液、添加藥物，或解凍操作不當時，都有可能使弱毒活疫苗降低或失去活性。此外，解凍液體積過大、操作時未采取有效的保定措施、接種廢棄物未按規程集中處理，又容易導致散毒污染養豬環境的時間發生。所以，許多能夠威脅人畜健康和對養豬業危害嚴重的疫病，不貿然使用弱毒活疫苗進行免疫。

為了獲得同時激活體液免疫和細胞免疫，克服全基因弱毒活疫苗散毒的缺陷，近些年，科學家利用基因工程技術原理，設計了基因缺失疫苗，即利用生物工程技術將病毒中的有害基因或包含有害基因的片段切除掉，或者在基因中鑲嵌進某種基因或其片段。投入生產中使用的基因缺失疫苗是指缺少某個基因位點或某些基因片段些的疫苗，添加基因或片段的疫苗稱為基因工程苗。二者都是弱毒活疫苗，

為了減輕接種弱毒活疫苗的免疫應答反應，同時也為了提高弱毒活疫苗的抗逆性，一些疫苗生產企業又設計了專門的佐劑和稀釋液。這類疫苗在供給豬場使用時，一般都配給專門的稀釋液，使用時必須使用其配給的稀釋液，否則，將會降低其免疫效價。

2.2 滅活疫苗不具生物活性，多數要求低溫保存（2～8℃），個別添加特殊佐劑的滅活疫苗可在常溫下保存。同弱毒活疫苗相比，滅活疫苗具有包裝簡單但是體積較大、運輸和保管條件相對簡單的特點。由于其基因結構完整，產生的抗體是全基因抗體，免疫效果確實，針對性也很強；缺陷是接種后豬體激活較慢，首次免疫的多數在2周左右才能在血樣中檢測到抗體，抗體滴度達到保護水平則需4周。顯然，由于免疫后抗體上升的較慢，對于多發的混合感染病例使用滅活疫苗時難以實現迅速發揮作用之目的。顯然，繁殖豬群使用滅活疫苗，不用擔心因接種過程中操作不規范導致的散毒。

早期的某些滅活疫苗由于佐劑的原因，接種后的免疫應答同樣強烈，應嚴格按照說明書標定的劑量使用，不得加大劑量。近年上市的某些滅活疫苗由于佐劑的改進，接種后的免疫應答輕微。山東省農科院濱州畜牧獸醫研究院沈志強發明的蜂膠佐劑最為突出，其蜂膠佐劑新城疫疫苗接種于產蛋雞后，僅有5 d的產蛋量輕微下降；其偽狂犬gE缺失滅活苗、普通藍耳病滅活疫苗、肺炎和關節炎型鏈球菌滅活疫苗、三價大腸桿菌疫苗，用于妊娠后期母豬非常安全，甚至10日齡仔豬接種后也未見采食量下降。

不企求短期內發揮免疫作用的非發病豬群，可以使用滅活疫苗。

經常使用基因缺失弱毒疫苗的繁殖豬群每年應使用一次全基因疫苗（滅活疫苗或弱毒疫苗）。使用基因片段缺失弱毒活疫苗的豬群，更應注意此問題。否則，會出現檢測時免疫抗體滴度很高但豬群依然發病的現象。某些基因缺失過多的疫苗，甚至可以作為干擾素使用，如武漢科前公司的偽狂犬HB98株，雖然正常使用時抗體正常但保護力較差，但在數種病毒病混合感染的臨床疫情控制中效果良好。

盡管滅活疫苗不具有生物活性，但是超過保質期限、或者未超過保質期限但是保存溫度超過了規定的溫度要求，都可能導致疫苗失效或變質。前者導致免疫失敗，后者甚至造成接種后大群在數小時內發病的免疫事故。

某些種類的滅活疫苗，由于佐劑的刺激性強，接種部位常形成吸收不良的硬斑塊，處置不當時甚至潰爛，應嚴格執行接種劑量和日齡規定。

2.3 自家苗屬于滅活疫苗，臨床應用于多種病毒混合感染疫情的控制，在容易變異的病毒病占主導地位的背景下，臨床效果最為突出。但應注意盡可能不用或少用。因為，自家苗的制作要求嚴格的環境和技術條件，未達到要求的條件下生產的自家苗隱患較多，如采集病料時摘取的不準確，漏掉了病變器官的淋巴結，取之于沒有代表性病例的病料、全部來自于病死豬或死亡時間超過6 h的病豬，滅活不徹底，制作過程中操作或環境污染，佐劑的質量和添加量不準確，沒有進行滅活效果評價、缺少免疫效價評價等，均可能導致臨床應用效果的降低或無效，嚴重時甚至造成免疫事故。

為了控制疫情，在不得已情況下使用時，應注意下述事項：

1） 嚴格控制使用范圍，只在發病豬場的發病豬群使用。

2） 選擇技術水平較高和基礎條件較好的有資質單位制作。

3） 嚴格限制使用病種：只用于易變異的小顆粒病毒病感染占主導地位的疫病，只用于沒有疫苗可用、或現有疫苗免疫效果不佳的病毒病感染。

4） 豬瘟、口蹄疫感染或混合感染中占主導地位的病例不得使用自家苗控制。細菌感染占主導地位的病例不使用自家苗。

5） 使用過自家苗的繁殖母豬應在1～2年內逐步淘汰。

3 不同途徑的接種方法在免疫中的意義

免疫途徑俗稱接種方法。設定接種方法時要考慮疫苗自身的特性，還要考慮佐劑的性質，也要考慮接種的目的。這是因為人工制弱以后的抗原同制弱前的病原微生物一樣，具有在特定的組織或器官（靶組織或靶器官）生存、增殖的特性。不符合要求的接種途徑，會使抗原在進入靶組織或靶器官的過程中隕滅，或失去活性，難以激活免疫活動，或者延長激活時間。

一般的弱毒活疫苗的佐劑，都要考慮保護抗原活性，多數在佐劑中添加抗生素、抗冷凍物質。某些品種的弱毒活疫苗，由于抗原用量較大，為了避免變態反應而在佐劑中添加抗過敏藥物，以避免免疫之后的應激現象。有的疫苗佐劑中添加了緩釋劑，具有控制抗原緩慢釋放的功能，形成持續刺激、持續釋放、降低接種后的免疫應答強度、抗體逐步上升的特性。2008年以來，某些企業為了提高疫苗的臨床控制作用，甚至在佐劑中添加了白細胞介素。免疫應答的強弱、刺激性、腐蝕性、緩慢釋放和緩慢作用、干擾作用的強弱。這些都是制定免疫程序時必須考慮的因素。

接種目的的差異主要表現為：①直接產生免疫力；②短時間內清理病原微生物的快速殺滅；③激活免疫機能；④相互干擾；⑤再次反應。顯然，由于免疫目的的不同，免疫時所選擇的疫苗種類、接種劑量肯定不一樣。

常用的免疫途徑包括肌內注射、口服、穴位注射、肺部注射和特殊部位注射。疫苗說明書無明確要求的疫苗，都可以通過肌內注射接種。

3.1 肌內注射免疫 指通過肌內注射給苗的接種方法，是最常用的接種方式。需要保定、捕捉，工作量大，還容易造成捕捉保定應激。因而，對于妊娠母豬和仔豬，應當嚴格執行疫苗說明書規定或獸醫囑托的接種對象和劑量接種。如豬瘟、偽狂犬、藍耳病等疫苗的接種。

3.2 口服免疫 指通過口服給苗的接種方法。某些疫苗通過口服給苗免疫效果更好，不用捕捉、保定，能夠避免捕捉保定造成的應激，也可減輕接種工作量。如布氏桿菌苗的接種。

3.3 穴位注射免疫 是指在某些特定穴位注射給苗的接種方法，是近年來免疫學同中獸醫經絡學說相結合的探索結晶。作用機理一是穴位的接種直接刺激穴位激活豬體的免疫功能，二是某些穴位靠近大血管，接種后可因滲透作用而使疫苗緩慢持續進入血液，實現長期刺激、抗體緩慢上升的目的。如仔豬流行性腹瀉疫苗的接種、仔豬黃白痢疫苗的接種等。

3.4 鼻腔接種免疫 指通過滴鼻或噴霧給苗的接種方法。這種途徑的免疫不期望產生多高滴度的抗體，只期望形成局部的黏膜免疫，使豬體認識該種疫苗，為再次免疫時形成記憶反應創造條件。如3日齡偽狂犬基因缺失弱毒活疫苗的接種。

3.5 特殊部位注射免疫 包括肺組織注射接種、胸腔注射接種、腹腔注射接種等接種方法。如南京天邦生物制品公司生產的豬喘氣病疫苗，要求直接穿透胸腔在肺部接種。

（未完待續）（編輯：何芳）