新生兒溶血病實(shí)驗(yàn)室檢測的研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢

【摘要】隨著檢驗(yàn)檢測技術(shù)的快速發(fā)展，各醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室相繼圍繞新生兒溶血病（HDN）開展多項(xiàng)產(chǎn)前產(chǎn)后檢測。本文主要對現(xiàn)階段HDN常規(guī)檢測方法，結(jié)合珠蛋白作為檢測指標(biāo)的現(xiàn)有研究結(jié)果，F(xiàn)c（gamma）Rlla（CD32）的多態(tài)性，基因探針檢測四個方面進(jìn)行了分析闡述。

【關(guān)鍵詞】新生兒溶血病，抗體檢測，基因探針檢測

【中圖分類號】R446.11

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B

【文章編號】1004-4949（2014）09-0758-02

新生兒溶血病（HDN），一般特指母嬰血型不合而引起的胎兒或者新生兒免疫性疾病。引起HDN的血型抗體可能為ABO血型抗體，Rh血型抗體，Kidd、Duffy、Kell等血型系統(tǒng)抗體也有報(bào)道，但仍以ABO血型抗體最為常見。該病的發(fā)生機(jī)制為母體的抗體免疫球蛋白透過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)后，結(jié)合于胎兒抗原陽性紅細(xì)胞，使胎兒免疫系統(tǒng)激活，造成不同程度的貧血、黃疸、水腫，嚴(yán)重者可引起新生兒高膽紅素腦病，甚至導(dǎo)致死亡。

1.HDN常見檢測方法

1.1產(chǎn)前免疫血清學(xué)檢測方法

該方法通過檢測母親血清中的IgG抗A（B）效價，以預(yù)測HDN發(fā)病的可能性。HDN的癥狀輕重一般取決于母親的抗體強(qiáng)度、亞類、胎兒紅細(xì)胞的發(fā)育程度、胎兒代償性造血能力以及免疫功能等諸多因素。但一般認(rèn)為，孕婦血清中的IgG抗體效價的高低與胎兒受害程度呈正相關(guān)，因此，準(zhǔn)確檢測孕婦血清中IgG血型抗體水平，是目前臨床診斷和預(yù)防新生兒HDN的主要方法。[1]

高效價的IgG抗體水平會在臨床用藥治療后降低，同時機(jī)體在保護(hù)機(jī)制作用下，會中和掉一定量的血型抗體，組止紅細(xì)胞破壞。所以，及時檢測母親體內(nèi)的抗體強(qiáng)度，及時治療，能夠降低新生兒溶血病發(fā)生率。[2]

1.2羊水分析

羊水分析提供了評估胎齡、肺成熟度、胎盤功能和胎兒新生兒溶血病的發(fā)展和預(yù)后的基本價值。[3]當(dāng)出現(xiàn)嚴(yán)重的新生兒溶血病時，羊水分析也適時地表明了宮內(nèi)輸血的必要性。

1.3新生兒臍血檢測

新生兒檢測主要檢測新生兒ABO及RhD血型，采用直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)，確認(rèn)新生兒是患有HDN。2011年3月，比利時的一所兒童健康研究所的新生兒監(jiān)護(hù)報(bào)告指出，直抗試驗(yàn)是診斷新生兒溶血病的基礎(chǔ)，新生兒臍血檢測應(yīng)該執(zhí)行于每個剛出生的新生兒，避免嚴(yán)重的高膽紅素血癥及其他潛在的并發(fā)癥的發(fā)生。[4]而放散試驗(yàn)一直被認(rèn)為是判定新生兒溶血病最有利的證據(jù)。試驗(yàn)使用的紅細(xì)胞比直抗試驗(yàn)多幾百倍，靈敏度很高。放散試驗(yàn)陽性，則能證明新生兒患有溶血病。[5]

2.結(jié)合珠蛋白作為HDN檢測指標(biāo)的現(xiàn)有研究結(jié)果

早前，Harran University of Medicine的Saniliurfa教授的一份研究報(bào)告提出，通過檢測臍帶血中結(jié)合珠蛋白可以確定患有溶血病的新生兒在日后發(fā)展的趨勢。[6]

實(shí)驗(yàn)表明，結(jié)合珠蛋白可以在孕產(chǎn)婦的子宮內(nèi)進(jìn)行正常的新陳代謝，然而在新生兒出生后，溶血的血液環(huán)境讓結(jié)合珠蛋白與血紅蛋白的綁定接收減少，使新生兒出生后結(jié)合前幾日，膽紅素明顯受損而急速增加。因此認(rèn)為，結(jié)合珠蛋白可能作為確定溶血病未來發(fā)展階段的預(yù)測性指標(biāo)。

3. Fc（gamma）Rlla（CD32）的多態(tài)性

2009年，國內(nèi)血型研究所的專家經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，HDN患兒和其母體內(nèi)的基因型HR131頻率較高，基因型HH131的頻率較低，而基因型HR131與Fc（gamma）Rlla（CD32）及IgG抗體亞類顯著相關(guān)，因此研究Fc（gamma）Rlla（CD32）的多態(tài)性與IgG抗體亞型的分布對預(yù)測產(chǎn)前宮內(nèi)新生兒溶血病的發(fā)展階段有重要意義。[7]

4.HDN基因探針檢測

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，許多國家已經(jīng)開始普及HDN基因探針檢測。從孕婦血漿中萃取DNA，進(jìn)行實(shí)時定量PCR檢測，如檢測出孕婦血型不合的基因型，說明胎兒發(fā)生HDN的風(fēng)險較高，如果未檢測出，則可排除HDN的風(fēng)險。[8]

以往建議在孕16周時做基因診斷，現(xiàn)有專家主張植入前診斷，若丈夫血型基因?yàn)殡s合子基因，對可能孕有或已有過HDN胎兒的高位育齡婦女，采用體外受精，在發(fā)育到6-8個細(xì)胞期時，在顯微操作下活檢單卵裂球細(xì)胞，進(jìn)行基因分析，選取缺失HDN等位基因的胚胎植入母體內(nèi)，從而避免HDN。[9]

5.結(jié)語

而對于臨床實(shí)驗(yàn)室而言，其承擔(dān)著為臨床提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)以便醫(yī)生早期診斷新生兒溶血病，適時進(jìn)行干預(yù)治療及后期隨訪的重大責(zé)任。隨著檢驗(yàn)檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，快速診斷和急性管理新生兒溶血病必將成為一個重大的實(shí)驗(yàn)檢測領(lǐng)域。[10]

參考文獻(xiàn)

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