【摘要】腦出血(intra cerebral hemorrhage,ICH)為中老年人的常見病、多發病,其致殘率和死亡率均較高是過去現在將來研究的重點之一,在進行醫學實驗中,經常要用大鼠進行測定相關指標,而造模時常因采不到合適量的血影響模型成功標準。采血是動物實驗中經常應用的一個步驟。總結筆者動物實驗過程中體會,對實驗大鼠造腦出血模型采血時提高溫度方式方法及其優缺點作如下介紹。
【關鍵詞】腦出血;動物;采血;實驗方法
065文章編號:1004-7484(2014)-06-3059-01
根據實驗要求和動物種類的不同,而確定不同的采血部位,小型動物采血方式形式較多,主要有剪尾法,心臟,腹主動脈,眼后靜脈叢,后腔靜脈,頸外靜脈等。造腦出血模型如果采用自體血,一般只要40-60μl,但因用微量注射器吸取,適合用剪尾法,筆者為尋找有效采血量可控且對鼠的傷害小的方法。
1資料與方法
1.1實驗動物spf級Wistar雄性大鼠300只,許可證號scxk(吉)-2011-0004,造模前禁食12小時,禁水6小時。
1.2實驗設備
1.2.1立體定位儀(STW-1型,中國成都儀器廠)。
1.2.2臺式牙鉆機(307-6型,中國上海齒科醫械廠)。
1.2.3微量注射器(YY0088-92型,寧波市鎮江三愛儀器廠。
1.3造模將大鼠用10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉,俯臥位固定于立體定位儀上,取頭皮正中,備皮消毒,正中切口,骨膜剝離器剝離骨膜,暴露前囟及冠狀縫,定點,用牙科鉆孔,鼠尾酒精消毒,尾端剪斷鼠尾,用微量注射器取血50ul,將微量注射器固定于立體定位儀上,注血。留針期間酒精棉球包扎鼠尾斷端傷口,術后局部噴灑慶大霉素,用牙科水泥封閉顱骨傷口,縫合頭皮,局部皮膚采用碘酚消毒,防止局部感染影響指標觀察。
2討論
2.1溫水采血前用50℃左右溫水浸泡尾部約2min,血管充血后,棉球消毒、擦干鼠尾,用消毒手術剪剪去尾尖3㎝,然后從尾根部向尾尖按摩,血自尾尖流出。
筆者體會:本方法受熱均勻但熱量散失快,且鼠尾離開水降溫快如一次采血不成功就不能立即放入溫水中加熱了,而只能向尾根方向再剪一段鼠尾也不一定能完成采血任務,且對鼠的傷害加大,失敗率不少。
2.2電吹風采血前用電吹風加熱鼠尾,血管充血后,棉球消毒,用消毒手術剪剪去尾尖3cm,然后從尾根部向尾尖按摩,血自尾尖流出。
筆者體會:本方法優點是如果加熱不到位,可多次反復加熱,能有效的完成采血任務,不須擴大鼠尾創面。缺點是易吹起浮塵鼠毛,污染手術區,因鼠是固定在體定位儀上采血,吹起的物質可能進入定位儀使其轉動困難
2.3熱貼采血前用熱貼加熱,放于鼠尾上或鼠尾放于其——因暖寶寶是長時間給人使用而設計的,溫度達不到,短時間加熱效果差,基本用此方都失敗了
2.4小的可加熱暖手水袋采血前用加完熱的水袋放于鼠尾上或鼠尾放于水袋上都行,血管充血后,棉球消毒、擦干鼠尾,用消毒手術剪剪去尾尖3cm,然后從尾根部向尾尖按摩,血自尾尖流出。
筆者體會:本方法加熱方便,采血如果量不夠可再放置繼續加熱,因鼠尾很長可將水袋放根部,從中下部向尾尖按摩就可以。建議用此方法,本方法基本能迅速有效完成采血任務,成功高于90%。
注意采完血或采血前要將鼠尾離開熱源,否則不利于止血。
參考文獻
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