MAGLUMI分析儀檢測甘膽酸的性能評價

【摘要】目的對MAGLUMI分析儀檢測甘膽酸的分析性能進行評價并報告。方法按照國際血液學標準化委員會（ICSH）制定的評價標準進行。用普通促凝管采集早晨空腹靜脈血后分離血清，測試MAGLUMI分析儀的批內重復性、日間重復性、攜帶污染率、準確性及線性性能，并與上海日華γ技術儀測定結果進行相關分析。結果各參數皆符合ICSH的要求。MAGLUMI分析儀批內、日間精密度的CV均<10%；攜帶污染率<5%；測定定值血清質控物，準確性滿意，線性良好；測定結果與放射免疫分析法結果相關性分析，r2=0.9946。結論MAGLUMI分析儀可直接用于對人血清中甘膽酸含量進行定量分析且批內重復性、日間重復性、攜帶污染率、準確性、線性及比較實驗均較好，報告結果準確可靠。MAGLUMI分析儀是一種較理想的適用于判斷肝硬化程度和預后及提示孕婦羊水污染胎兒宮內窘迫的檢測儀，值得推廣應用。

【關鍵詞】甘膽酸；MAGLUMI分析儀；性能評價

725文章編號：1004-7484（2014）-06-3576-02

甘膽酸參與機體內許多生理、病理過程，測定甘膽酸的在人體血清中的含量，不僅可以有效鑒別慢性活動性肝炎和慢性遷延性肝炎，協助臨床判斷肝硬化程度和預后，且在提示羊水污染、早產、胎兒宮內窘迫等方面有重要意義。目前，常采用化學發光和放射免疫分析兩種方法檢測甘膽酸含量。放射免疫分析法存在放射性核素易衰變以及放射性標記物不穩定，試劑有效期短，放射性核素易對周邊環境和實驗室造成污染的缺陷，MAGLUMI甘膽酸分析儀是國產的甘膽酸分析儀，可直接對血清中甘膽酸濃度進行快速簡便的定量檢測分析。最近，我們參照美國臨床實驗室標準化委員會（The Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI原NCCLS）的儀器性能驗證方法，參照美國臨床實驗室改進修正法案（Clinical Laboratory Improvement Amendment 88）簡稱CLIA’88法案為評價標準，對該儀器進行了分析性能評估，現將結果報告如下。

1資料與方法

1.1儀器

1.1.1MAGLUMI2000分析儀深圳市新產業生物醫學工程有限公司。

1.1.2上海日華γ技術儀上海核所日環光電儀器有限公司。

1.2試劑MAGLUMI2000分析儀相關配套試劑和碘[125I]甘膽酸放射免疫藥盒。

1.3樣品普通促凝管采集的空腹靜脈血經離心所得血清，樣本均來自本院門診體檢者的空腹靜脈血；定值質控由伯樂生命醫學產品（上海）有限公司（批號070130329）提供。

1.4MAGLUMI2000分析儀主要性能評估方法參照CLSI文件推薦的方法進行：

1.4.1批內精密度按照CLSI的EP5-A文件的要求，選取新鮮血清，

取高、中、低值各20份，將高值的20份血清混勻為同一管，中值和低值的各20份同上混勻，將混勻后的高中低三管血清在MAGLUMI2000分析儀上各重復測定20次，得出甘膽酸的CV%。

1.4.2日間精密度按照CLSI的EP5-A文件的要求，選取新鮮血清，取高、中、低定值質控物各一份，在MAGLUMI2000分析儀上測定，每天重復測兩次，取均值，共20天，得出甘膽酸的CV%。

1.4.3攜帶污染率按CLSI EP10-A文件要求，取新鮮血清，選取1個高值和1個低值標本，先測高值標本，重復測3次，得出H1、H2、H3；隨即測低值標本，得出L1、L2、L3。根據公式：攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%，計算MAGLUMI2000分析儀的攜帶污染率。

1.4.4線性分析按EP6-A文件的方法，對系統的線性進行驗證，將一高值的血清，用生理鹽水作100%、80%、60%、40%、20%、10%、5%不同濃度的稀釋，測定各項參數，使用EXCEL軟件計算測定值與理論值間的相關系數（r），要求r≥0.995。

1.4.5準確性由深圳市新產業生物醫學工程有限公司提供的定值質控物，分別連續測3次，取平均值計算偏倚，偏倚=（測定均值-靶值）的絕對值/靶值×100%。

1.4.6甘膽酸含量對比試驗按照CLSI EP9-A的要求，①甘膽酸含量重復性：取1份新鮮血清標本，分別用MAGLUMI2000分析儀和上海日華γ技術儀重復測定10次，分別得出甘膽酸的CV%；②相關性分析：取40份新鮮血清標本，分別用MAGLUMI2000分析儀和上海日華γ技術儀測定，每份標本2次測定間隔時間不超過5min。結果進行相關及直線回歸分析。

1.5統計學分析用EXCEL軟件進行統計分析，對比實驗數據比較用直線回歸分析。

2結果

2.1批內與日間精密度見表1。測定結果表明，MAGLUMI2000分析儀對甘膽酸測定具有很高的精密度，批內和日間精密度的CV均<10%，測定所得的變異系數達到CLIA’88規定的要求。

2.2攜帶污染率見表2。MAGLUMI2000分析儀攜帶污染率實際測定值均低于5%，完全滿足CLIA’88規定的要求。

2.3線性分析各項參數都隨濃度的稀釋而相應減低，相關系數（r）均大于0.99，表3結果表明，評估選用的線性范圍與CLIA’88規定的要求基本一致，能滿足臨床需求。

2.4準確性定值質控物測得結果與其靶值及偏倚。在偏倚范圍內，其準確性可以接受。

2.5甘膽酸測定比對試驗①MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術儀測定甘膽酸濃度重復性比對：MAGLUMI2000分析儀測定樣本的CV%分別為：6.5%；上海日華γ技術儀測定樣本的CV%為：7%；②MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術儀測定甘膽酸含量相關性分析：結果見圖1。MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術儀測定40份樣品測定結果比較：兩種方法測定的相關性很好，r2=0.9946。

3討論

甘膽酸（Cholylglycine）是膽酸與甘氨酸結合而成的結合膽酸，在血清中主要以蛋白結合形式存在，是主要膽酸之一，也是妊娠晚期血清中最主要的膽汁酸組分。測定甘膽酸在血清中的含量，不僅有助于臨床上鑒別慢性活動性肝炎和慢性遷延性肝炎，而且血清甘膽酸含量升高程度與肝硬化的病理發展進程呈正相關，是臨床判斷肝硬化程度和預后很好的指標，若孕婦血清中甘膽酸水平顯著增高，則提示羊水污染、早產、胎兒宮內窘迫及剖宮產的風險率增大。目前，測定甘膽酸血清含量的方法主要有化學發光法和放射免疫分析法。不同的方法和不同種類的儀器，測得的甘膽酸含量也不盡相同。化學發光法是目前應用最廣泛的血清甘膽酸含量檢測方法。

我們對MAGLUMI2000分析儀的精密度、攜帶污染率、線性、準確性及對比實驗進行了測定。結果顯示，MAGLUMI2000分析儀的線性好，基本上覆蓋正常及普遍的病理范圍，線性測定范圍廣；批內和日間CV值<10%，在要求范圍內，有較好的重復性；攜帶污染率<5%，不同標本之間交叉污染小；MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術儀測定結果比較，結果有較好的相關性及可比性。

MAGLUMI2000分析儀就是采用了化學發光免疫競爭法檢測甘膽酸濃度，化學反應簡單，快速而無需催化劑，化學發光劑與待測抗原結合穩定，易于實現自動化，具有快捷，簡單，靈敏，特異等特點，且相對于放射免疫分析法而言，避免了放射性核素易衰變及放射性標記物不穩定，試劑有效期短，易對周邊環境和實驗室造成污染的缺陷。不僅如此，放射免疫法檢測甘膽酸采用的是125I標記物，有可能影響原物質的免疫活性，且較容易發生輻射損傷而使標記抗原變性，再者125I一般只能應用6-8周，對商品化的試劑來說，其產品的貨架期較短，對標本量相對較小的醫療單位而言，可造成試劑成本的浪費。最后，放射性廢物的儲存和銷毀，均會對環境造成一定的放射性污染。MAGLUMI2000分析儀檢測甘膽酸采用的是化學發光免疫競爭法，ABEI直接標記抗原，結合穩定，不影響標記物的理化特性，標記物穩定性好，具有檢測靈敏度高，線性范圍寬，反應時間短，易于實現自動化，簡便，特異性強等優點，為臨床檢測甘膽酸濃度提供更方便，有效的手段。MAGLUMI2000分析儀不僅應用于甘膽酸的檢測，也可應用于各種激素，腫瘤標志物，藥物及其他微量生物活性物質的測定。MAGLUMI2000分析儀總體設計新穎合理，具有良好的技術性能，檢測靈敏度較高，操作簡單，同時該機數據處理快，及時提示異常情況，方便檢驗人員復查，是一種值得推廣使用的較理想的新型甘膽酸分析儀。

參考文獻

[1]萬德惠，劉敦菊.血清甘膽酸水平在慢性肝病患者中的臨床分析[J].實用臨床醫學，2012，13（4）：5-6.

[2]CLI A’88 USA.Clinical Laboratory Improvement Amendment.1988.

[3]EP5-A2 Evaluation of precision performance of quantities measurement methods；approved guideline second edition[J].Wayne，PA：CLSI，2004.

[4]EP10-A2 National Committee for Clinical Laboratory Standards.Preliminary evaluation of quantitative clinical laboratory methods，approved guideline.2nd ed[J].Wayne，PA：EP10-A2.NCCLS，2002.

[5]EP6-A National Committee for Clinical Laboratory standards.Evaluation of the Linearity of quantitative measurement procedures：a statistical approach Approved Guideline[J].Wayne，PA：EP6-A，NCCLS，2003.