苗藥復(fù)方嘎老梭浸提劑抗菌作用實(shí)驗(yàn)研究

【摘要】目的：觀察苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌的抗菌作用，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：按照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》，以GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄的規(guī)定為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑分別對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸菌群、溶血性鏈球菌、真菌作用2min，平均抑菌率達(dá)100.00% 。結(jié)論：苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑分別對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌有抗菌作用。

【關(guān)鍵詞】苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑；金黃色葡萄球菌；大腸桿菌；白色念珠菌；抗菌作用。

【中圖分類號(hào)】R722.12 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）08-0177-01

苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑（商品名：苗格郎脂壓寶）是使用黔東南州苗族地區(qū)習(xí)慣食藥兩用的箬竹葉（Indocalamus tessellatus （Munro） Keng f.）為主經(jīng)浸提加工制成的復(fù)方苗藥，具有抗菌、天然防腐、促進(jìn)消化的作用。按照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》[1]和衛(wèi)生部《中藥新藥毒理學(xué)研究指南》[2]的技術(shù)要求，并參考其它相關(guān)方法[3][4]以GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄的規(guī)定為標(biāo)準(zhǔn)，觀察苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑的抗菌作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1抗金黃色葡萄球菌（ATCC6538）實(shí)驗(yàn)

1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖前凑諊?guó)家藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》，以GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄的規(guī)定為標(biāo)準(zhǔn)，觀察苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑的抗金黃色葡萄球菌（ATCC6538）作用。

1.2實(shí)驗(yàn)材料

1.2.1實(shí)驗(yàn)菌株：金黃色葡萄球菌（ATCC6538），中國(guó)科學(xué)院微生物研究所提供。試驗(yàn)使用第7代～第8代37℃培養(yǎng)18h～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物。

1.2.2受試藥物：

復(fù)方嘎老梭浸提制劑（商品名：苗格郎脂壓寶，貴州苗侗百草醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20140331）

1.2.3其它材料：

1.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS pH7.2）。

1.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。

1.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。

1.2.3.4營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

1.2.3.537℃恒溫培養(yǎng)箱。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1依據(jù)：GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄C4.1進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3.2條件：試驗(yàn)溫度20℃±1℃，試驗(yàn)重復(fù)三次。

1.3.3復(fù)方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液，作用時(shí)間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。

1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)三次重復(fù)試驗(yàn)區(qū)，結(jié)果表明：在20℃±1℃條件下，復(fù)方嘎老梭浸提劑原液對(duì)金黃色葡萄球菌作用2min，平均抑菌率達(dá)100.00%（100.00%）（見附表1）。

2抗大腸桿菌（8099）實(shí)驗(yàn)

2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖前凑諊?guó)家藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》，以GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄的規(guī)定為標(biāo)準(zhǔn)，觀察苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑的抗大腸桿菌（8099）的作用。

2.2實(shí)驗(yàn)材料

2.2.1實(shí)驗(yàn)菌株：大腸桿菌（8099），中國(guó)科學(xué)院微生物研究所提供。試驗(yàn)使用第8代～第9代37℃培養(yǎng)18h～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物。

2.2.2受試藥物：

復(fù)方嘎老梭浸提制劑（商品名：苗格郎脂壓寶，貴州苗侗百草醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20140331）

2.2.3其它材料：

2.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS pH7.2）。

2.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。

2.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。

2.2.3.4營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

2.2.3.537℃恒溫培養(yǎng)箱。

2.3實(shí)驗(yàn)方法

2.3.1依據(jù)：GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄C4.1進(jìn)行試驗(yàn)。

2.3.2條件：試驗(yàn)溫度20℃±1℃，試驗(yàn)重復(fù)三次。

2.3.3復(fù)方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液，作用時(shí)間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。

2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

經(jīng)三次重復(fù)試驗(yàn)區(qū)，結(jié)果表明：在20℃±1℃條件下，復(fù)方嘎老梭浸提制劑原液對(duì)大腸桿菌作用2min，平均抑菌率達(dá)100.00%（100.00%）（見附表2）。

3抗白色念珠菌（ATCC 10231）實(shí)驗(yàn)

3.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖前凑諊?guó)家藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》，以GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄的規(guī)定為標(biāo)準(zhǔn)，觀察苗藥復(fù)方嘎老梭浸提制劑的抗白色念珠菌（ATCC 10231）的作用。

3.2實(shí)驗(yàn)材料

3.2.1實(shí)驗(yàn)菌株：白色念珠菌（ATCC 10231），中國(guó)科學(xué)院微生物研究所提供。試驗(yàn)使用第4代～第5代37℃培養(yǎng)18h～24H沙保瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物。

3.2.2受試藥物：

復(fù)方嘎老梭浸提制劑（商品名：苗格郎脂壓寶，貴州苗侗百草醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20140331）

3.2.3其它材料：

3.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS pH7.2）。

3.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。

3.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。

3.2.3.4沙堡瓊脂培養(yǎng)基。

3.2.3.537℃恒溫培養(yǎng)箱。

3.3實(shí)驗(yàn)方法

3.3.1依據(jù)：GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》附錄C4.1進(jìn)行試驗(yàn)。

3.3.2條件：試驗(yàn)溫度20℃±1℃，試驗(yàn)重復(fù)三次。

3.3.3復(fù)方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液，作用時(shí)間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。

3.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

經(jīng)三次重復(fù)試驗(yàn)區(qū)，結(jié)果表明：在20℃±1℃條件下，復(fù)方嘎老梭浸提制劑原液對(duì)白色念珠菌作用2min，平均抑菌率達(dá)100.00%（100.00%）（見附表3）。

4討論與結(jié)論

箬竹葉（Indocalamus tessellatus （Munro） Keng f.）含量比較高的是烷烴化合物[5]，其次有笨甲醇、苯乙醇、紫羅蘭酮等。具有芳香味，其提取方法可采用醇提或水提。與紫花地丁、蛇床子提取物制成復(fù)方制劑，對(duì)皮膚及其婦科感染性疾病有療效。依據(jù)GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》，在20℃±1℃條件下，復(fù)方嘎老梭浸提制劑原液分別對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌作用2min，平均抑菌率分別達(dá)100.00%（100.00%），表明復(fù)方嘎老梭浸提制劑原液有抗菌作用。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局. 中藥新藥研究的技術(shù)要求. 1999

[2]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.中藥？天然藥物急性毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo).2005

[3]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1993：74.451

[4]徐淑云，卞如濂，陳修，等.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1982：849.857

[5]氣相色譜–質(zhì)譜法分析湖南產(chǎn)闊葉箬竹葉揮發(fā)油的化學(xué)成分，李水芳等，質(zhì)譜學(xué)報(bào)[J].，2007，第28卷，第2期。