分析修復(fù)材料對(duì)牙髓活性的影響

【摘要】目的 分析修復(fù)材料對(duì)牙髓活性的影響。方法 對(duì)比三種牙體修復(fù)材料Surefil、DyractAP、QuixfilU復(fù)合樹脂細(xì)胞培養(yǎng)基浸出液細(xì)胞相對(duì)增值率，采用四唑鹽MTT比色分析法對(duì)牙髓活性進(jìn)行分析，最后使用電競(jìng)掃描的方式觀察牙髓細(xì)胞在三種修復(fù)材料上的生長(zhǎng)情況。結(jié)果Surefil復(fù)合樹脂培養(yǎng)基牙髓細(xì)胞相對(duì)增值率明顯優(yōu)于DyractAP、QuixfilU組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），DyractAP培養(yǎng)基牙髓細(xì)胞相對(duì)增值率較QuixfilU組無(wú)明顯差異，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 三種修復(fù)材料均對(duì)牙髓活性無(wú)任何不良影響，但是Surefil復(fù)合樹脂培養(yǎng)基上牙髓細(xì)胞相對(duì)增值率低于其他兩組，因此在牙體修復(fù)時(shí)需根據(jù)實(shí)際情況選取合適的牙體修復(fù)材料。

【關(guān)鍵詞】Surefil復(fù)合樹脂；DyractAP；QuixfilU；修復(fù)材料；牙髓活性

【中圖分類號(hào)】R341 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）08-0212-02

近年來，隨著Surefil復(fù)合樹脂的不斷普及，其良好的美觀性與粘結(jié)性受到了廣大醫(yī)療工作者與患者的一致好評(píng)[1]。但是在牙體修復(fù)材料種類日益繁多的現(xiàn)今，不同修復(fù)材料對(duì)牙髓活性的影響受到了越來越多醫(yī)療工作者的關(guān)注。針對(duì)這一現(xiàn)狀，我院擬通過分析不同牙體修復(fù)材料對(duì)牙髓活性的影響，尋求最佳的牙體修復(fù)材料以用于臨床推廣。現(xiàn)根據(jù)我院研究結(jié)果進(jìn)行匯報(bào)：

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 ①日本電子公司生產(chǎn)JSE-5900LV掃描電鏡。②美國(guó)Bio-Rad公司生產(chǎn)Bio-Rad550酶標(biāo)儀。③美國(guó)Fam a Scientific公司生產(chǎn)CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱。

1.1.2 試劑 ①Surefil、DyractAP、QuixfilU三種復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料均由美國(guó)Dentsply公司提供。②四唑鹽（methyl thiazolyl tetrazolium ，簡(jiǎn)稱MTT）、二甲基亞砜均由美國(guó)Dimthyl Sulphoxide，DMSO，Sigma公司提供。③培養(yǎng)基：100ml/L小牛血清，胰蛋白酶均由美國(guó)Gibco公司提供。

1.2 方法

1.2.1 復(fù)合樹脂浸出液的制備方法 首先，將三種復(fù)合樹脂修復(fù)材料填充入圓柱狀孔模具中，然后用聚酯薄膜將其覆蓋并使用光固化燈固化處理后制為標(biāo)本，經(jīng)過紫外線消毒后加入DMEM培養(yǎng)基浸泡處理，3天后將其取出制備為復(fù)合樹脂浸出液，每種修復(fù)材料制備兩組。

1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) 選取新鮮恒牙，經(jīng)無(wú)菌處理后將牙冠劈開取出內(nèi)部牙髓組織，然后將根尖部分越三分之一切除，使用Hank’s溶液進(jìn)行多次沖洗之后，采用常規(guī)組織塊方式進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。平均三天更換一次培養(yǎng)液，待牙髓細(xì)胞生長(zhǎng)匯合后，使用胰蛋白酶消化后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1.2.3 四唑鹽比色檢驗(yàn) 將第三代牙髓細(xì)胞去除，置于顯微鏡下觀察其形態(tài)特征，然后使用免疫組織化法對(duì)波形絲蛋白、角蛋白進(jìn)行鑒定確定其來源。

1.2.4 掃描電鏡檢驗(yàn) 對(duì)材料標(biāo)本進(jìn)行掃描電鏡檢驗(yàn)，在CO2培養(yǎng)箱中培育三天后使用戊二醛溶液30ml/L進(jìn)行固定處理，臨界點(diǎn)干燥后進(jìn)行掃描電鏡觀察其粘附狀況。

1.3 評(píng)定指標(biāo) 細(xì)胞毒性級(jí)別 0級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增值率超過100，1級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增長(zhǎng)率在75-99范圍內(nèi)，2級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增長(zhǎng)率在50-74范圍內(nèi)，3級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增長(zhǎng)率在25-49范圍內(nèi)，4級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增長(zhǎng)率在1-24范圍內(nèi)，5級(jí)為細(xì)胞相對(duì)增長(zhǎng)率為0。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)上述治療進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行X2檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 四唑鹽檢驗(yàn) Surefil復(fù)合樹脂牙髓細(xì)胞相對(duì)增值率低于DyractAP、QuixfilU復(fù)合樹脂，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并且Surefil復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料細(xì)胞毒性略高于另外兩組，見表1。

3 結(jié) 論

通過研究可以直觀的發(fā)現(xiàn)，復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料均存在一定的細(xì)胞毒性，相對(duì)于正常細(xì)胞的增值，復(fù)合樹脂修復(fù)材料上牙髓細(xì)胞增值率均有不同程度下降，說明修復(fù)材料對(duì)牙髓活性存在一定的影響[2]。

本研究中采用的Surefil復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料基質(zhì)為Bis-GMA，由于其基質(zhì)含量較高，因此細(xì)胞毒性較高，而且材料中含有部分游離的鋇離子與鋁離子也在一定程度上加大了材料的毒性，影響了牙髓細(xì)胞活性[3]。Quixfil復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料多用于后牙填充，基質(zhì)主要成分有Bis-GMA、TMPTMA、TEGDMA與UDMA。DyractAP是一種新型的牙體修復(fù)材料，含有大量活性的氟化物與單體酸，充分融合了玻璃離子與復(fù)合樹脂的優(yōu)點(diǎn)，在牙體修復(fù)方面有著重要價(jià)值。不過DyractAP復(fù)合樹脂中氟化物在釋放的過程中會(huì)對(duì)牙髓細(xì)胞生長(zhǎng)代謝產(chǎn)生影響。本研究中，三種復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料細(xì)胞相對(duì)增值率與細(xì)胞毒性等級(jí)與楊國(guó)斌，吳紅崑，李灝來等人[4]研究結(jié)果基本相符。

綜上所述，三種復(fù)合樹脂牙體修復(fù)材料細(xì)胞毒性等級(jí)較低，細(xì)胞相對(duì)增值率較高，對(duì)牙髓活性影響極小，生物相容性良好，值得進(jìn)行臨床推廣與應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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[4]楊國(guó)斌，吳紅崑，李灝來，等. 4種牙體修復(fù)材料對(duì)人牙髓細(xì)胞毒性的實(shí)驗(yàn)研究[J].牙體牙髓牙周病學(xué)雜志，2005，15（11）：613-614.