《金匱》腎氣丸合二甲雙胍對(duì)實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血糖血脂影響的研究*

陳偉燕 汪麗佩 鄭衛(wèi)軍

（浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053）

《金匱》腎氣丸合二甲雙胍對(duì)實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血糖血脂影響的研究*

陳偉燕 汪麗佩△鄭衛(wèi)軍

（浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053）

目的觀察《金匱》腎氣丸對(duì)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血糖及血脂的影響。方法選用40只SD大鼠，隨機(jī)分為兩組，正常對(duì)照組8只和模型組32只。正常對(duì)照組大鼠予以普通基礎(chǔ)飼料，模型組大鼠予以高脂高糖飼料，30 d后小劑量鏈脲佐菌素50 mg/kg腹腔注射誘導(dǎo)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠，造模成功后13 d，模型組大鼠隨機(jī)分為糖尿病模型組、腎氣丸組、二甲雙胍組及腎氣丸合二甲雙胍組。各治療組大鼠開(kāi)始分別連續(xù)灌胃，正常對(duì)照組和糖尿病模型組等體積蒸餾水灌胃。30 d后禁食12 h，尾靜脈采血檢測(cè)血糖、血脂等生化指標(biāo)。結(jié)果與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型組空腹血糖、BUN、CHOl、TG和LDL-C水平均明顯增高（P＜0.001），HDL-C水平則降低（P＜0.001）；腎氣丸組、二甲雙胍組及腎氣丸合二甲雙胍組均能降低模型大鼠空腹血糖、BUN、CHOL、TG和LDL-C水平（P＜0.05或P＜0.01）；二甲雙胍組則既可降低TG和LDL-C，又可提高血清HDL-C含量（P＜0.05）。結(jié)論《金匱》腎氣丸合二甲雙胍可顯著改善2型糖尿病胰島素抵抗大鼠的血糖及血脂水平。

2型糖尿病 金匱腎氣丸 二甲雙胍

糖尿病失治，可并發(fā)嚴(yán)重的心腦血管疾病，根據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟統(tǒng)計(jì)，目前全球有糖尿病患者2.33億，而我國(guó)估計(jì)現(xiàn)有糖尿病患者超過(guò)4千萬(wàn)，糖尿病已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性公共衛(wèi)生問(wèn)題［1］。目前療效比較肯定的口服西藥有二甲雙胍或者肌肉注射胰島素，但均可造成肝腎功能的影響及低血糖等副作用［2］。相對(duì)于西醫(yī)西藥治療糖尿病，《金匱》腎氣丸降糖效果雖不如西藥明顯，但其對(duì)于改變糖尿病及并發(fā)癥狀具有獨(dú)特療效［3］。糖尿病治療總的趨勢(shì)是中西醫(yī)聯(lián)合干預(yù)，依據(jù)中西醫(yī)各自的優(yōu)勢(shì)，本項(xiàng)目通過(guò)比較評(píng)價(jià)中西醫(yī)聯(lián)合干預(yù)（《金匱》腎氣丸二甲雙胍）、單用西藥治療（二甲雙胍）和單用中藥治療（腎氣丸）3種不同治療方法的療效，探索臨床中西醫(yī)結(jié)合臨床治療糖尿病實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 材料 《金匱》腎氣丸由北京同仁堂生產(chǎn)制備，二甲雙胍緩釋片由成都恒瑞制藥有限公司生產(chǎn)，鏈脲佐菌素購(gòu)自Sigma公司；健康雄性SD大鼠40只由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；實(shí)驗(yàn)所需儀器設(shè)備均由浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)研究所提供。

1.2 模型制備 健康雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組8只和造模組32只。正常對(duì)照組大鼠予以普通基礎(chǔ)飼料，自由攝食、飲水；造模組予以高脂高糖飼料（高脂配方：基礎(chǔ)飼料65％、蔗糖5％、蛋黃粉10％、豬油10％、全脂奶粉10％），自由攝食、飲水；到30 d時(shí)大鼠禁食12 h，造模組以鏈脲佐菌素按50 mg/kg體質(zhì)量一次性左下腹腔內(nèi)注射，正常對(duì)照組注射等量的檸檬酸鹽緩沖液。造模后7 d，取大鼠尾靜脈血微量，以強(qiáng)生公司One-Touch Ultra血糖儀檢測(cè)血糖，尿糖試紙檢測(cè)定性尿糖。血糖＞16.7 mmol/L且尿糖（+++）以上者確定為糖尿病大鼠模型，造模成功后將模型大鼠隨機(jī)分成糖尿病模型組、二甲雙胍組、腎氣丸組、腎氣丸合二甲雙胍組。

1.3 藥物制備及給藥 將《金匱》腎氣丸和二甲雙胍緩釋片分別配置成混懸液，在造模成功后13 d，腎氣丸組每天灌胃1.25 g/kg體質(zhì)量腎氣丸混懸液；二甲雙胍組每日灌胃2.0 g/kg體質(zhì)量二甲雙胍緩釋片混懸液；腎氣丸合二甲雙胍組每日灌胃1.25 g/kg體質(zhì)量腎氣丸和2.0 g/kg體質(zhì)量二甲雙胍；正常對(duì)照組和糖尿病模型組用等體積蒸餾水灌胃，治療各組大鼠分別連續(xù)灌胃30 d。

1.4 生化指標(biāo)檢測(cè) 各組大鼠灌胃完成后禁食12 h，尾靜脈采血檢測(cè)空腹血糖、血尿素氮（BUN）、總膽固醇（CHOL）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）和高密度脂蛋白（HDL-C）等指標(biāo)，

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)方法進(jìn)行各組的多重比較。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血糖的比較見(jiàn)表1。治療30 d后，與糖尿病模型組比較，正常組血糖值明顯低于糖尿病模型組和各治療組（P＜0.01），表明造模成功。各治療組均可以降低血糖（P＜0.01）。與腎氣丸合二甲雙胍組相比，腎氣丸組無(wú)明顯差別（P＞0.05），二甲雙胍組血糖高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜ 0.01）。與二甲雙胍組相比，腎氣丸組、腎氣丸合二甲雙胍組降低血糖均優(yōu)于二甲雙胍組（P＜0.01）。以上結(jié)果示，《金匱》腎氣丸及二甲雙胍均有顯著降血糖效果，且《金匱》腎氣丸的效果與《金匱》腎氣丸合二甲雙胍聯(lián)用的效果等同，均優(yōu)于二甲雙胍單用的效果。

表1 各組大鼠血糖、BUN的比較（mmol/L，±s）

表1 各組大鼠血糖、BUN的比較（mmol/L，±s）

與糖尿病模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與腎氣丸合二甲雙胍組為比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

組 別 n 血糖值 BUN糖尿病模型組 8 30.56±2.60△△ 26.36±6.79△△正常組 8 4.88±0.03**△△ 6.41±0.27**△△二甲雙胍組 8 26.71±2.43**△△ 26.00±1.56△△腎氣丸組 8 15.83±1.29** 16.51±2.19**腎氣丸合二甲雙胍組 8 16.9±1.85** 17.36±1.57**

2.2 各組2型糖尿病胰島素抵抗大鼠BUN的比較見(jiàn)表1。治療30 d禁食12 h后，與糖尿病模型組比較，正常組血BUN值明顯低于糖尿病模型組和各治療組（P＜0.01）。各治療組除二甲雙胍組外均可以降低血BUN（P＜0.01）。與腎氣丸合二甲雙胍組相比，腎氣丸組無(wú)明顯差別（P＞0.05），二甲雙胍組血BUN高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜0.01）。與二甲雙胍組相比，腎氣丸組、腎氣丸合二甲雙胍組降低血BUN均優(yōu)于二甲雙胍組（P＜0.01）。以上結(jié)果示，《金匱》腎氣丸與《金匱》腎氣丸合二甲雙胍聯(lián)用對(duì)于降低2型糖尿病大鼠BUN的效果相同，且不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而單獨(dú)使用二甲雙胍則無(wú)此效果。

2.3 各組對(duì)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血脂的比較見(jiàn)表2。正常組血CHOL值明顯低于糖尿病模型組（P＜0.01），各治療組除二甲雙胍組外均可以降低CHOL（P＜0.01），二甲雙胍組與模型組則無(wú)明顯差別。與糖尿病模型組相比，正常組和各治療組TG、LDL-C值均明顯低于糖尿病模型組（P＜0.001）。與糖尿病模型組相比，正常組HDL-C低于糖尿病模型組，治療組只有二甲雙胍組HDL-C值高于糖尿病模型組（P＜0.01）。

與腎氣丸合二甲雙胍組比較，二甲雙胍組和糖尿病模型組CHOL均高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜0.01），正常組、腎氣丸組與二甲雙胍組則無(wú)明顯差別（P＞0.05）。與腎氣丸合二甲雙胍組比較，二甲雙胍組和糖尿病模型組TG高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜0.01或P＜0.05）；正常組TG低于腎氣丸合二甲雙胍組（P＞0.05）；腎氣丸組則無(wú)明顯差別（P＞0.05）。與腎氣丸合二甲雙胍組比較，二甲雙胍組和糖尿病模型組LDL-C值高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜0.01或P＜0.05）；正常組LDL-C值低于腎氣丸合二甲雙胍組（P＞0.05）；腎氣丸組則無(wú)明顯差別（P＞0.05）。與腎氣丸合二甲雙胍組比較，二甲雙胍組血HDL-C值高于腎氣丸合二甲雙胍組（P＜0.01）；正常組血HDL-C值與腎氣丸組、腎氣丸合二甲雙胍組無(wú)明顯差別（P＞0.05）。結(jié)果示腎氣丸與腎氣丸合二甲雙胍聯(lián)用組均可明顯降低2型糖尿病大鼠CHOL、TG和LDL-C等血脂相關(guān)有害因子，而二甲雙胍組則既可降低TG和LDL-C，又可提高HDL-C指標(biāo)水平。

表2 各組大鼠血脂比較（mmol/L，±s）

表2 各組大鼠血脂比較（mmol/L，±s）

組 別 n糖尿病模型組 8正常組 8二甲雙胍組 8腎氣丸組 8腎氣丸合二甲雙胍組 8 CHOL HDL-C 2.86±0.66△△ 1.24±0.09 1.48±0.27** 0.60±0.05*2.57±0.41△△ 3.02±0.73**△△TG LDL-C 4.46±1.18△△ 0.93±0.06△△0.39±0.10**△△0.21±0.03**△△2.64±0.28**△ 0.69±0.13**△△1.40±0.30**1.71±0.30** 0.41±0.08**1.41±0.19** 1.64±0.25** 0.44±0.14** 0.82±0.36 0.89±0.14

3 討論

糖尿病屬于中醫(yī)學(xué)“消渴病”范疇，其基本病理變化為：初期陰虛為本，燥熱為標(biāo)，中期是氣陰兩虛為本，濕痰淤血為標(biāo)，后期陰陽(yáng)兩虛是發(fā)展趨勢(shì)，氣血陰陽(yáng)失衡，變證百出，益氣養(yǎng)陰則是本病的最基本治法［4］。西醫(yī)認(rèn)為糖尿病是不同病因與發(fā)病機(jī)制引起體內(nèi)胰島素絕對(duì)或相對(duì)不足，以致糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝障礙，而以慢性高血糖為主要臨床表現(xiàn)的全身性疾病。糖尿病可由不同途徑損害腎臟，腎功能檢查對(duì)了解有無(wú)腎臟疾病、疾病的程度、選擇治療、預(yù)后及對(duì)腎臟的研究均有重要意義，常規(guī)用于評(píng)價(jià)腎功能的實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)為BUN［5］。研究證實(shí)，血糖控制不佳與脂類代謝紊亂密切相關(guān)，由于機(jī)體代謝出現(xiàn)障礙，細(xì)胞不能充分利用葡萄糖，造成體內(nèi)脂類代謝紊亂，而脂代謝紊亂會(huì)帶來(lái)動(dòng)脈粥樣硬化等相關(guān)并發(fā)癥。臨床發(fā)現(xiàn)糖尿病患者血漿CHOL、TG和LDL-C等血脂水平均顯著高于正常人，而HDL-C是一個(gè)具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的脂蛋白，它能促進(jìn)膽固醇的排泄，加速極低密度脂蛋白的代謝，防止動(dòng)脈壁脂質(zhì)的沉積。因此，HDL-C是防止動(dòng)脈粥樣硬化和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟病的保護(hù)因子［7］。

目前，西醫(yī)治療糖尿病療效比較肯定的口服藥物有雙胍類如二甲雙胍，其既可抑制肝葡萄糖輸出，又可改善外周組織對(duì)胰島素的敏感性，增加對(duì)葡萄糖的攝取和利用。但雙胍類的副作用亦不可忽視［2］，對(duì)肝腎功能的影響、低血糖等，并且有些患者血糖控制較好，但癥狀改善不理想或并發(fā)癥仍可出現(xiàn)。相對(duì)于西醫(yī)西藥治療糖尿病，《金匱》腎氣丸能溫腎陽(yáng)，亦能滋腎陰，取陰中求陽(yáng)之法。其配伍原則、意義，明·張景岳有精辟的論述，“善補(bǔ)陽(yáng)者，必于陰中求陽(yáng)，則陽(yáng)得陰助而生化無(wú)窮，善補(bǔ)陰者，必于陽(yáng)中求陰，則陰得陽(yáng)助而泉源不竭”。縱觀全方，以小劑溫陽(yáng)藥置于十倍之滋陰劑之中，恰似坎卦一陽(yáng)爻藏于兩陰爻之中，取象于火涵水中，藏而不露。其以山藥厚其土以藏之，山茱萸肉斂其氣以秘之，澤瀉、牡丹皮、茯苓引亢火以歸之。如此則腎復(fù)其封蟄之職，水中之火，不亢不衰，緩緩蒸騰，溫養(yǎng)五臟六腑，四肢百骸，成水火既濟(jì)之象。臨床上運(yùn)用該方治療糖尿病，能較好地改善患者的臨床癥狀［7］。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)《金匱》腎氣丸除可明顯逆轉(zhuǎn)高血糖癥狀外，還可改善腎功能，防止腎損傷的發(fā)生。《金匱》腎氣丸既可下調(diào)糖尿病鼠血漿CHOL、TG和LDL-C等與動(dòng)脈粥樣硬化正相關(guān)的血脂水平，亦可上調(diào)抗動(dòng)脈粥樣硬化脂蛋白HDL-C的表達(dá)水平。糖尿病治療總的趨勢(shì)是中西醫(yī)聯(lián)合干預(yù)，依據(jù)中西醫(yī)各自的優(yōu)勢(shì)，本項(xiàng)目通過(guò)觀察比較中西醫(yī)聯(lián)合干預(yù)（腎氣丸合二甲雙胍組）、單用西藥治療（二甲雙胍組）和單用中藥治療（腎氣丸組）3種不同治療方法的療效，證實(shí)了《金匱》腎氣丸及《金匱》腎氣丸合二甲雙胍對(duì)于2型糖尿病胰島素抵抗大鼠血糖、BUN及血脂相關(guān)有害因子均有較好療效，且效果均優(yōu)于二甲雙胍組，為臨床中西醫(yī)結(jié)合治療糖尿病奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

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Study on the Effect of Combined Use of Jinkuishenqi Pill and Metformin on Blood Glucose and Lipid of Insulin Resistance of TypeⅡDiabetes Mellitus Rats

CHEN Weiyan，WANG Lipei，ZHENG Weijun.Zhejiang University of TCM，Zhejiang，Hangzhou 310053，China

Objective：To discuss the effect of combined use of Jinkuishenqi pill and metformin on blood glucose and lipid of insulin resistance of typeⅡdiabetes mellitus rats.Methods：40 SD rats were randomly divided into two groups：8 in normal control group and 32 in model group.The rats of normal control group were fed with ordinary diet，while the rats of model group were fed with high fat and sugar diet.After 30 days，the model group rats were treated with 50mg/kg streptozotocin by intraperitoneal injection to induce typeⅡ diabetic rats with insulin resistance.After 13 days，the model rats were randomly divided into four groups including diabetic model group，shenqi pill group，metformin group，and shenqi pill combined with metformin group.Each group was fasted 12 hours after 30 days'gavage and their blood glucose and lipids were detected.Results：Compared with normal control group，fasting glucose，BUN，CHOl，TG and LDL-C of model group rats significantly increased（P＜0.01）while the HDL-C reduced（P＜0.01）.Rats in shenqi pill group，metformin group，and shenqi pill combined with metformin group had lower fasting blood glucose，BUN，CHOl，TG and LDL-C levels（P＜0.05），but higher serum HDL-C levels（P＜0.05）.Shenqi pill combined with metformin group had the most obvious change of above indicators.Conclusion：The effect of combined use of Jinkuishenqi pill and metformin can significantly improve blood glucose and lipid of insulin resistance of typeⅡdiabetes mellitus rats.

TypeⅡdiabetes；Jinkuishenqi pill；Metformin

R259.872

A

1004-745X（2014）08-1422-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.08.011

2014-04-27）

浙江省科技廳項(xiàng)目（2011C33003）；浙江中醫(yī)藥大學(xué)校級(jí)科研基金項(xiàng)目（2013ZZ01）

△通信作者