改良生活飲用水菌落總數測定方法

【摘 要】 目的：改進生活飲用水中菌落總數測定方法；方法：在營養瓊脂中加入一定量的TTC按GB/T5750-2006生活飲用水標準檢驗方法微生物指標菌落總數平皿計數法進行檢測；結果：同一樣品利用該法與國標法檢測生活飲用水中菌落總數經統計學檢驗無顯著性差異；結論：TTC瓊脂平板計數結果準確，對有雜質水樣具有較高的靈敏性，受干擾少值得推廣。

【關鍵詞】 TTC瓊脂平板 菌落總數

【Abstract】 Objective： To improve determination of total bacterial count in drinking water； methods： adding a certain amount of the nutrient agar TTC by GB/T5750-2006 drinking water standard test methods Microbiological Total plate count of colonies were detected； result： same sample using this method with the national drinking water standard method to detect the total number of colonies no statistically significant difference test； Conclusion： TTC agar plate count results are accurate， there are impurities in water samples to have a high sensitivity， interference less worthy of promotion.

【keywords】 TTC agar plates ； Total number of colonies

【中圖分類號】 R155.5 【文獻標識碼】 A 【文章編號】 1671-8801（2014）09-0317-01

生活飲用水的衛生和安全關系到每個人的身體健康，一直備受各國政府和公眾的高度重視，水中菌落總數超標對人體健康危害極大。目前國標方法在菌落總數計數過程中部分菌落細小或生長于瓊脂內部的菌落，由于顏色與營養瓊脂較相近，須借助放大鏡計數，這給大量計數工作帶來不便，同時有雜質水樣中的沉渣給菌落鑒別造成一定的困難。本方法加入TTC能夠被細菌還原成紅色物質，因此添加到培養基中，可以使菌落成紅色，便于觀測和計數，很好地解決上述問題，現將實驗結果報告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器：同GB/T5750.12-2006中1.1.4

1.1.2 試劑：

1.1.2.1 營養瓊脂

1.1.2.2 0.003%TTC瓊脂：在100mL營養瓊脂中加入0.3%的TTC溶液1mL，121℃15分鐘高壓滅菌。

1.2 方法

平板計數法按國標GB/T5750.12-2006檢驗，TTC法直接使用0.003%TTC瓊脂按國標GB/T5750.12-2006檢驗。

2 結果與討論

2.1 加入TTC后對結果的影響

TTC（氯化三苯基四氮唑）溶于水中成為無色溶液，但經過細菌胞氫酶還原后即生成紅色的三苯基甲腙，該物質比較穩定，不會被空氣中的氧自動氧化，但TTC在一定濃度下對細菌也有抑制作用，經實驗證明TTC濃度在0.001%-0.01%濃度中基本無抑制現象，本實驗采用0.003%TTC營養瓊脂。

2.2 樣品檢測結果比較

用平板計數國標法與TTC瓊脂平板法同時對10份樣品按試驗方法進行菌落總數檢測，檢測結果見表1

從表1可以看出，用TTC法結果和國標法對水中菌落總數的檢測結果基本一致，該兩種方法的檢測結果經統計學處理t=0.109，t0.05（18）=2.101，t0.05（18）>t兩種方法無顯著性差異.

2.3 對細小可疑菌落的鑒定

在10份樣品同時用兩種方法計數的培養皿中，挑取細小可疑的菌落，點種在血平板上，觀察其生長數.結果在營養瓊脂平板上挑取200個，TTC瓊脂平板中挑取100個無色可疑菌落，其生長數分別為143和8個，分別占71%和8%，在前者培養基中有67個不生長占29%，可見營養瓊脂平板法至少有近30%的誤判率，兩者相差明顯.

3 結論

本文通過TTC營養瓊脂改良法與國標法對生活飲用水中菌落總數的測定比較，證實TTC改良法使得經培養的菌落呈紅色，便于識別雜質，從而提高了檢測結果的準確性和可靠性，特別是檢測臨近標準界限值的樣品，該法由于錯判率低對樣品的檢測更有意義。

參考文獻

[1]GB/T5750-2006 生活飲用水標準檢驗方法

[2]化妝品衛生規范 中華人民共和國衛生部2007年1月262-264頁。

作者簡介：張振春，男，1969年12月，遼寧沈陽人，畢業于遼寧醫學院，工作單位。沈陽市康平縣疾病預防控制中心