環吡酮胺陰道栓對陰道粘膜刺激性和過敏性試驗研究

王小蒙　艾濤　符世托　鄺少軼

【摘要】 目的 為了考察環吡酮胺陰道栓陰道粘膜用藥的安全性。方法 以家兔和豚鼠為觀察對象，進行環吡酮胺陰道栓對家兔陰道粘膜刺激性試驗和環吡酮胺陰道栓對豚鼠陰道粘膜過敏性試驗。結果 家兔完整陰道粘膜組和破損陰道粘膜組在連續7天接觸受試藥后，陰道粘膜均未見到異常分泌物，無充血、水腫和壞死等癥狀，病理檢查，無炎癥性細胞浸潤和組織細胞壞死現象，表明環吡酮胺陰道栓對家兔完整陰道粘膜組和破損陰道粘膜組均無刺激性；豚鼠陰道粘膜接觸環吡酮胺陰道栓致敏后14天激發，豚鼠陰道粘膜干凈，未見異常分泌物，無充血、水腫。結論 表明環吡酮胺陰道栓對豚鼠陰道粘膜無明顯致敏。

【關鍵詞】 環吡酮胺；刺激性；過敏性；陰道栓

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2014.05.046 文章編號：1004-7484（2014）-05-2448-02

【Abstract】Objective To investigate drug safety of ciclopirox olamine pessary for vagina mucosa.Method An irritation test with ciclopirox olamine pessary to vaginal mucosa of rabbit and hypersusceptibility test with ciclopirox olamine pessary to vagina mucosa of guinea pigs are performed.Result After continuously administration of ciclopirox olamine pessary for 7 days，the integrate vagina mucosa group and damaged vagina mucosa group of rabbits show no symptom of abnormal discharge，hyperaemia，edema，necrosis，etc，and inflammatory cell accumulation and histiocytic necrotizing are not found in pathological examination，indicating that ciclopirox olamine pessary has no irritation to vagina mucosa of rabbit in the both groups.After continuously allergia of ciclopirox olamine pessary for 14 days，vagina mucosa of guinea pig is clean showing no abnormal discharge and hyperaemia，which indicates that vagina mucosa of guinea pig.Conclusion It shows no hypersusceptibility to ciclopirox olamine pessary.

【Key words】 Ciclopirox；Lrritation；Anaphylaxis；Pessary

藥物的活性成份及其代謝產物、輔料等物質及其理化性質（包括PH值和滲透壓等）均有可能對給藥部位組織造成刺激性和過敏性傷害，因此，藥物在臨床使用前必須研究其制劑的安全性，包括溶血性試驗、刺激性試驗和過敏性試驗，以明確藥物使用中可能產生的毒性反應，為臨床用藥提前防范或治療、搶救措施提供參考依據。陰道栓劑主要用于局部治療陰道和宮頸疾病，臨床使用中，最常見的不應反應就是藥物對陰道粘膜產生局部刺激性，導致非感染性陰道炎，有致敏性的藥物還可引起陰道局部過敏反應，引起陰道粘膜水腫、粘膜組織壞死，嚴重的可導致全身過敏反應。

環吡酮胺是一種廣譜外用抗真菌藥物，通過耗竭真菌細胞內的營養物質，干擾菌體RNA的合成來達到抑殺作用，具有穿透力強，毒性低，對皮膚癬菌、霉菌等皮膚致病菌抑殺作用較強等優點，在較高濃度下對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌及支原體等也有一定的抑制作用，其陰道栓制劑常用于婦科陰道炎治療。本實驗進行其陰道栓制劑陰道粘膜刺激性試驗和陰道粘膜過敏性試驗，以評價其臨床用藥安全性。

1 材料與方法

1.1 實驗藥品 環吡酮胺陰道栓（實驗用小栓），0.2g/粒（低劑量：含5.6%環吡酮胺；高劑量：含11.2%環吡酮胺），由海南海力制藥有限公司生產。空白栓（附型劑）0.2g/粒，由海南海力制藥有限公司提供。2，4-二硝基氯苯，由Gracia Chemical Technology Co.，Ltd.Chengdu生產。丙酮，500ml（AR）。

1.2 實驗動物 新西蘭家兔，雌性，16只，1.65-1.9kg，購自長沙市天勤生物技術有限公司；豚鼠，雌性，40只，255-310g，購自長沙市天勤生物技術有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 陰道粘膜刺激性試驗[1-3] 實驗分4組：陰道粘膜完整試驗組、陰道粘膜完整對照組、陰道粘膜磨損試驗組和陰道粘膜磨損對照組，每組4只家兔。采用前端鈍圓、直徑為6mm的圓形玻棒插入家兔陰道內約2-3cm，每只連續反復5次來回摩擦，造成陰道粘膜損傷。采用陰道給藥，無菌操作，用直徑約3mm的圓滑玻棒將藥粒直接送入家兔陰道內約2.0cm處，每次確保藥物與陰道粘膜接觸4h，若藥物流出過多，要及時補給，對照組給予空白栓，試驗組給予環吡酮胺陰道栓，每天1次，連續7天。末次給藥后72h處死全部動物，解剖打開陰道，觀察外陰及陰道有無異常分泌物，用生理鹽水沖洗干凈，肉眼觀察給藥處陰道粘膜有無紅斑、水腫等刺激反應癥狀，參考陰道刺激反應癥狀和評分標準表，見表1。給予評分并求每組刺激反應均值（每組刺激反應均值=組中所有動物的紅斑、水腫和分泌物評分之和÷動物數），根據陰道刺激性評價標準，見表2。進行評價。摘取出陰道，用10%福爾馬林固定后送病理檢查。

1.3.2 陰道粘膜過敏性試驗 健康雌性豚鼠40只，按體重由大到小隨機分組，其中試驗組20只（給予環吡酮胺陰道栓），陰性對照組10只（給予空白栓），陽性對照組10只（給予2，4-二硝基氯苯）。致敏和激發給藥均采用陰道給藥途徑，栓劑經無菌處理成約0.1g/粒大小，用玻棒直接推入豚鼠陰道內距陰道口約1.5cm處，陽性對照藥用帶灌胃針頭的注射器將藥物注入陰道內。致敏給藥隔周1次，連續3次，末次致敏后14天激發。實驗組給高劑量環吡酮胺陰道栓致敏，低劑量環吡酮胺陰道栓激發；陽性對照組給1%2，4-二硝基氯苯-丙酮溶液致敏，給0.1%2，4-二硝基氯苯-丙酮溶液激發；陰性對照組致敏和激發都給空白栓。激發后48h處死各組動物，解剖縱面切開陰道，生理鹽水沖洗陰道粘膜，觀察粘膜有無充血、水腫等局部過敏反應癥狀，根據表1的紅斑和水腫評分標準計算每組動物平均過敏反應分值（平均過敏反應分值=組中所有動物紅斑和水腫分值之和÷動物數）和致敏率（致敏率=過敏動物數÷全部動物數×100%），根據致敏率評價致敏程度，見表3。

2 實驗結果

2.1 陰道粘膜刺激性試驗

2.1.1 肉眼觀察結果 末次給藥后72h處死動物，肉眼觀察家兔陰道粘膜，陰道粘膜磨損試驗組和陰道粘膜完整試驗組無異常分泌物，生理鹽水沖洗后觀察陰道粘膜，試驗組均無紅斑、水腫，評分均為0。對照組中，陰道粘膜完整家兔均正常，無紅斑、水腫和異常分泌物，但陰道粘膜磨損組有2只可看到紅斑，分別評分為2分和1分，平均分值為0.75，根據評價標準，均值小于1仍屬于無刺激，見表4。

2.1.2 病理檢查結果 鏡下觀察陰道粘膜組織，陰道粘膜完整的對照組和試驗組均可見鱗狀上皮細胞完整，無血管擴張，無細胞壞死，無炎細胞浸潤。而陰道粘膜磨損的對照組和試驗組均有2只出現上皮細胞脫落，對照組有少量炎細胞浸潤，但均無血管擴張和細胞壞死，認為是機械性摩擦所致。

2.2 陰道粘膜過敏性試驗 各組動物激發后48h處死，解剖切開陰道，肉眼觀察：陽性對照組陰道粘膜有大量膿性分泌物，生理鹽水沖洗后，可見粘膜明顯重度水腫增厚（大于1mm），重度充血（呈紫紅色），致敏率達100%，呈極強致敏性。陰性對照組和試驗組陰道干凈，無充血、無水腫，過敏反應均值和致敏率均為0，見表5。

3 討論

當組織細胞受到病理性刺激，會產生血管擴張、血管通透性增加，血漿滲出造成水腫，且在高倍鏡下可看到局部大量炎癥細胞浸，嚴重的可造成細胞壞死。試驗組各動物的陰道粘膜連續7天接觸環吡酮胺，肉眼觀察陰道粘膜，沒有發生紅斑和水腫，平均分值為0，病理檢查，除了磨損組有個別動物出現鱗狀上皮細胞脫落外，試驗組其余動物均未見異常的病理改變，表明環吡酮胺陰道栓對完整陰道和磨損陰道粘膜均沒有明顯的直接刺激作用。藥物若對機體致敏產生抗體，再次接觸該藥物，可立即產生過敏反應。2，4-二硝基氯苯具有的很強致敏性，常在皮膚變態反應試驗中作為陽性對照藥建立過敏反應模型[4]，本實驗陽性對照組激發后產生明顯的充血和水腫等過敏反應癥狀。實驗組激發后沒有出現粘膜充血、水腫過敏反應癥狀，表明環吡酮胺對陰道粘膜局部沒有明顯致敏作用。

參考文獻

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