可凝固蛋白法測定血漿纖維蛋白原

李 瓊 周 洪 肖時超

（重慶市渝北區人民醫院檢驗科，重慶 401120）

可凝固蛋白法測定血漿纖維蛋白原

李 瓊 周 洪 肖時超

（重慶市渝北區人民醫院檢驗科，重慶 401120）

目的 探討凝血酶原時間-衍生法（PT-der）與凝血酶法（Clauss）這兩種可凝固蛋白法同時測定血漿纖維蛋白原（Fib）含量是否存在差異。方法 用凝血酶原時間-衍生法和凝血酶法這兩種方法同時測定質控品血漿20次和60例患者血漿樣本，計算平均值（χ—）、標準差（SD）、變異系數（CV %）、t值、P值。結果 這兩種方法檢測纖維蛋白原含量在正常參考范圍內與正常參考范圍外都存在顯著差異（P＜0.05）。結論 凝血酶原時間-衍生法測得的纖維蛋白原含量不可靠，測定纖維蛋白原含量應用國際推薦的凝血酶法實測。

衍生法；凝血酶法；纖維蛋白原

纖維蛋白原不是某種疾病的特異指標，而是臨床某些疾病的篩查指標。它與肝臟疾病、腎病綜合征、粥樣硬化、心腦血管疾病、血液流變學、以及其他因素有關（如高脂血癥、原發性高血壓、肥胖癥、口服避孕藥、妊娠期及腫瘤等），因此臨床醫師很看重纖維蛋白這個篩查指標，為滿足臨床與患者的需要，找一種簡便、快速、經濟的方法準確測定血漿纖維蛋白原含量很重要。

隨著醫院患者量的增加，全自動血凝儀步入血凝常規檢查指標，而全自動血凝儀有兩種可凝固蛋白法測定纖維蛋白原含量，一種是凝血酶原時間-衍生法檢測纖維蛋白原含量，其特點是不加任何有關纖維蛋白原測定的試劑，僅加凝血酶原時間測定試劑，儀器通過測定凝血酶原時間時，纖維蛋白原形成纖維蛋白（凝固），再根據纖維蛋白濁度換算出纖維蛋白量的含量，此法精確度高、省錢、省時，但結果是否可靠，多數認為正常參考范圍內結果較為接近，可以用于臨床，而不在正常范圍內結果相差較大[1]，必須用凝血酶法實測。該文就此觀點用凝血酶原時間-衍生法與國際推薦的國外最常用的凝血酶法[2]進行比較，結果發現正常參考范圍內檢測結果與正常參考范圍外檢測結果都存在顯著差異。現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

醫院門診及病房各科患者60例。所有患者樣本均采用血凝專用真空抗凝管（0.109 mol/L，枸櫞酸鈉0.3 mL）采靜脈血至2 mL刻度，離心3000轉10 min待用。用凝血酶原時間-衍生法與凝血酶法同時測定質控品血漿與60例患者血漿標本，2 h內檢測完。

1.2 儀器與試劑

血凝儀：日本SysmexCA-1500型。配套血凝試劑與質控品血漿均為SIEMENS，凝血酶原時間測定試劑盒批號：545515；Fib試劑盒批號：538059；Fib稀釋液試劑盒批號：547024；質控品血漿批號：528138A。

1.3 統計學處理

2 結 果

2.1 儀器精密度試驗

用凝血酶原時間-衍生法和凝血酶法同時測定纖維蛋白原質控品血漿20次。凝血酶原時間-衍生法：D=（1.24±0.06）g/L、CV % =5.24 %；凝血酶法：D =（2.43±0.07）g/L、CV %=2.88 %。纖維蛋白原質控品要求凝血酶法測定時變異系數范圍為：2 %～5 %，而CA-1500儀器中凝血酶法測定纖維蛋白原時的變異系數為2.88 %，符合質控品要求；凝血酶原時間-衍生法和凝血酶法檢測纖維蛋白原變異系數為5.24 %、2.88 %，均遠小于國家衛生部規定值（CV %：20 %）[3]，符合國家衛生部要求，說明儀器與試劑精密度好。

2.2 患者血漿比對試驗

分別用凝血酶原時間-衍生法和凝血酶法同時測定門診與病房60例患者血漿纖維蛋白原值，見表1。

從表1中可見：無論高值（＞4.0 g/L）、低值（＜2.0 g/L）或正常參考值（2.0～4.0 g/L），凝血酶原時間-衍生法和凝血酶法檢測結果差異顯著（P＜0.05），尤其是B組（正常參考值）差異更顯著，C組（低值）次之。

3 討 論

纖維蛋白原是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質，能夠溶解于水。血小板破裂時，釋放出凝血活酶，在鈣離子的參與下催化凝血酶原變成凝血酶，凝血酶切除纖維蛋白原中的肽A和B，生成不溶于水的單體纖維蛋白，纖維蛋白與血細胞扭結成團，凝固成為血塊。簡單地說，就是一種與凝血有關的蛋白質，即凝血因子。

檢測纖維蛋白原含量，檢測方法很多，各家評價不一[4]。目前常用的檢測方法可分為三類：功能性測定方法（如jocobsson、Von Clauss、PT衍生法）；物理化學法（如鹽析法、熱變法、電泳法），其重復性、特異性較差，已逐漸被臨床淘汰；免疫測定法（如免疫比濁法），其特異性不高準確性極差，也逐漸被臨床淘汰。該文討論的是纖維蛋白原功能性測定方法。

Von Clauss（凝血酶法）是美國國家臨床檢驗標準委員會推薦的常規方法，其原理就是將足量的凝血酶加入待測血漿，血漿中可溶性纖維蛋白原變成不溶性纖維蛋白（凝固）的時間與纖維蛋白原的含量呈負相關，它主要測定血漿中具有凝血功能的纖維蛋白原水平，因此本法反應的是具有凝血功能纖維蛋白原水平，具有特異性好、快速、簡便，易于掌握的特點[5]，但纖維蛋白原的異質性、纖維蛋白（原）降解產物，以及存在肝素等抗凝物時均使測定結果假性偏低。要準確測定還應注意以下事項：①用0.109 mol/L枸櫞酸鈉溶液按1∶9比例抗凝全血，二者的比例要準確，比例偏高、偏低都使纖維蛋白原假性偏低；②血漿必需是乏血小板血漿，即以3000 r/min室溫離心10 min，除去血小板。否則，血小板中的凝血因子將影響測定結果。

表1 PT-衍生法和凝血酶法測定血漿纖維蛋白原結果比較

凝血酶原時間-衍生法測定纖維蛋白原的原理是源于凝血酶原時間測定后，纖維蛋白原變成纖維蛋白后形成的濁度與纖維蛋白原的含量呈正向比關系，影響凝血酶原時間測定的因素眾多，也必影響到纖維蛋白原的測定，它具有降低成本、檢測方便的特點，但可能導致臨床的誤診誤治，不能在臨床推廣使用。

從表中均值看出，當纖維蛋白原含量≤4 g/L時，凝血酶原時間測定-衍生法結果明顯低于凝血酶法，二者差異明顯；Fib＞4 g/L時，凝血酶原時間測定-衍生法大多高于凝血酶法，二者差異明顯。

從以上分析看出：為確保臨床質量，提高疾病的診斷價值，凝血酶原時間-衍生法測得的纖維蛋白原含量不可靠，而應采用國際上推廣應用的凝血酶法實測纖維蛋白原含量。

[1] 袁慧茹.兩種纖維蛋白原測定方法比較[J].中國誤診學雜志, 2005,5(13):2472-2473.

[2] 顧國龍.血漿纖維蛋白原測定的進展[J].國外醫學(臨床生物化學與檢驗學分冊),2001,22(3):13.

[3] 中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程(第三版)[M].南京:東南大學出版社,2006.

[4] 李春偉,楊艷.血漿纖維蛋白原測定的方法學評價[J].泰山衛生, 2002,26(2):41-42.

[5] 程烽,朱忠勇,王丹,等.5種纖維蛋白原測定方法的比較[J].臨床檢驗雜志,2000,18(1):12.

R446.11

：B

：1671-8194（2014）04-0101-02