HBV感染相關性慢性肝病中IL-18的表達及臨床意義研究

劉元豪

（荊門市第一人民醫院感染疾病科，湖北 荊門 448000）

HBV感染相關性慢性肝病中IL-18的表達及臨床意義研究

劉元豪

（荊門市第一人民醫院感染疾病科，湖北 荊門 448000）

目的 分析不同疾病發展階段慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的外周血IL-18表達以及其臨床意義。方法 收集HBV感染相關性慢性乙肝病患者共58例作為觀察組，并選擇同期在我院門診體檢的健康人58例作為對照組，檢測并對比分析兩組的外周血IL-18以及血清中的HBV DNA含量。結果 HBV感染患者的血清IL-18顯著更高（P＜0.05）；肝硬化與肝癌之間無顯著差異（P＞0.05）；低水平HBV DNA感患者的血清IL-18水平較中、高水平的HBV DNA患者顯著更低（P＜0.05）；血清IL-18水平與HBV DNA、ALT呈正相關（P＜0.05）。結論 HBV感染相關性慢性肝病IL-18的表達參與了HBV感染以后的免疫應答，在感染HBV直至發展成為肝癌的整個過程中具有一定的作用，且其表達水平與HBV DNA水平以及肝功能的損傷程度相關。

慢性病毒性乙型肝炎；乙肝肝硬化；IL-18；原發性肝細胞癌

病毒性乙型肝炎是一種由乙型肝炎病毒（HBV）所引起的傳染性疾病，嚴重威脅著人類的健康。據相關資料顯示，HBV感染可導致肝硬化、肝癌等[1]。本研究對不同疾病發展階段慢性HBV感染患者的外周血IL-18的表達以及其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年1月至2012年12月期間，我院收治的HBV感染相關性慢性肝病患者58例，其中，20例慢性乙型肝炎，19例乙型肝炎肝硬化，19例肝癌。均無其他病毒及寄生蟲感染，無嚴重心、腦、肺等臟器病變，參與本研究前未接受任何放療、化療、手術及免疫治療。同時選擇同期于我院接受治療的HBsAb（+）健康成年人58名作為對照組。

1.2 方法

所有研究對象均于清晨空腹采集靜脈血6 mL，并于溫室下自然凝固2 h，并離心分裝，于-20 ℃儲存備用。①檢測IL-18：采用ELISA（夾心酶聯免疫吸附法）以全自動酶標儀（北京華安麥科生物技術有限公司 提供，型號RT6000）監測IL-18，配套試劑盒產自武漢博士的生物工程有限公司。②定量測定HBV DNA：以熒光定量PRC分析儀（由上海精譜科技有限公司提供）監測HBV DNA，配套試劑產自上海科華生物工程有限公司，具體操作步驟為：分別取待測血清及樣品處理液各100 μL，離心13000 g×10 min，取上清液，并加入樣品處理液B 25 μL與之混合，并離心2000 g×10 s，并于100 ℃下干浴10 min，然后再離心13000 g×10 min，取上清液備用。配置好待擴增樣品，并將其分裝于PCR反應管中，各28 μL，并計入2 μL待用樣本，密封后放入PCR擴增儀中擴增。UNG酶反應在50 ℃循環2 min、預變性于90℃腺下2 min循環1次；于94 ℃下變性循環10 s，40次；最后，退火、延伸以及檢測熒光均于60 ℃下循環30 s，40次。③檢測ALT及膽紅素：采用全自動生化儀進行檢測，配套試劑盒產自上海執誠生物技術有限公司。

1.4 統計學分析

2 結 果

2.1 不同階段HBV感染與IL-18之間的關系

慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌和正常對照組的血清IL-18分別為（1383.8±375.9）、（937.7±357.8）、（889.5±440.7）、（468.1 ±200.3）pg/mL，慢性乙型肝炎患者較正常對照組明顯更高，且顯著高于肝硬化及肝癌患者，P＜均0.05。肝硬化與肝癌之間無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 IL-18與HBV DNA的復制水平之間的關系

根據患者的HBV DNA水平分組，（1-10）×103copy/mL、（1.0001～10）×104copy/mL和＞106分為A、B、C三組，A組顯著高于B、C兩組（P＜0.05），而B、C組之間無顯著差異（P＞0.05）。經線性分析，HBV DNA的復制水平與血清IL-18之間為正相關關系（P＜0.05）。

表1 細胞HBV DNA的復制水平與血清IL-18之間的關系

2.3 IL-18與ALT之間的關系

經線性相關性分析，IL-18與ALT之間呈顯著正相關（P＜0.05）。詳見表2。

表2 IL-18與ALT之間的關系

3 討 論

IL-18具有免疫調節功能，主要是由單核巨噬細胞、B細胞、Th1細胞等分泌，可有效促進Th1細胞的增殖及其免疫應答，還可促進炎性因子以及趨化性因子的產生[2]。IL-18基因所修飾的腫瘤疫苗可促進腫瘤的清除，可上調NK細胞以及T細胞的表達，進而促進Th1細胞的毒性作用，可促進HBV的清除，但可能加劇肝細胞損傷。而如果患者的Th1細胞受到抑制，則其細胞免疫功能無法被有效激活，不利于機體的抗腫瘤反應，導致腫瘤細胞生存和發展[3]。

本研究結果顯示，HBV DNA中高水平患者的血清IL-18水平較低水平者顯著更高，且HBV DNA與血清IL-18水平之間呈正相關。提示病毒的復制水平越高，患者的血清IL-18的表達水平也隨之增加，可促進HBV的清除，但容易造成肝細胞損傷。且IL-18與ALT水平之間存在顯著線性相關，提示血清IL-18越高，患者的肝細胞損傷程度越重。當IL-18的表達降低時，Th1細胞因子的分泌明顯減少，此時，細胞的免疫功能無法被有效激活，不利于機體的抗腫瘤免疫反應[4]。IL-18主要是通過肝臟進行代謝的，隨同膽汁一起排至腸道中，肝細胞的損傷越嚴重，肝臟對于IL-18的處理能力就越低，且其炎性壞死物還可導致通道堵塞而引起IL-18的排泄功能降低，進而加重體內的蓄積。從HBV感染發展至肝癌過程是多種因素共同作用的結果，作用機制較為復雜。正常人的血清IL-18的表達較穩定，而當感染HBV以后，血清IL-18的水平將發生變化[5，6]。IL-18細胞因子是導致HBV感染以后病情發展的重要因素，可清除HBV病毒，但可導致肝細胞損傷，通過監測患者的血清IL-18水平可了解患者的機體免疫狀態，為治療提供依據。

[1] 張笑添.IL-8基因多態性及血清水平與慢性HBV感染結局的相關研究[D].太原:山西醫科大學,2011.

[2] 宋文慧.亮氨酸氨基肽酶在HBV慢性肝病鑒別診斷中的意義[J].實驗與檢驗醫學,2008,26(1):13-14.

[3] 胡蓉,劉文群,陳曉紅等.贛州地區303例慢性肝病患者HBV基因型別檢測及意義[J].山東醫藥,2011,51(31):79-80.

[4] Migita K,Sawakami-Kobayashi K,Maeda Y,et al.Interleukin-18 promoter polymerphisms and the disease progression of Hepatitis B virus-related liver disease[J].Translat Res,2009,153(2):91-96.

[5] Lemmers A,Gustot T,Durnez A,et al.An inhibitor of interleukin-6 trans-signalling,sgp130,contributes to impaired acute phase response in human chronic liver disease.[J].Clin Exper Immunol,2009,156(3):518-527.

[6] 張文堅,萬克青,龔環宇等.IL-18與HBV感染及拉米夫定治療的相關性[J].中國現代醫學雜志,2008,18(7):952-955.

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：1671-8194（2014）06-0133-02