CIKCIK細(xì)胞對(duì)化療后晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效評(píng)估

王秀文，易基群，梁繼珍

臨床研究

CIKCIK細(xì)胞對(duì)化療后晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效評(píng)估

王秀文，易基群，梁繼珍

廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院腫瘤科，廣東廣州510220

目的探觀察化療后晚期非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者給予細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinduced killer cells,CIK）治療后免疫功能及生活質(zhì)量變化，探討CIK細(xì)胞治療晚期肺癌的近期療效及安全性。方法收集化療后晚期NSCLC患者61例，選取同期最佳支持治療的61例化療后晚期NSCLC患者作為對(duì)照組，比較CIK細(xì)胞治療后外周血T淋巴細(xì)胞亞群、KPS評(píng)分、近期療效及評(píng)估安全性。結(jié)果CIK治療組患者外周血CD3+、CD3+/CD4+細(xì)胞比率較治療前顯著上升（P＜0.05），對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群沒有變化。CIK細(xì)胞治療后患者KPS評(píng)分為67.27±8.94，較治療前顯著提高（P＜0.05）。CIK治療組疾病控制率為85.25％，顯著高于對(duì)照組的59.01％（P＜0.05）。CIK治療組中出現(xiàn)4例一過(guò)性發(fā)熱和3例皮疹患者，未見其他明顯毒副作用。結(jié)論CIK治療化療后晚期非小細(xì)胞肺癌患者，改善免疫功能及生活質(zhì)量，提高近期疾病控制率，安全性好。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；非小細(xì)胞肺癌；免疫系統(tǒng)；生活質(zhì)量；療效

肺癌的發(fā)病率和病死率均居各類惡性腫瘤之首，且仍呈持續(xù)上升趨勢(shì)［1］，非小細(xì)胞肺癌約占肺癌的80％，65％~75％肺癌患者確診時(shí)已為ⅢB~Ⅳ期，全身化療是晚期NSCLC的主要治療手段。目前化放療在一定程度上能殺滅絕大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞，但是由于其嚴(yán)重的毒副反應(yīng)、晚期腫瘤患者機(jī)體免疫力低下等因素，導(dǎo)致化療方案的實(shí)施和獲益受到極大的限制［2］。CIK免疫細(xì)胞治療已逐步在臨床上應(yīng)用，它作為繼手術(shù)、化療、放療等傳統(tǒng)療法之后的新治療手段，在腫瘤的治療中發(fā)揮著重要的作用。與傳統(tǒng)化療不同，抗腫瘤細(xì)胞免疫治療對(duì)患者沒有明顯的毒副反應(yīng)，且患者耐受性更好，生活質(zhì)量明顯提高。本研究對(duì)化療后的晚期NSCLC進(jìn)行CIK細(xì)胞治療研究，探討CIK細(xì)胞治療對(duì)化療后晚期NSCLC患者免疫功能、療效及安全性的作用及影響。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

本研究選取我院腫瘤科2010年9月~2013年9月收治的化療后接受CIK治療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者61例作為實(shí)驗(yàn)組，選取同期化療后對(duì)癥隨訪的晚期非小細(xì)胞肺癌患者61例作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組61例均為ⅢB~Ⅳ期患者，男患35例，女患26例，平均年齡56.42歲，ⅢB期患者19例，Ⅳ期患者42例。對(duì)照組61例均ⅢB~Ⅳ期患者，男患37例，女患24例，平均年齡55.78歲，ⅢB期患者24例，Ⅳ期患者37例。經(jīng)比較，兩組患者在年齡、性別、疾病分期以及病理類型等一般資料差異無(wú)顯著，P>0.05。患者均經(jīng)組織病理學(xué)確診肺癌，KPS評(píng)分≥50，預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月，治療前血常規(guī)、心電圖正常，肝腎功能各指標(biāo)正常。本臨床應(yīng)用程序均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)，接受生物治療患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 CIK細(xì)胞的制備及回輸CIK組患者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者外周血50 ml，肝素抗凝，在符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室，用Ficoll淋巴細(xì)胞分離液分離并收集單個(gè)核細(xì)胞。用自體血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，加入IFN-γ 1000 U/ml，置于37℃、5％CO2孵箱中培養(yǎng)，24 h后加入IL-2 1000 U/ml和抗CD3單抗50~100 ng/ml。此后每2~3天更換培養(yǎng)液并補(bǔ)加IL-2。培養(yǎng)至第8天時(shí)取部分細(xì)胞進(jìn)行細(xì)菌及霉菌檢測(cè)，如結(jié)果陰性則繼續(xù)培養(yǎng)。第13天檢測(cè)細(xì)胞殺傷活性，用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)，總數(shù)達(dá)2×109以上后收集細(xì)胞，懸浮于1％白蛋白生理鹽水中，分5次于培養(yǎng)的第15、17、19、21、23天回輸給患者，回輸?shù)?天起每日皮下注射rhIL-2增強(qiáng)CIK細(xì)胞活性。對(duì)照組患者在化療后給予一般對(duì)癥支持治療。每例患者治療1個(gè)療程，每療程回輸細(xì)胞總數(shù)>1×1010。

1.2.2 觀察指標(biāo)

1.2.2.1 檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞表型化療結(jié)束后2周及CIK治療完成后2周采集患者外周血2 ml，F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞亞群變化。

1.2.2.2 生活質(zhì)量評(píng)估以Karnofsky為標(biāo)準(zhǔn)比較化療后2周與CIK細(xì)胞免疫治療后2周患者的生活質(zhì)量。

1.2.2.3 評(píng)價(jià)近期療效61例患者均可評(píng)價(jià)療效，按RECIST評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)在患者1周期治療后通過(guò)CT、MRI、PET-CT等檢查進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究所得數(shù)據(jù)全部采用SPSS13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，一般資料采取均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的表現(xiàn)形式，組間比較采用t檢驗(yàn)，兩組間率的比較采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化

所有患者均完成1個(gè)療程的CIK細(xì)胞輸注，每次細(xì)胞回輸數(shù)量在2.0×109以上。CIK細(xì)胞干預(yù)治療后患者CD3+、CD3+/CD4+細(xì)胞亞群比率提高，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），CD3+/CD8+細(xì)胞亞群在CIK治療后提高，但未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可能與樣本量小、追蹤時(shí)間短有關(guān)。對(duì)癥治療組CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+細(xì)胞亞群百分?jǐn)?shù)均未增加。說(shuō)明CIK治療對(duì)化療后晚期非小細(xì)胞患者外周血CD3+、CD3+/CD4+細(xì)胞亞群顯著增加作用，CD3+/CD8+有上升趨勢(shì)，其升高作用優(yōu)于一般對(duì)癥治療（表1）。

表1 61例患者治療前后外周血T細(xì)胞表型變化Tab.1Changes of T-cell phenotype in peripheral blood of 61 patients after CIK cells treatment(％,x±s,n=61)

2.2 CIK治療前后肺癌患者生活質(zhì)量變化

CIK治療前后61例肺癌患者的KPS評(píng)分為60.87±6.93和67.27±8.94，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CIK治療后患者體力狀況改善，生存質(zhì)量提高；而對(duì)照組的61例患者治療前后的KPS評(píng)分為60.41±8.55和61.34±7.65，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本結(jié)果說(shuō)明CIK治療能夠明顯改善化療后晚期肺癌患者的生活質(zhì)量（表2）。

表2 CIK細(xì)胞治療前后Karnofsky評(píng)分Tab.2 The Karnofsky score of 61 patients before and after CIK cells treatment(x±s,n=61)

2.3 近期療效評(píng)價(jià)

CIK細(xì)胞治療結(jié)束后經(jīng)影像學(xué)評(píng)價(jià)，CIK治療組完全緩解3例，16例部分緩解，33例穩(wěn)定，客觀緩解為31.15％，對(duì)癥治療組是27.87％，無(wú)顯著差異。但CIK治療組疾病控制率較對(duì)照組明顯提高（85.25％vs59.01％，P＜0.05），存在顯著性差異。提示CIK細(xì)胞治療可有效控制化療后晚期非小細(xì)胞肺癌進(jìn)一步生長(zhǎng)，多數(shù)接受CIK治療的患者疾病維持穩(wěn)定(表3)。

表3 近期療效評(píng)價(jià)Tab.3 Short term evaluation of therapeutic effects(x±s,n=61)

2.4 CIK細(xì)胞治療的安全性評(píng)價(jià)

CIK細(xì)胞回輸過(guò)程中及回輸后最常見的不良反應(yīng)為發(fā)熱，共4例，低熱為主，均為一過(guò)性，自行緩解或?qū)ΠY處理后緩解，未出現(xiàn)高熱、寒戰(zhàn)。3例出現(xiàn)皮疹、乏力等癥狀，未予處理自行緩解。未出現(xiàn)明顯肝腎功能異常、骨髓抑制等不良反應(yīng)。

3 討論

目前中國(guó)乃至全球肺癌的發(fā)病率不斷上升，在我國(guó)位于各癌癥之首。由于大多數(shù)肺癌患者就診時(shí)已是晚期，聯(lián)合含鉑類藥物的化療方案或配合局部放療是晚期NSCLC的主要治療手段［3］。化療可使晚期肺癌患者CD3+、CD4+T細(xì)胞比例下降，免疫功能降低［4］。CIK細(xì)胞治療是近年發(fā)展起來(lái)的腫瘤過(guò)繼免疫治療的全新策略［5］，近幾年的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，CIK治療在各種癌癥中的應(yīng)用均取得了一定的療效，特別是在腎細(xì)胞癌、胃癌以及非小細(xì)胞肺癌［6］。CIK細(xì)胞能調(diào)節(jié)和增強(qiáng)患者自身免疫功能，抑制腫瘤生長(zhǎng)和清除殘留微小病灶的作用，可以有效提高腫瘤的生存率和治愈率，防止腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移［7］。本研究將CIK細(xì)胞作為化療后維持治療的手段，觀察其治療晚期非小細(xì)胞肺癌患者前后免疫系統(tǒng)的變化規(guī)律，分析其對(duì)患者生活治療和近期療效的影響，并評(píng)估其安全性。

本研究顯示化療后晚期非小細(xì)胞肺癌經(jīng)CIK細(xì)胞治療后，CD3+、CD3+/CD4+細(xì)胞亞群百分率明顯升高，外周血T細(xì)胞亞群發(fā)生變化，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)癥治療組無(wú)顯著改變，表明患者治療后免疫功能得到改善。楊志銀等［8］亦報(bào)道了CIK治療干預(yù)后T淋巴細(xì)胞亞群百分?jǐn)?shù)的顯著提高，與本研究結(jié)果一致。同時(shí)在本研究中61例肺癌患者CIK治療后的KPS評(píng)分較治療前也有顯著提高，表明CIK治療明顯改善患者的生活質(zhì)量，是CIK治療的優(yōu)勢(shì)所在。在療效方面，本結(jié)果顯示，CIK治療組疾病控制率較對(duì)照組明顯提高，多數(shù)接受CIK治療的患者疾病維持穩(wěn)定，羅虎等［9］亦報(bào)告CIK治療顯著提高肺癌患者治療的有效率及疾病控制率。本研究中，CIK治療組少數(shù)患者出現(xiàn)發(fā)熱、皮疹等，均易緩解，未出現(xiàn)肝腎功能、骨髓抑制等不良反應(yīng)，安全性高，耐受性好。

綜上所述，CIK細(xì)胞治療能夠顯著提高化療后晚期非小細(xì)胞肺癌患者的免疫功能，改善患者生存質(zhì)量，提高近期疾病控制率，安全性好，值得在臨床中廣泛推廣。

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The Study of Cytokine-induced Killer Cells Treating Patients with Advanced Non-small Cell Lung Cancer after Chemotherapy

Wang Xiuwen,Yi Jiqun,Liang Jizhen
Department of Medical Oncology,Guangzhou Red Cross Hospital,Guangzhou 510220,China

ObjectiveTo investigate the changes of immunity and life quality after the treatment of cytokine induced-killer cells （CIKs）for patients with advanced NSCLC after chemotherapy，and to assess the effectiveness and safety of CIKs treatment.MethodSixty-one patients with advanced NSCLC after chemotherapy treated with CIKs were enrolled as CIKs group，and another sixty-one post-chemotherapy patients of advanced NSCLC treated with optimal supportive care during the same period were enrolled as control group．Before and after CIK cells being transfused back,the changes of immune system including subsets of T cells，quality of life(Karnofsky score),therapeutic effects and side effects were compared between the two groups.ResultCompared with before CIK cells therapy,the ratios of CD3+and CD3+/CD4+T cells significantly increased (P＜0.05),while there was no significant change in the control group.KPS score significantly increased in the CIKs group, which was 67.27±8.94（P＜0.05）.The disease control rate(DCR)were 85.25％in the CIKs group，which was significantly higher than those in the control group(59.01％)（P＜0.05）．The major adverse events were transient fever and skin rash,and no other side effect was observed.ConclusionCIK cells treatment is safe and effective for advanced NSCLC patients.It can improve the immune imbalance,DCR and quality of life of the patients．

cytokine-induced killer cell;NSCLC;immunity;effectiveness;quality of life

2014-05-30

王秀文，研究生，主治醫(yī)師，E-mail:wnwnwang@163.com