AD患者血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平、全血黏度變化及其相關性

蘭 杰，李曉亮，薛 蓉，李春芳，宋敬敬，孫續國

(1天津醫科大學，天津300203;2天津醫科大學總醫院)

阿爾茨海默病(AD)是老年癡呆的一種常見類型，其臨床表現為進行性認知功能損害［1］。到2030年，AD患病人數可能達6 600萬［2］。然而，AD致病機制尚未完全闡明，其主要存在兩種假說，淀粉樣變假說認為由淀粉樣蛋白沉積引發的神經毒性反應是導致疾病發生的主要原因，而血管性假說認為由血管系統紊亂導致的腦循環低灌注是導致認知功能受損的主要原因［1］。作為一種復雜的進展性疾病，其致病機制必然呈現多因素化。為探討血漿成分改變對AD疾病發生、發展中的重要作用，我們觀察了AD患者血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平及全血黏度變化，并分析其相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年11月～2014年3月天津醫科大學總醫院收治的AD患者30例，男24例，女6 例;年齡(69.40±8.57)歲;MMSE 評分(21.1±3.6分)。納入標準:符合中國精神障礙分類與診斷(CCMD-3)標準;依據簡易精神狀態檢查(MMSE)判定癡呆程度;Hachin-sb缺血指數量表(HIS)得分＜4分，以排除血管性癡呆和混合性癡呆。另選同期年齡、性別與AD匹配的非癡呆健康對照人群30例(對照組)，男24例，女6例;年齡(65±4.4)歲;MMSE 評分(26.7±1.2)分。納入標準:年齡60歲以上，無嚴重軀體疾病，無記憶障礙主訴，無認知功能損害病史。兩組一般資料無統計學差異。

1.2 血漿淀粉樣變程度判斷 采用硫磺素 T法［3，4］。將6 mol/L ThT 溶液與血漿共孵育 20 min后，兩者結合可產生一定波長的熒光強度，采用FL F-2500熒光分光光度計檢測淀粉樣纖維熒光強度，計算淀粉樣纖維水平，以此判斷血漿淀粉樣變程度。

1.3 血液流變學指標及血脂檢測 所有受試者空腹12 h，于次日清晨7時～8時抽取靜脈血5 mL，注入含肝素鈉(20 U/mL)抗凝劑的真空試管(肝素抗凝采血管)內，搖勻抗凝，LBY-N6A血流變儀檢測血液流變學指標［全血黏度(低切1.001/s)、全血黏度(低切5.001/s)、全血黏度(低切30.001/s)、全血黏度(高切200.001/s)、血漿濃度、血沉、紅細胞壓積、全血高切相對指數、全血低切相對指數、血沉方程k值、紅細胞聚集指數、全血低切還原黏度、全血高切還原黏度、紅細胞剛性指數、紅細胞變形指數TK1］;同時抽取2 mL不抗凝靜脈血，采用TBA-120FR全自動生化儀檢測血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0統計軟件。計量資料以±s表示，組間均數作獨立樣本t檢驗，各指標間的關系采用多元線性回歸分析法。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血漿淀粉樣纖維水平比較 觀察組及對照組血漿淀粉樣纖維水平分別為(16.63±5.67)、(12.83±0.27)U/mL，兩組比較，P ＜0.05。

2.2 兩組血液流變學指標比較 觀察組及對照組全血黏度(低切 1.001/s)分別為(18.16±3.60)、(17.92±0.40)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(低切5.001/s)分別為(8.64±1.45)、(8.40±0.37)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(低切30.001/s)分別為(5.32±0.76)、(5.09±0.16)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(高切 200.001/s)分別為(4.16±0.54)、(3.74±0.15)mPa·s，兩組比較，P ＜0.05;血漿濃度分別為(1.40±0.10)、(1.33±0.07)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;血沉分別為(11.80±6.18)、(8.30± 6.09)mm/h，兩組比較，P ＞0.05;紅細胞壓積分別為(0.43±0.61)、(0.45±0.31)mm/h，兩組比較，P ＞0.05;全血高切相對指數分別為 2.94±0.22、2.74±0.26，兩組比較，P＞0.05;全血低切相對指數分別為12.79±1.78、14.24±1.32，兩組比較，P ＞0.05;血沉方程 k值分別為39.61±13.08、32.26±15.27，兩組比較，P ＞0.05;紅細胞聚集指數分別為4.34±0.36、4.13±0.14，兩組比較，P ＞0.05;全血低切還原黏度分別為(38.36±2.77)、(38.81±2.50)mPa·s，兩組比較，P＞0.05;全血高切還原黏度分別為(6.33±0.40)、(6.19±0.49)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;紅細胞剛性指數分別為 4.50±0.34、4.70±0.50，兩組比較，P＞0.05;紅細胞變形指數 TK分別為0.82±0.08、0.81±0.07，兩組比較，P ＞0.05。

2.3 兩組血脂水平比較 結果見表1。

表1 兩組血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白比較(mmol/L，±s)

表1 兩組血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白比較(mmol/L，±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05

組別 總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白 低密度脂蛋白觀察組 4.71±1.24*1.87±1.12 1.21±0.35 2.70±0.84對照組3.95±0.22 1.36±0.11 1.40±0.17 2.78±0.36

2.4 血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平與全血黏度的相關性 血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平與全血黏度(高切)呈正相關趨勢(r分別為0.598、0.664，P 均 ＜0.05)。回歸方程為 ^Y=2.798+0.070X1+0.027X2，^Y 為全血黏度(高切)，X1為血漿淀粉樣纖維水平，X2為血清總膽固醇。

3 討論

血液流變學主要研究血液在血管中流動的規律，以及血液中有形成分(細胞)的變形性和無形成分(血漿)的流動性對血液流動的影響，以反映各組織、器官的血供狀態。全血黏度升高會引發微循環滯留時間延長，易致微血栓形成以及腦組織血液灌注受損，進一步導致腦組織能量以及氧氣供應受損，觸發神經元細胞降解、死亡。研究［5］指出，AD患者腦血流量明顯低于年齡匹配的非癡呆患者，揭示了腦組織血液低灌注是導致AD發病的危險因素之一。改善AD患者外周血流變學參數，可減輕腦組織低灌注，延緩疾病發展。本研究顯示，觀察組全血黏度(高切)值高于對照組，提示AD患者外周血紅細胞變形能力降低。

研究［6］發現，AD患者外周循環中 ＞15%的紅細胞體積變大，與正常非癡呆老年人相比具有顯著性差異;同時，對紅細胞膜蛋白質組學進行研究，發現膜蛋白與骨架蛋白組成發生改變，參與是導致紅細胞變形能力降低的因素之一［7］。此外，血漿蛋白組成影響紅細胞的變形能力。本研究顯示，觀察組血漿淀粉樣纖維水平高于對照組，提示血漿淀粉樣變程度的變化與疾病的發生有關。研究［8～16］指出，血漿淀粉樣蛋白β(淀粉樣蛋白的一種類型)可以與紅細胞結合，引發紅細胞結構和功能的改變，如體積變大，變形能力減弱，膜蛋白和骨架蛋白構成發生改變，其發生機制可能與Aβ介導的氧化應激反應［12］，膜脂質過氧化，血紅蛋白熒光降解產物增加，以及聚集的Aβ纖維可在紅細胞質膜表面形成孔道，破壞細胞膜屏障，導致細胞內外電解質紊亂等有關。血漿中銅離子與Aβ纖維結合后，會加劇纖維的細胞毒性反應。同時，Aβ可介導紅細胞與血管內皮細胞的結合，破壞血管的完整性，進一步加劇組織缺氧，導致大腦低灌注［17］。

本研究還發現，觀察組血清總膽固醇高于對照組，提示膽固醇水平升高可引發血液高黏狀態，降低腦血流供應，促進疾病發生、發展。一方面，膽固醇水平的升高增加了血漿蛋白含量，直接造成全血黏度的增加;另一方面，高血脂可以使患者紅細胞膜質成分發生變化，使紅細胞膜膽固醇、膽固醇/磷脂值增加從而使紅細胞變形能力下降，同時血脂還能吸附于紅細胞表面，使其表面電荷被屏蔽，從而導致紅細胞表面電荷減少，進而其排斥力降低，血液度增加［18］。AD患者腦組織神經元細胞質膜膽固醇水平含量增高，可通過調節AβPP剪切酶活性促進Aβ的產生與釋放［19］。降低膽固醇藥物，如他汀類藥物，對AD具有治療作用［20］。腦組織6% ～7%膽固醇含量可與循環中的膽固醇進行交換，當循環中膽固醇水平升高時可增加腦組織膽固醇含量，由此引發一系列病理變化，如神經元細胞質膜膽固醇含量增多導致細胞流動性降低;由吸收增多導致的細胞內高膽固醇水平可增加AβPP小泡分泌，進而增加Aβ的產生與沉積;細胞內外膽固醇代謝紊亂，可促進tau蛋白磷酸、抑制樹突細胞生長、破壞神經突觸的生成和可塑性，最終導致神經元細胞的降解［21］。降低循環中膽固醇水平可有效的減少Aβ的產生，進而減輕淀粉樣蛋白的細胞毒效應，對AD預防與治療具有重要作用。

多元線性回歸分析表明，血漿淀粉樣變程度、血清膽固醇水平與全血黏度(高切)具有一定相關性，且血漿淀粉樣變程度對全血黏度的影響作用強于血漿膽固醇對全血黏度的影響(回歸方程中血漿淀粉樣變程度的偏相關系數大于血漿膽固醇的偏相關系數)，其原因可能為除淀粉樣蛋白直接增加全血黏度、參與紅細胞膜氧化應激損傷導致紅細胞變形能力降低外，血清膽固醇水平升高可影響神經元細胞淀粉樣前體蛋白代謝，加速淀粉樣蛋白的產生和沉積，通過腦血屏障，導致外周循環Aβ水平升高，進一步加劇淀粉樣蛋白的損害作用［22～24］。

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