黃精提取液對正常小鼠抗疲勞能力的影響及機制探討

盧煥俊，劉思源，李香蘭

(延邊大學醫學院，吉林延吉133002)

黃精是重要的藥用植物，含有黃精皂苷、煙酸、糖類、醌類、氨基酸及微量元素，具有補腎益精、滋陰潤燥之功效，用于滋補強身和治療腎虛精虧，肺虛燥咳以及脾胃虛弱之證，是中藥常用的藥物之一［1］。已有研究［2，3］表明，黃精具有免疫激發、增強免疫、延緩衰老、抗病毒等作用。但目前關于黃精對于抗疲勞和抗氧化方面的研究內容較少。2013年12月～2014年4月，我們觀察了黃精提取液對正常小鼠抗疲勞能力的影響，并探討其可能機制。

1 材料與方法

1.1 黃精提取液制備 中藥黃精購于延邊中醫院，用一蒸水熬制成生藥量為1 g/mL的提取液，再用一蒸水配制成濃度分別為 0.5、1、1.5 g/mL 的提取液備用。

1.2 實驗動物分組及處理 清潔級雄性昆明種小鼠96只，體質量18～22 g，由延邊大學醫學部實驗動物科提供。選擇48只雄性昆明種小鼠，隨機分為4 組各12 只，A、B、C 組小鼠分別以5、10、15 g/kg黃精提取液灌胃，D組給予等容量蒸餾水，連續灌胃15 d，用于負重游泳力竭實驗。另取48只雄性昆明種小鼠，隨機分為4組各12只，E、F、G組分別以5、10、15 g/kg黃精提取液灌胃，H組予等容量蒸餾水，連續灌胃15 d，用于肌肉SOD活力和MDA水平測定實驗。

1.3 小鼠一般狀態和大體病理觀察 在15 d的灌胃期間里，注意觀察各組動物的體毛、呼吸、攝食、飲水、大小便、精神狀態的變化。實驗結束后，各組動物均進行解剖，觀察小鼠大體病理情況(心、肝、脾、肺、腎等)。

1.4 小鼠游泳力竭時間測定 末次灌胃結束30 min后，在小鼠尾根部1cm處負重小鼠體質量的5.5%，讓小鼠在水深 30cm、水溫(25.0±0.5)℃的游泳箱中游泳至力竭。力竭時間為小鼠開始游泳到小鼠下沉不再浮上來5 s的時間。分別記錄各組小鼠游泳力竭時間。

1.5 小鼠肌肉組織SOD活力和MDA水平測定灌胃結束后30 min即進行無負重游泳90 min，后取腓腸肌組織0.2～0.3 g放入相當于其9倍體積的生理鹽水中，用小剪刀切碎，勻漿器勻漿15 s，停30 s，反復3 次。3 000 r/min，離心15 min，取上清液以200 μL/管分裝，－80℃冷凍保存，采用酶聯免疫法測定SOD活力、MDA水平。

1.6 統計學方法 采用SPSS11.5統計軟件。計量資料以±s表示，進行單因素方差分析及t檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 小鼠一般狀態和大體病理比較 實驗期間，所有小鼠一般狀態均良好。各組動物的進食量、大小便、體毛、精神狀態等均無異常。實驗結束后，各組動物均進行解剖，肉眼觀察腎、脾、心、胃腸、肝和肺等臟器均無明顯異常。說明黃精提取液不會導致實質性臟器的大體病理損傷。

2.2 小鼠游泳力竭時間比較 A、B、C、D組小鼠游泳力竭時間分別為(14.20±3.95)、(17.60±3.70)、(17.82±2.92)、(12.20±2.58)min，B、C 組與D 組比較，P均 ＜0.05。

2.3 小鼠肌肉組織SOD活力、MDA水平比較 結果見表1。

表1 各組小鼠肌肉組織SOD活力、MDA水平比較(±s)

表1 各組小鼠肌肉組織SOD活力、MDA水平比較(±s)

注:與 H 組比較，*P ＜0.05;與 E 組比較，△P ＜0.05

組別 SOD(U/mg) MDA(nmol/mg)E組29.17±3.94 12.20±1.42 F 組 33.46±3.51* 10.55±1.28*G 組 36.63±3.96＊△ 10.07±1.06*H組25.53±3.78 13.55±2.54

3 討論

黃精作為一種傳統名貴中藥具有寬中益氣、益腎填精、滋陰潤肺、生津補脾的功效。在臨床上，黃精主治肺燥干咳、體虛乏力、心悸氣短、久病津虧口干、糖尿病、高血壓等。此外大量研究［4～9］表明，黃精在抗衰老、降血脂、降血糖及維護心血管系統功能和抗炎抗病原微生物等方面有一定的功效。

肌肉疲勞是一種復雜的現象，當發生肌肉疲勞時機體不能將它的功能保持在某一特定水平或不能維持某一預定的運動強度，表現為運動時能量體系輸出功率和肌肉力量的下降或內臟器官功能的下降而不能維持運動強度，力竭是運動性疲勞的特殊形式，是在疲勞的基礎上降低運動強度和改變運動條件，機體繼續保持運動直到完全不能運動的現象，是疲勞長期積累而引起機體功能紊亂的病理狀態［10，11］。本研究顯示，B、C 組小鼠游泳力竭時間長于D組，表明黃精提取液可以有效的提高小鼠的運動以及肌肉抗疲勞能力。

文獻［12］發現，生物體內有多種活性氧自由基的存在。氧自由基產生過多或清除能力下降與癌癥、衰老及自身免疫功能喪失等多種疾病的發生、發展密切相關。而抗氧化劑就是通過阻止自由基鏈反應的啟動與延伸，終止自由基反應從而預防或減輕自由基對生物機體的損傷，達到疾病防治的目的［13］。在缺血、缺氧、過度疲勞時都可以引起氧化損傷，此時細胞色素氧化酶無力將氧還原成水，氧原子便會被奪去一個電子，由無害的氧變成具有殺傷力的活性氧自由基［14，15］。氧自由基的過氧化殺傷，主要是破壞細胞膜的結構和功能，破壞線粒體，斷絕細胞的能源，毀壞溶酶體，使細胞自溶，此時體內氧自由基大量堆積，而大量堆積會導致細胞損傷、衰老、癌變等。SOD是體內重要的抗氧化酶，其作用是維持體內自由基的動態平衡，防止脂質過氧化物MDA對機體的損害［16］。SOD能與體內各種氧化酶結合，清除超氧陰離子自由基(O2－)，終止自由基連鎖反應，維護細胞功能免受損傷［17，18］。另有研究［19］顯示，運動中自由基的大量產生和血漿脂質過氧化的顯著升高，是導致運動性疲勞產生的重要原因。本研究顯示，F、G組小鼠肌肉組織SOD活力強于H組，E組弱于G組;F、G組小鼠肌肉組織MDA水平低于H組。提示黃精提取液高中劑量使小鼠清除代謝過程中所產生的自由基的抗氧化能力顯著提高。

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