胃癌病人血清與癌組織nm23H1蛋白表達及臨床病理意義

宋培鐸,洪光晨

(青島市市南區人民醫院普外科,山東青島 266002)

胃癌病人血清與癌組織nm23H1蛋白表達及臨床病理意義

宋培鐸,洪光晨

(青島市市南區人民醫院普外科,山東青島 266002)

目的研究胃癌病人血清、癌組織中nm23H1蛋白的表達及與臨床病理特征的關系。方法采用ELISA法及免疫組織化學S-P法,檢測69例胃癌病人血清、癌組織中nm23 H1蛋白的表達情況,并分析其與臨床病理特征的關系。結果胃癌病人血清、癌組織中nm23H1蛋白的表達與正常對照組比較差異有顯著性(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05)。胃癌病人血清、癌組織中nm23H1蛋白的表達與淋巴結轉移及腫瘤臨床分期有關(χ2＝12.30、5.30,t＝14.67、6.42,P＜0.05)。結論胃癌病人血清及癌組織中nm23H1蛋白的表達下調,nm23H1蛋白可以作為評估胃癌病人預后的指標。

胃腫瘤;nm23H1;預后

腫瘤的侵襲、轉移是目前研究的一個熱點問題[1-6],發病率和死亡率均占我國消化道腫瘤首位的胃癌,其生物學行為具侵襲性,總體療效近幾年并未獲明顯改善。腫瘤的生長分化和侵襲轉移是影響胃癌預后的主要因素,有多種基因參與調控胃癌的各項復雜生物學行為。除TNM分期外,目前能準確判斷胃癌預后的指標較少。由于影像學檢查等手段難以準確判斷淋巴結的轉移情況,術前無法對胃癌做出準確的TNM分期。本研究旨在探討胃癌病人血清、癌組織中nm23 H1蛋白的表達及其與臨床病理特征的關系。現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2009年5月—2010年10月,我院手術切除的胃癌病人的標本69例,男49例,女20例;平均年齡65.1歲。入選標準:術前病人均未行化、放療;有完整的臨床、病理及隨訪資料。Lauren分型:腸型31例,彌漫型28例。伴淋巴結轉移者51例。臨床病理分期采用UICC胃癌國際統一TNM新分期法:Ⅰa期6例,Ⅰb期13例,Ⅱ期16例,Ⅲa期17例,Ⅲb期12例,Ⅳ期5例。并隨機選取同期就診的非腫瘤病人20例作為正常對照組。

1.2 實驗方法

分別采集受檢者治療前不抗凝靜脈血2 m L,置室溫自然凝固后,離心10 min,取上清液置于低溫冰箱中備用。以全自動生化分析儀,采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)檢測nm23H1蛋白的水平。實驗操作及結果判定均嚴格按照試劑盒說明書的要求并由專人完成。采用免疫組化S-P法檢測腫瘤組織中nm23 H1蛋白的表達。石蠟切片常規脫蠟至水,室溫孵育30 min,微波修復抗原,以正常羊血清室溫孵育10 min,傾去血清,滴加一抗工作液,PBS沖洗。37℃溫箱孵育120 min,滴加二抗工作液,37℃溫箱孵育30 min,滴加鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶溶液,37℃孵育10 min,DAB顯色,封固,顯微鏡觀察。每次實驗用已知陽性切片作為陽性對照,以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定

隨機選擇20個視野,高倍鏡下計數500～1 000個細胞中的陽性細胞,計算nm23H1陽性細胞百分率。根據陽性細胞數量及顯色強弱分為:陰性,陽性細胞＜10%;陽性,陽性細胞≥10%。

1.4 統計學分析

應用SPSS 12.0軟件進行分析。計數資料組間比較采用χ2檢驗,計量資料組間比較采用t檢驗。

2 結 果

2.1 兩組nm23H1蛋白的表達

胃癌組織中nm23H1蛋白表達陽性與陰性分別為32、37例,正常對照組分別為18、2例;胃癌組血清中nm23H1蛋白水平為(361.14±129.79)μg/ L,正常對照組為(570.87±64.96)μg/L,胃癌病人血清、癌組織中nm23 H1蛋白的表達與正常對照組比較差異有顯著性(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05)。

2.2 nm23 H1的表達與胃癌病人臨床特征的關系

nm23H1蛋白的表達與胃癌病人的年齡、性別、Lauren分型無關(P＞0.05),與病人淋巴結轉移及臨床TNM分期有關(χ2＝12.30、5.30,t＝14.67、6.42,P＜0.05)。見表1。

表1 胃癌病人血清及胃癌組織中nm23H1的表達與臨床病理特征的關系

3 討 論

作為一種轉移抑制基因,nm23倍受關注。許多研究結果表明,nm23基因的表達水平與乳癌、結腸直腸癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤、喉鱗狀細胞癌、鼻咽癌、甲狀腺癌等腫瘤侵襲轉移呈顯著負相關[7-15]。nm23H1基因是1988年美國STEEG等[16]首次從小鼠K-1735黑色素瘤不同轉移潛能的細胞系中分離出來的。nm23 H1基因定位于染色體17q22[17], nm23H1蛋白的改變與腫瘤的浸潤轉移有關[18]。KODERA等[19]對胃癌的研究結果顯示,nm23H1蛋白表達與淋巴結轉移呈負相關。胡建昆等[20]采用胃癌國際統一的新TNM分期法對343例胃癌病人進行分析,結果Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ期的5年生存率分別為100%、82.69%、70.37%、48.44%、25.00%及7.69%,差異均有顯著性,分期與預后具有直接的關系。

本研究結果顯示,nm23H1蛋白的表達與胃癌病人的年齡、性別、Lauren分型無關。胃癌病人血清、癌組織中nm23H1蛋白的表達與正常對照組比較差異有顯著性,胃癌病人血清、癌組織中nm23 H1蛋白的表達與淋巴結轉移及腫瘤臨床分期有關。胃癌臨床TNM分期越晚,組織中nm23H1蛋白表達水平越低;無淋巴結轉移者nm23H1陽性表達率明顯增高,而有淋巴結轉移者nm23H1陽性表達率明顯降低,提示nm23H1蛋白表達水平越低預后可能越差。胃癌病人血清及癌組織中nm23 H1蛋白的表達,可以作為評估胃癌病人預后的指標。

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(本文編輯 厲建強)

THE EXPRESSION AND ITS CLINICOPATHOLOGIC SIGNIFICANCE OF NM23H1 IN SERUM AND CANCER TISSUE OF PA-TIENTS WITH GASTRIC CANCER

SONG Peiduo,HONG Guangchen (The People’s Hospital of Qingdao Shinan District, Qingdao 266002,China)

ObjectiveTo study the expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue and the relationship between them and clinicopathologic features in patients with gastric cancer.MethodsEmploying immunohistochemical S-P method and ELISA,the expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue in 69 patients with gastric cancer were detected,and their correlation with clinicopathologic characteristics analyzed.ResultsThe expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue in the patients were significantly different as compared with the normal control group(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05),the expressions were related with lymph-node metastasis and clinical staging(χ2＝12.30,5.30;t＝14.67,6.42;P＜0.05).ConclusionThe expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue are down-regulated,and,therefore,nm23H1 can be used as an index for predicting prognosis of patients with gastric cancer.

stomach neoplasms;nm23H1;prognosis

R735.2

A

1008-0341(2014)01-0006-03

10.13362/j.qlyx201401003

2013-10-12;

2013-11-26

宋培鐸(1972-),男,碩士,主治醫師。