百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠腎臟的保護作用

宋艷麗,劉興林,陳德森

(湖北醫藥學院,湖北十堰 442000 1 附屬太和醫院消毒供應中心; 2 實驗動物中心; 3 機能實驗室)

百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠腎臟的保護作用

宋艷麗1,劉興林2,陳德森3

(湖北醫藥學院,湖北十堰 442000 1 附屬太和醫院消毒供應中心; 2 實驗動物中心; 3 機能實驗室)

目的觀察百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠腎臟的影響并探討其作用機制。方法45只大鼠隨機分為對照組、模型組及百令膠囊組,其中模型組及百令膠囊組大鼠采用腹腔注射鏈脲菌素(25 mg/kg)建立糖尿病模型,對照組僅注射0.5 m L枸櫞酸緩沖液,1周后百令膠囊組以10 mg/kg百令膠囊灌胃,每天1次;對照組及模型組以10 m L/kg生理鹽水灌胃,每天1次,3組大鼠連續灌胃49 d。于第7、28、49天各組分別處死大鼠5只,測量腎臟質量并計算腎指數;第7、28、49天大鼠尾靜脈取血測定血糖、血清肌酐及尿素氮水平;同時收集24 h尿液測定尿微量清蛋白的水平。結果第7、28、49天百令膠囊組腎臟質量、腎指數、血清肌酐、尿素氮及尿微量清蛋白水平明顯低于模型組,差異均有顯著性(F＝13.32～85.36,q＝3.58～92.39,P＜0.05)。百令膠囊組血糖與模型組比較,差異無顯著性(P＞0.05)。結論百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠腎臟具有一定的保護作用,其作用機制可能與其阻止腎間質病變、糾正蛋白質及脂質代謝、延緩腎功能減退,進而改善腎功能有關。

百令膠囊;尿微量清蛋白;血糖;血尿素氮

百令膠囊是經現代工藝發酵冬蟲夏草菌粉制成的中藥,該藥具有補肺腎,益精氣,保護腎臟和肝臟等作用[1]。用于肺腎兩虛引起的腰背酸痛及糖尿病腎病(DKD)的輔助治療。本研究旨在觀察百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠腎臟的影響,為臨床治療DKD提供理論依據?，F將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇雄性SD大鼠45只,體質量180～220 g, SPF級,由湖北省實驗動物研究中心提供,合格證號:SCXK(鄂)2010-2013。

1.2 藥品試劑及儀器

百令膠囊為杭州中美華東制藥有限公司產品,鏈脲佐菌素(STZ)為美國Sigma公司產品,大鼠尿清蛋白EIA測定試劑盒為美國RND公司產品,日立7150型全自動生化分析儀為日本日立精密儀器株式會社產品。

1.3 實驗性大鼠糖尿病模型制備及各組處理

按文獻[2]的方法給予大鼠高糖高脂飲食5個月,然后禁食12 h,隨機分為對照組、模型組及百令膠囊組,模型組及百令膠囊組大鼠均腹腔注射STZ 25 mg/kg誘導糖尿病模型(每天1次,連續注射1周),對照組注射0.5 m L枸櫞酸緩沖液。以腹腔注射后第7天大鼠隨機血糖(Blu)≥16.7 mmol/L,尿糖(?～)以上者為糖尿病模型造模成功。造模成功后,對照組及模型組大鼠每天每次以10 m L/kg生理鹽水灌胃,百令膠囊組每天每次以10 mg/kg百令膠囊灌胃,連續灌胃49 d,于第7、28、49天分別尾靜脈取血檢測大鼠Blu、血清肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)的水平;同時留取24 h尿液,檢測尿微量清蛋白(U-MA)含量。各組于第7、28、49天處死5只大鼠,取右側腎臟,清除腎門處血管及結締組織,測定大鼠腎臟質量(LRW)及并計算腎指數(RWI)。

1.4 觀察指標及檢測方法

使用Uritest-500尿液分析儀以免疫比濁法測定U-MA的含量,使用日立7150型全自動生化分析儀電極法測定血清BUN和Cr的水平。Blu按常規方法檢測。

1.5 統計學處理

采用SPSS 15.0及PPMS 1.5[3]軟件進行數據處理,結果以±s表示,組間比較采用方差分析。

2 結 果

2.1 百令膠囊對糖尿病大鼠LRW及RWI的影響

模型組大鼠第7、28、49天LRW及RWI明顯高于對照組,差異有顯著性(F＝23.29～85.36,q＝9.58～90.31,P＜0.05)。而百令膠囊組在第7、28、49天LRW及RWI明顯底于模型組,差異有顯著性(q＝21.54～68.39,P＜0.05)。見表1。

2.2 百令膠囊對糖尿病大鼠Blu及U-MA水平的影響

模型組第7、28、49天Blu含量均明顯高于對照組,差異有顯著意義(F＝27.85～79.36,q＝3.58～46.01,P＜0.05)。百令膠囊組第7、28、49天Blu含量與模型組比較,差異無顯著性(P＞0.05)。百令膠囊組第7、28、49天U-MA水平明顯低于模型組,差異有顯著性(q＝11.58～70.37,P＜0.05)。見表2。

2.3 百令膠囊對實驗性糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影響

模型組第7、28、49天Cr、U-MA含量均明顯高于對照組,差異有顯著意義(F＝13.32～85.36,q＝3.58～47.31,P＜0.05)。百令膠囊組第7、28、49天Cr的含量均明顯低于模型組,差異有顯著意義(q＝11.51～76.31,P＜0.05)。百令膠囊組在第28及49天BUN水平明顯低于模型組,差異有顯著性(q＝3.58、92.39,P＜0.05)。見表3。

表1 百令膠囊對糖尿病大鼠LRW及RWI的影響(±s,n＝5)

表1 百令膠囊對糖尿病大鼠LRW及RWI的影響(±s,n＝5)

與對照組比較,F＝23.29～85.36,?q＝9.58～90.31,P＜0.05;與模型組比較,＃q＝21.54～68.39,P＜0.05。

組 別LRW(m/g) RWI(χ/%)第7天第28天第49天第7天第28天第49天對 照 組0.663±0.062 0.671±0.061 0.677±0.063 0.314±0.041 0.309±0.401 0.312±0.032模 型 組 0.889±0.038?0.912±0.039?0.874±0.392?0.494±0.039?0.487±0.037?0.464±0.238?百令膠囊組 0.827±0.035＃0.748±0.029＃0.696±0.357＃0.412±0.025＃0.395±0.036＃0.364±0.027＃

表2 百令膠囊對糖尿病大鼠Blu和U-MA水平的影響(±s,n＝20)

表2 百令膠囊對糖尿病大鼠Blu和U-MA水平的影響(±s,n＝20)

與對照組比較,F＝27.85～79.36,?q＝3.58～46.01,P＜0.05;與模型組比較,＃q＝11.58～70.37,P＜0.05。

組 別Blu(c/mmol·L-1) U-MA(mg/24 h) 7天28天49天7天28天49天對 照 組7.29±0.31 6.57±0.22 7.25±0.32 1.79±0.17 1.52±0.19 1.66±0.12模 型 組 22.39±2.31?24.58±2.12?29.26±2.36?7.27±0.22?7.11±0.33?7.19±0.21?百令膠囊組20.31±2.37 21.64±2.29 25.53±1.47 5.71±0.25＃4.55±0.21＃3.94±0.15＃

表3 百令膠囊對糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影響(±s,n＝20)

表3 百令膠囊對糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影響(±s,n＝20)

與對照組比較,F＝13.32～85.36,?q＝3.58～47.31,P＜0.05;與模型組比較,＃q＝3.58～92.39,P＜0.05。

組 別Cr(ρ/mg·L-1) BUN(c/mmol·L-1) 7天28天49天7天28天49天對 照 組5.2±0.3 5.8±0.3 5.2±0.2 90.71±0.33 91.57±0.45 91.56±0.39模 型 組 37.3±1.4?30.1±1.3?24.2±1.1?135.21±10.54?135.14±10.13?128.74±9.41?百令膠囊組 14.5±1.1＃8.1±0.5＃6.4±0.3＃129.69±8.52 92.52±2.42＃90.72±0.67＃

3 討 論

DKD是晚期糖尿病最重要的微血管并發癥之一,是終末期腎病的主要原因,也是糖尿病的主要死因[4]。主要表現為蛋白尿,漸進性腎功能損害、高血壓、水腫等,死亡率高。因此,對DKD的診治顯得尤為重要,而中醫藥在控制DKD的癥狀及延緩病情發展方面有著重要的作用,篩選開發治療DKD的生物資源對糖尿病病人的康復和生活質量的提高具有重要意義。

百令膠囊富含氨基酸、多糖、有機酸、多種微量元素、核苷、肽類及甾醇類等多種化學成分,主要成分是蟲草多糖,具有多種藥理活性,包括保護肝腎功能、抗炎及免疫調節作用等?？赏ㄟ^調節人體免疫功能、調控腎臟固有細胞增殖及細胞外基質合成,調節細胞因子、生長因子及改善人體代謝機制,發揮減少尿蛋白、改善腎功能及減輕腎臟病理改變等多種作用[5]。

本研究結果顯示,百令膠囊組在治療后U-MA排泄量逐漸下降,且明顯低于模型組,提示百令膠囊能有效降低U-MA水平,這與胡楊青等[6]利用人工蟲草干預大鼠后,可明顯減少大鼠24 h的U-MA水平,從而保護腎臟,延緩腎小球硬化的進程一致。本實驗結果亦顯示,百令膠囊對糖尿病大鼠腎臟具有一定的保護作用,其作用機制可能與減少炎性遞質的產生,增加腎血流量及腎小球濾過率,改善微循環,降低U-MA及腎小管對Cr及BUN的重吸收進而改善腎功能有關[7]?，F代藥理學與臨床研究亦證明,百令膠囊可降低糖尿病大鼠LRW及RWI,具有延緩腎小球基底膜增厚及足突融合,抑制腎間質病變等保護腎臟的作用。與本文研究結果一致。

總之,本實驗研究證實,百令膠囊對糖尿病大鼠腎臟有一定的保護及治療作用,下一步我們將采用免疫學方法觀察百令膠囊對糖尿病大鼠腎小管再生情況的影響。

[1]田劭丹,李冬云,侯麗,等.百令膠囊抗腫瘤研究進展[J].實用中醫內科雜志,2006,20(1):7-8.

[2]張麗,李素梅,葉山東,等.安體舒通對2型糖尿病大鼠腎臟的保護作用及對腎組織mcp-1表達的影響[J].陜西醫學雜志2010,39(1):9-10.

[3]周曉彬.醫用統計學軟件PPMS 1.5在醫學科學研究中的應用價值[J].青島大學醫學院學報,2011,47(6):504-506.

[4]王麗萍,朱本章.糖尿病腎病71例死因分析[J].陜西醫學雜志,2009,38(3):371-372.

[5]陳曉燕.百令膠囊的藥理與臨床研究進展[J].中醫藥導報, 2009,15(2):92.

[6]胡楊青,周巧玲,劉抗寒,等.百令膠囊對糖尿病腎病鼠腎組織轉化生長因子β/C-myc表達的影響[J].腎臟病與透析腎移植雜志,2005,14(5):413.

[7]高清華,王銘,張瑞杰,等.銀杏達莫聯合百令膠囊治療早期糖尿病腎病的臨床研究[J].齊魯護理雜志,2010,16(21):123.

(本文編輯 厲建強)

PROTECTIVE EFFECT OF BAILING CAPSULE ON THE KIDNEY OF EXPERIMENTAL DIABETIC RATS

SONG Yanli,LIU Xinglin,CHEN Desen (Disinfection Centre,Taihe Affiliated Hospital,Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,China)

ObjectiveTo observe the protection of Bailin capsule on the kidney of experimental diabetic rats and explore its mechanism.MethodsForty-five rats were evenly randomized to control group,model group and Bailing capsule group.A diabetes model was created in rats in model group and Bailing capsule group by intraperitoneal injection of streptozotocin(25 mg/ kg),those in the control group were injected only 0.5 m L citric acid buffer solution.One week later,the rats in the model group started to receive intragastric Bailing capsule(10 mg/kg,once a day,for 49 days),those in the control group and model group were given intragastric normal saline(10 m L/kg,once a day,for 49 days).On days 7,28,and 49,five rats in each group were killed in each time,the weight of the kidney was measured,and the quality index calculated;the blood samples were taken from caudal vein for blood sugar,creatinine and blood urea nitrogen detection,and 24-hour urine was collected for detecting urinary albumin.ResultsThe kidney quality,kidney index,serum creatinine,urea nitrogen and urinary albumin levels(on days 7,28 and 49)in rats of Bailing capsule group were lower than that of the control group,the differences were significant(F＝13.32-85.36,q＝3.58-92.39,P＜0.05),the difference of blood sugar between the two groups was not significant(P＞0.05).ConclusionBailing capsule shows protection on the kidney of experimental diabetic rats,its mechanism may be related to preventing pathologic changes of renal interstitial,correcting protein and lipid metabolism,and delaying the deterioration of kidney function, and thus improving the renal function.

bailing capsule;urinary microalbumin;blood glucose;blood urea nitrogen

R587.1

A

1008-0341(2014)01-0035-03

10.13362/j.qlyx201401013

2013-03-16;

2013-08-22

宋艷麗(1971-),女。

陳德森(1970-),男,副教授。