益氣活血利水方對慢性心力衰竭大鼠心肌重構(gòu)的影響

吳華堂，吳剛強(qiáng)，申 思，毛湘屏，劉文頻，范紅輝

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年病科，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410007；3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，湖南 長沙 410007）

心肌重構(gòu)是慢性心力衰竭發(fā)生發(fā)展的分子基礎(chǔ)。近年來對心衰的治療發(fā)生了重大的戰(zhàn)略轉(zhuǎn)移，從單純的改善心衰的癥狀，轉(zhuǎn)移到了早期阻斷心肌重構(gòu)這一環(huán)節(jié)。益心泰為中藥復(fù)方制劑，功效為益氣活血利水，主治氣虛血瘀水停證，對氣虛血瘀水停型慢性心力衰竭療效確切［1-4］。我們以慢性心力衰竭大鼠為研究對象，用益心泰進(jìn)行干預(yù)，以期為益心泰干預(yù)心肌重構(gòu)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

動物: 110健康Wistar雄性大鼠（均由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供），體質(zhì)量200～250g。

藥品與試劑: 益心泰（黃芪、紅花、豬苓、丹參等）由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科提供。科索亞由杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn)，批號H20000371，規(guī)格50mg/片，臨用時(shí)用蒸餾水配置成混懸液。

1.2 方法

動物模型的建立: 110只健康Wistar雄性大鼠隨機(jī)抽取15只作為空白對照組，余95只用于造模。采用冠狀動脈結(jié)扎法制備慢性心力衰竭大鼠模型，其方法簡述如下：5%戊巴比妥鈉（1～2 mL/kg） 腹腔注射麻醉大鼠后。沿第3—4肋間隙打開胸腔，暴露心臟，用鑷子輕提左心耳，于左冠狀動脈前降支起源點(diǎn)下2～4 mm處用6號絲線結(jié)扎左冠狀動脈主干造成心肌梗死。隨即逐層縫合胸壁。術(shù)后記錄標(biāo)準(zhǔn)肢導(dǎo)聯(lián)及胸前導(dǎo)聯(lián)心電圖（紙速50mm/s），ST段弓背抬高者為心肌梗死造模成功。待動物恢復(fù)自主呼吸狀態(tài)平穩(wěn)后撤離呼吸機(jī)，并注射青霉素鈉4萬IU，每日1次，共1周，防止感染。常規(guī)喂養(yǎng)飼料與水7周后，大鼠逐漸出現(xiàn)呼吸、心跳加快，怕冷少動，倦怠無力，食欲不振、紫紺、皮下水腫等癥狀，造模過程中共死亡20只，剩余75只大鼠采用心臟彩超評價(jià)，均顯示左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）<50%，結(jié)合大鼠一般情況表現(xiàn)，提示慢性心力衰竭大鼠模型制備成功。

實(shí)驗(yàn)分組及處理: 造模成功后將造模成功的75只心衰大鼠按照完全隨機(jī)方法分為5組，模空組、益心泰高劑量組、益心泰中劑量組、益心泰低劑量組和科索亞組，每組各15只，加上空白對照組15只，共6組。空白組不進(jìn)行藥物干預(yù)，模空組灌服同等體積的生理鹽水，益心泰高劑量組灌服10.4g/（kg·d），益心泰中劑量組灌服5.2g/（kg·d），益心泰高劑量組灌服2.6g/（kg·d），科索亞組灌服5.21g/（kg·d），均每日1次，共用藥8周。

1.3 觀察指標(biāo)

超聲指標(biāo): 用GE公司的ViVi7型彩色多普勒超聲診斷儀，探頭選用10S，圖像深度調(diào)至2～4cm，頻率為11.4MHz，測量大鼠治療前后室間隔厚度（IVS）、左心室后壁厚度（LVPW）、左心室舒張末內(nèi)徑（LVIDd）、左心室收縮末內(nèi)徑（LVIDs）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室短軸縮短率（LVFS）。

心肌重構(gòu)指標(biāo): 動物稱重處死后，迅速取分離后的心臟，用生理鹽水沖洗后用干紗布吸干水分，稱取心臟質(zhì)量。除去心房和右室組織，稱取左心室質(zhì)量，計(jì)算心臟指數(shù)（心臟質(zhì)量/體質(zhì)量）和左心室重量指數(shù)（左心室質(zhì)量/體質(zhì)量）。

心肌組織病理學(xué)檢查: H-E和Masson常規(guī)染色，光鏡下觀察，采用Mivnt圖像分析系統(tǒng)計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)（collagen volumefraction，CVF），CVF=心肌膠原面積／所測視野面積，所有標(biāo)本均隨機(jī)選取4個(gè)視野，取平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

用藥后各組大鼠LVEDD和LVESD比較 : 與空白對照組比較，模空組LVIDd、LVIDs明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模空組比較，益心泰高、中、低劑量組和科索亞組LVIDd、LVIDs均顯著降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而益心泰高劑量組與科索亞組之間LVIDd、LVIDs比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 各組大鼠LVEDD、LVESD、IVS指標(biāo)比較 （mm，）

表1 各組大鼠LVEDD、LVESD、IVS指標(biāo)比較 （mm，）

注：與空白對照組比較，▲P＜0.05；與模空組比較，△P＜0.05。

組別 n LVIDd LVIDs空白對照組 15 5.17±0.58 3.61±0.55模空組 15 7.15±0.59▲ 6.23±0.61▲益心泰低劑量組 15 6.62±0.63△ 5.77±0.44△益心泰中劑量組 15 6.57±0.58△ 5.45±0.46△益心泰高劑量組 15 6.15±0.55△ 4.98±0.55△科索亞組 15 6.11±0.54△ 5.08±0.47△

用藥后各組大鼠LVEF和LVFS比較: 與空白對照組比較，模空組LVEF和LVFS明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模空組比較，益心泰高、中、低劑量組和科索亞組LVEF和LVFS均顯著升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而益心泰高劑量組與科索亞組之間LVEF和LVFS無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 各組大鼠LVFS、LVEF指標(biāo)比較 （%，）

表2 各組大鼠LVFS、LVEF指標(biāo)比較 （%，）

注：與空白對照組比較，▲P＜0.05；與模空組比較，△P＜0.05。

組別 n LVFS LVEF空白對照組 15 44.25±2.96 72.48±10.23模空組 15 31.55±2.33▲ 41.84±2.79益心泰低劑量組 15 34.77±1.31 44.49±3.06益心泰中劑量組 15 35.89±2.31△ 49.31±2.49益心泰高劑量組 15 39.44±1.75△ 53.51±4.00科索亞組 15 39.39±1.84△ 66.92±4.11

3 討 論

慢性心力衰竭是各種原因引起的心肌損傷，導(dǎo)致心臟結(jié)構(gòu)或功能的改變，伴有心室充盈和/或射血能力受損的一組臨床綜合征。現(xiàn)心衰的發(fā)病率為0.9%，根據(jù)國外和香港的資料示一年內(nèi)病死率在20%～40%。近年來，隨著免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，對慢性心力衰竭的發(fā)病機(jī)制有了更深一步的認(rèn)識。現(xiàn)認(rèn)為心衰發(fā)生的基本機(jī)制是心肌重構(gòu)。心肌重構(gòu)雖然是一種慢性發(fā)展的過程，但及時(shí)和合理的治療和干預(yù)可抑制其進(jìn)展，甚至逆轉(zhuǎn)。

益心泰由黃芪、紅花、丹參、澤瀉等組成。方中以大劑量黃芪為君藥大補(bǔ)元?dú)猓蛳[。藥理學(xué)研究表明，黃芪有效成分不但能夠改善慢性心力衰竭患者心室收縮和舒張功能，糾正血流動力學(xué)異常，尚能抑制心室重構(gòu)，從而控制心力衰竭的進(jìn)展。方中澤瀉、豬苓利水滲濕。諸藥合用，共奏益氣養(yǎng)心、活血利水之功。通過益氣、活血和利水，達(dá)到補(bǔ)其虛祛其瘀利其水而治療慢性心力衰竭的目的。研究結(jié)果表明，治療8周后，與模型組比較，益心泰低、中、高劑量組LVIDd、LVIDs和心臟指數(shù)均明顯降低（P＜0.05），而LVEF和LVFS水平顯著升高（P＜0.05），說明益心泰能改善心功能。從病理學(xué)的角度驗(yàn)證了益心泰改善慢性心力衰竭的療效。

益心泰可以改善慢性心力衰竭大鼠心肌重構(gòu)，減少膠原沉積。但是其具體的機(jī)制仍需進(jìn)一步深入探討。

［1］郭志華，李雅，毛以林，等.益心泰丸治療慢性心力衰竭60例臨床觀察［J］.中成藥，2008，30（3）：323-325.

［2］李慶.益心泰治療慢性心力衰竭160例臨床觀察［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，17（3）：557-558.

［3］郭志華，毛以林，鄭愛華. 益心泰治療慢性心力衰竭40例臨床觀察［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，16（5）：30-31.

［4］郭志華，范紅輝，李雅，等.益心泰治療氣虛血瘀水停型慢性心力衰竭［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2009，12（1）:127-128.