淺談農藥殘留速測法的實驗室內部質量控制

金曉輝

（朝陽市種子管理站，遼寧 朝陽 122000）

隨著生活水平的不斷提高，人們對食品質量提出了越來越高的要求，食品安全成了大家關注的問題，而準確檢測農藥殘留是保障食品質量安全的關鍵所在。本文所討論的農藥殘留快速檢測法GB/T5009.199-2003是我國現行推廣應用較多的，依據酶抑制原理建立的農藥殘留速測法。在農藥殘留的快速檢測中，為了保障檢驗結果的準確性，在日常工作中要注意開展質量控制，實驗室的質量控制包括室間質量控制和室內質量控制。本文主要探討室內質量控制。實驗室內部質量控制簡稱“內部控制”。內部控制是實驗室自我控制質量的常規程序，它能反映分析質量穩定性狀況，以便及時發現分析中異常情況，隨時采取相應的校正措施。

質控的好壞直接影響著平日的檢測工作。影響質控主要有以下幾個因素：技術人員在質量上的控制、對樣品以及試劑的控制、對檢測儀器的控制和實驗室內環境的控制等。

1 檢測人員的質量控制

在這一環節上應該重點落實檢測人員對所需理論知識、實際操作和判斷的熟練程度。每個人都應該積極參加上級部門組織的培訓，不斷充實理論知識，提高檢測水平。此外，實驗室內應該把檢測方法進行必要的統一，按照國家的的標準、規章制度等做好各級人員的職責以及權限。

2 試劑及樣品的質量控制

2.1 試劑的一般質量要求

2.1.1 速測試劑的環境控制

速測試劑放置環境的溫度一定要控制在規定范圍之內。酶抑制率測試法中用到的試劑基本都是生化試劑，所以，它們的保存環境比較特殊。對于粉劑化的酶及底物應該放于-18℃的環境中。對于已被配制成溶液的藥劑，適應保存的環境溫度為0-4℃之間。而浸提劑在任何環境下都可以保存。

2.1.2 速測試劑配制注意事項

速測試劑在配制的時候一定要注意標記和配制的日期。在制配樣液的時候，浸提是否充分，直接影響著結果的好壞。酶試劑和樣品液之間產生反應后持續10分鐘，時間長短不同，產生的結果也是不一樣的。反應完之后，在冰箱中取出試劑，待其緩解到與室內溫度平衡的時候，搖勻使用。這時候，在保證液體試劑清澈的環境下，按照標準加入一定量的酶、顯色劑和底物，漏加或多加都會對實驗造成壞的影響。實驗中，還要保證試劑在瓶中吸出后不得再注射回試劑瓶。

2.1.3 注意保質和生產日期

認真核對試劑的生產日期和保質期，一定要保證沒有變質的情況下使用。所以，為了防止變質，不論哪種試劑，用一瓶開一瓶，直到用完后才可以打開下一瓶。

2.2 樣品的質量控制

檢驗結果是否準確要看樣品是否合格，因此，樣品的正確采集、保存和處理是非常重要的。

2.2.1 取樣注意事項

取樣時要注意的是，最好選用沒有水洗過、有代表性的蔬菜，按照隨機抽取的方式分樣分裝，然后在1天內送到實驗室。

2.2.2 不同樣品的處理方法

菜葉的取樣要用到專門的菜葉取樣器，分別取8-10片不同的植株葉片；果菜的樣品要用取樣器在其表面取約1厘米的樣本，然后再用專用剪刀切成1厘米左右的塊狀。

2.2.3 特殊樣品的處理方法

有些果蔬中含有大量植物次生質，這些對酶是有直接影響的。例如：蔥、蒜、香菜、芹菜等，其中有些蔬菜中含有很高的葉綠素，彼此之間產生比色反應，并且容易出現假陽性，果蔬的辛辣味越濃，出現這種現象的頻率越高。因此，對于這些性質特殊的果蔬來說，最好是采用整體浸提的方法來消除干擾。

3 檢測儀器設備的質量控制

3.1 電子天平使用

電子天平的工作環境應無大的振動及電源干擾，無腐蝕氣體及液體。天平在每次使用前都必須預熱（15分鐘以上）。較長時間未使用，則應對其校正。

3.2 儀器使用

農藥殘毒快速檢測儀在使用前，最好要把儀器預熱5-10分鐘，使儀器穩定一下。儀器要保證在正常的環境條件下工作。

3.3 器具使用原則

器具專用，轉移徹底，振蕩均勻。在加提取液振蕩提取殘留農藥這一過程中，各種移液管和加液管要分門別類,不可用同一器具盛用不同液體,因為即使刷干凈了,也會對結果有不同程度的影響；轉移或滴加液體要確保液面對準刻度線，釋放液體要徹底；有條件的話最好選用振蕩器，以消除人為因素的干擾。

3.4 準確調零，掌握好速度

檢測設備之前的預熱調零是非常必要的，調整好之后準備比色皿進行檢測，此時一定要正置；此外，在加酶試劑產生顯色反應的時候，對照并分析樣品的加入量。

4 實驗室的環境條件質量控制

4.1 具備的設施

為了保障實驗室的安全，應該具備的設施有：帶有排風系統的試劑柜、防火設施、實驗人員所需的防毒面具和急救藥品箱等。

4.2 保證實驗室空氣環境

為了實驗室內的氣體排出室外，應該裝有排風機，排氣次數最好在5次以上。還可以設置空調機，將溫度控制在20℃以內，過高或者過低都會影響酶的活性，從而影響實驗結果。

5 檢測結果質量控制

在快速檢測儀中放入要檢測的樣品，3分鐘之后讀出并記錄檢測數據，分析檢測結果的數據來確定檢測過程的準確性。

5.1 空白試驗

判定標準：空白測試3min得吸光度差值0.4≤Ac≤0.8。Ac＜0.4的原因：一是，酶的活性不夠；二是，溫度太低。

解決辦法：適當增加酶的用量或更換酶；保證反應溫度37℃-38℃。

5.2 農藥標準品加標試驗

加標合格率達100%。

5.3 平行樣測定

取測定樣品數量的10%-15%做平行，5個樣品以下，應增加到100%。

5.4 檢測結果中抑制率出現負值原因分析

檢測結果中抑制率出現負值，是指在計算中樣本的△A。(3分鐘后與3分鐘前吸光值的差)比空白值的△A。(空白3分鐘后與3分鐘前吸光值的差)要大。造成的原因：一是，操作中的系統誤差，如果操作中不夠熟練就會產生人為的系統誤差。較小的負值誤差(－10%)以下，則是在允許范圍之內。否則必須進行兩次重復檢測；二是，試劑從冰箱取出后，未恢復到室溫進行對照測試；對照測試時間與樣品測試時間相隔太久，導致光照與樣品測試溫度條件相差較大；三是，被測樣品色素干擾較嚴重；反應試劑取用量是否準確。另外，其他非測試孔空白的孔位可能也會出現負值。儀器操作時，注意托盤上的孔位不能有頭發、棉絲等其他異物，如有污物或液體可用過濾紙擦干凈，以免影響光路測量。

總之，在農殘實驗室的質量控制方面一定要嚴格并長期執行。實驗室人員要通過相互探討整理出日常中不可缺少的實驗操作手冊，并堅持執行，不得松懈，只有這樣，才能體現出質量控制的重要性。其目的主要是把誤差控制到最小，來保證檢測數據的準確。此外，在檢測蔬菜樣品的過程中，態度一定要嚴肅認真，按照程序一步步的進行，建議對抑制率≥50%以上的菜樣，應進一步采用色譜或質譜方法定性定量分析，以確定其農藥殘留是否真的超標，更客觀地為政府工作提供依據。S

［1］王傳新,王國禮.現代檢驗醫學技術及質量控制[M].濟南：山東科學技術出版社,2004：139.

［2］葉小君,藍萍.農藥殘留速測儀在蔬菜農殘檢測中的應用[J].農技服務,2010(1)：138.